对于ALP水解底物测定有哪些方法
规律
1 1
2 1+3+1
3 1+3+5+3+1
4 1+3+5+7+5+3+1
..................
n 1+3+5+7+...+(2n-3)+(2n-1)+(2n-3)+....+7+5+3+1
相当于正奇数前n项和的2倍减去第n项
因此
f（n）=2* 【n(1+(2n-1))】/2-(2n-1)
=2*【n*2n】/2-2n+1
=2n^2-2n+1
理工学科是指理学和工学两大学科。理工，是一个广大的领域包含物理、化学、生物、工程、天文、数学及前面六大类的各种运用与组合。
理学
理学是中国大学教育中重要的一支学科,是指研究自然物质运动基本规律的科学,大学理科毕业后通常即成为理学士。与文学、工学、教育学、历史学等并列，组成了我国的高等教育学科体系。
理学研究的内容广泛，本科专业通常有：数学与应用数学、信息与计算科学、物理学、应用物理学、化学、应用化学、生物科学、生物技术、天文学、地质学、地球化学、地理科学、资源环境与城乡规划管理、地理信息系统、地球物理学、大气科学、应用气象学、海洋科学、海洋技术、理论与应用力学、光学、材料物理、材料化学、环境科学、生态学、心理学、应用心理学、统计学等。
工学
工学是指工程学科的总称。包含 仪器仪表 能源动力 电气信息 交通运输 海洋工程 轻工纺织 航空航天 力学生物工程 农业工程 林业工程 公安技术 植物生产 地矿 材料 机械 食品 武器 土建 水利测绘 环境与安全 化工与制药 等专业。
正常成人血清ALP主要来自肝脏，而来自骨组织的ALP一般少于总活性一半。其各自含量与年龄密切相 关，但也受性别的影响。还可能存在少量的小肠型ALP，特别是血型为分泌型B型或O型的人。 现已知人体含4型ALP同工酶，即肠型（IALP）、胎盘型（PALP）、生殖细胞型（GALP）和非特异组织型（TUALP）ALP。其中非特异组织型碱性磷酸酶在基因表达后经过不同的修饰形成肝、肾、骨等次级同工酶。
[临床意义] 肝胆疾病，尤其是阻塞性黄疸患者，该酶活性显著升高。骨骼疾病时血清ALP活性增高。血清ALP活性测定成为鉴别肝胆疾病和诊断骨质增生不可缺少的指标。 [测定原理] 在碱性条件下，碱性磷酸酶将无色磷酸对硝基苯酚水解为黄色对硝基苯酚，在405nm测定对硝基苯酚生成 的速率，这个速率与血清中ALP活性成正比。反应需要Mg2+作为激活剂。 [常用测定方法] 测定ALP活性受到组织来源、底物类型、反应温度，特别是缓冲液种类的影响，目前，国际上生化试剂主要生产厂家，生产的ALP检测试剂盒的主要差异就在于所使用的缓冲液不同。常用的激活型缓冲液不仅起缓冲作用，并可作为磷酸的受体参与反应，因而能增进酶促反应的速率。激活型缓冲液中，二乙醇胺（DEA）的激活作用比2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）的激活作用更强。因此用不同缓冲液测定的ALP活性，其参考值不同。 不少国家，包括我国，多采用AMP或DEA做缓冲液，但这两类物质不易提纯，前者常混有5-氨基-3-吖-2, 2,5-三甲基乙醇，后者易含一乙醇胺，均对ALP有抑制作用。故日本学者建议采用2-乙氨基乙醇缓冲液，而德国学者建议使用甲基葡萄糖胺缓冲液，此类试剂纯度高，不含抑制ALP活性的物质，可不加螯合剂，其pK值高于DEA。
根据所使用的激活型缓冲液不同，目前常用的检测方法主要有四种： 1、 IFCC推荐方法：AMP（2-氨基-2-甲基-1-丙醇）缓冲液 正常参考范围：45~130 U/L，37℃ 2、 JSCC推荐方法：EAE（2-乙氨基乙醇）缓冲液 正常参考范围：115~359 U/L，37℃ 3、 GSCC推荐方法：DEA（二乙醇胺）缓冲液 正常参考范围：80~260 U/L，37℃ 4、 DSKG推荐方法（新GSCC方法）：MEG（N-甲基-D-葡萄糖胺）缓冲液 正常参考范围：45~130 U/L，37℃
二、甘油三酯（TG）常用测定酶法中，为什么采用推荐方法—去除游离甘油的二步酶法优于一步酶法？
血脂异常是动脉粥样硬化性疾病的重要危险因素之一，甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（TC）、高密度与低密度脂蛋白胆固醇（HDL-C与LDL-C）是四项基本指标。临床上制定四项血脂的合适水平或异常水平的划分标准、治疗指针及治疗目标，必须在血脂测定结果准确性的基础上进行。由于TG的脂肪酸组成复杂，而且血中还有游离甘油与不完全甘油酯，使TG测定的结果的准确性显得尤其重要。TG测定的常规方法，国内普遍采用甘油磷酸氧化酶法，也是检验学会的推荐方法，但目前因为商品试剂大都未用二步酶法去除游离甘油，这对多数住院病人是不合适的。 [测定原理] 标本中的游离甘油经第1试剂中甘油激酶（GK）作用，最后生成过氧化氢，再经过氧化氢酶分解成H2O，使游离甘油的影响被消除；另外，维生素C由维生素C氧化酶去除。第2试剂中TG等经脂蛋白脂酶（LPL）等作用所产生的过氧化氢，在POD的作用下，使4-氨基安替比林（4-AA）与HDAOS发生氧化缩合，生成紫色的醌色素，通过测定该色素的增加，求出TG浓度。
以SYSMEX公司生产的二步酶法TG测定试剂盒为例：
第一步反应： 抗坏血酸 + 1/2O2 AOD 脱氢抗坏血酸 + H2O 游离甘油 + ATP GK 3-磷酸甘油 + ADP 3-磷酸甘油 + O2 GPO 磷酸二羟丙酮 + H2O2 H2O2 过氧化氢酶 H2O + 1/2O2 第二步反应： 甘油三酯 + 3H2O LPL 甘油 + 3分子游离脂肪酸 甘油 + ATP GK 3-磷酸甘油 + ADP 3-磷酸甘油 + O2 GPO磷酸二羟丙酮 + H2O2 2H2O2 + 4-AA + HDAOS POD 醌类染料 [参考值 ] 高甘油三酯血症： 1.69mmol/L以上（150mg/dL以上）。
[说明] 现阶段允许一步酶法与两步酶法并存，要求逐步过渡到统一采用两步法。在未统一方法前，实验室报告TG测定结果时应注明“去FG值”或“未去FG值”，这将有助于临床医生对结果的正确判断。 正常人血清FG浓度平均约0.11mmol/L(10mg/dl)，在糖尿病、服用含甘油的药物、静脉营养、情绪应急、血标本污染时，FG将明显增高，以致影响对TG水平的判断。 国外学者建议：临床实验室应备有可以去FG空白的试剂，供必要时采用；糖尿病及特殊门诊以及TG>2.3mmol/L者，最好作FG空白校正。
我在饲料酶制剂行业也阅读相关不少资料，但是动物体内一连串的生物连锁反应，在做饲料酶制剂配方中，应该主要考虑哪些因素，这些因素又该做何解释？ 还有就是
化学发光剂的常用发光剂
（2）.对-羟基苯乙酸（HPA)。 对-羟基苯乙酸（HPA）在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体（荧光物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长的荧光，可用荧光光度计测量。（3）.AMPPD。 AMPPD在碱性条件下，被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子，其有2-30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光...
酶的活性高低与底物浓度有关吗??
(一)选合适的底物种类和浓度如所测的酶专一性不强,可作用于多种底物,首先就需决定选择哪一类底物作为测此酶的底物。如该项酶测定主要用于临床诊疗工作,则首先应考虑选有较高诊断价值的底物。例如临床上测定酸性磷酸酶主要用于诊断前列腺癌,所选的底物应对前列腺酸性磷酸酶有较高的特异性。不易被其它组织如红细胞...
碱性磷酸酶在人体中起什么作用,过多有什么影响?
碱性磷酸酶是磷酸酶的一种,磷酸酶的作用与激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子,如ATP,将磷酸基团加到对应底物分子上。碱性磷酸酶在碱性环境有最大活力,对来源于细菌中的ALP来说,其最适pH是8.0,而对来源于牛的ALP则是8.5。 ALP是一种含锌的糖蛋白,在碱性环境中(最适Ph为10左右)可以水解各种...
化学发光免疫分析仪分类
另一种相关的技术是化学发光酶免疫分析（CLEIA），它实质上是酶免疫分析的一个分支，区别在于酶反应的底物是发光剂。CLEIA的操作步骤与常规酶免疫分析完全一致，即使用酶标记的生物活性物质（如HRP或ALP标记的抗原或抗体）进行免疫反应，形成免疫复合物后，酶作用于发光底物，通过发光信号测定仪测量发光信号...
碱性磷酸酶km实验讨论,关于实验现象分析的。
正常参考值：女性50～135U\/L；男性45～125U\/L。临床意义：临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平，可测定同工酶以协助明确其器官来源。1.生理性增高 儿童在生理性的骨骼发育期，碱性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。处于生长期...
tmb是什么意思?
TMB（3,3',5,5'-四甲基苯胺）显色原理是一种常用于酶标记实验的显色方法，其基于酶催化底物生成有色产物的化学反应。具体来说，TMB显色原理主要包括以下几个步骤：1. 酶标记物的加入 将酶标记物（如辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶ALP等）加入待测样品中，使其与样品中的目标物质（如抗原或抗体...
抗体的抗体规律
细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势。CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗均为其专利产品。Assay Designs位于美国的密歇根州，成立于1992年，...
求生物化学检验大纲
【熟悉】酶促反应进程;酶促反应底物动力学(Km值及Vmax值的应用)。【了解】Km和Vmax的测定;同工酶产生的机理和同工酶的测定;酶活性测定最适条件的选择...实验二十五 血清ALP测定(金氏法2h)1. 目的与要求【掌握】金氏法测定血清ALP的原理及操作方法。2. 实验要点金氏法测定血清ALP的操作步骤及注意事项。实验...
ALP(King法)的合理底物浓度是多少?
ALP(King法)的合理底物浓度不会超过1.5%。King法：每100ml血清在37℃与底物作用60mim，每生成1μmol丙酮酸为一个酶活性单位。合理浓度肯定就在范围内了。
alp正常值
ALP能水解多种天然存在的或合成的有机磷酸酯(底物)。在体内，ALP的直正底物尚不清楚。ALP先天缺陷的个体，中大量排出磷酸乙醇胺，推测它可能是一种真正的生理性底物。在大多数AP测定方法中，释放出的磷酸基转移给水分子，此时ALP的海促反应属水解类反应。使用某些氨基缓冲液时，ALP的催化速率增强。一般...
蒯届荆花： 【步骤】 (1)用吸管吸掉96孔板内的培养液,用PBS冲洗3遍,加入含25mmol/L二乙醇胺,1mmol/L氯化镁和6.7mmol/L PNPP的反应液. (2)每孔150ul.37℃避光放置半小时,然后加0.1mol/L氢氧化钠100ul终止反应,用酶标仪于405nm波长下测定...
乐业县18424524578： 我想测试下我们的活性炭半成品中磷酸的含量,如何测定.谢谢了~ 要详细测定方法 - ？
蒯届荆花： 有很多种,我国曾应用较广的为磷酸苯二钠比色法,但现在应用较多的是连续检测法. 原理为以磷酸对硝基酚为底物,2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇胺为磷酸酰基的受体.在碱性环境下,ALP催化4-NPP水解产生游离的对硝基酚,在碱性溶液中转变成黄色.根据405nm处吸光度增高速率来计算ALP活性单位.
乐业县18424524578： ALp检测标准是多少 - ？
蒯届荆花： 标准值35-150过渡疲劳和饮酒都会导致ALP偏高,碱性磷酸酶(ALP)是指一组底物特异性很低,在碱性环境中能水解很多磷酸单酯化合物的酶,需要镁和锰离子为激活剂.近年为认为ALP真正作用是将底物中磷酸基团转移到另一个含羟基基团化合物上,磷酸乙醇胺有可能是ALP在体内作用的底物.
乐业县18424524578： ALP英语是什么意思 - ？
蒯届荆花： ALP是指碱性磷酸酶,英文全称为alkaline phosphatase .是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等.
乐业县18424524578： 碱性磷酸酶？
蒯届荆花： 血清碱性磷酸酶ALP是指一组底物特异性较低,在碱性环境中能水解很多磷酸单酯化合物的酶. ALP变化与年龄有关系.孕妇血清ALP在妊娠3个月就可以升高. 在临床上,ALP的测定常作为肝胆和骨骼疾病的辅助诊断指标.
乐业县18424524578： 无机磷测定酶促动力学法是什么 ？
蒯届荆花： 无机磷测定酶促动力学法是一种用于研究无机磷酶酶促反应动力学的方法.无机磷酶是一种催化无机磷酸盐水解的酶,它在生物体内起着重要的代谢和调节作用.该方法通过测定在不同底物浓度下,酶催化反应的速率来研究无机磷酶的催化机制和底物亲和力.
乐业县18424524578： 甲基对硫磷的监测方法 - ？
蒯届荆花： ⑴植物酯酶法和底物法(韩承辉等:《环境化学》,19⑵:187~189).⑵直接进水样气相色谱法. 监测方法 类 别 来 源 气相色谱法 水质 GB 13192—91 气相色谱法 水和土壤 GB/T 14522—93 气相色谱法;盐酸萘乙二胺分光光度法 空气和废气 ...
乐业县18424524578： 肝酵素的alp是什么意思 - ？
蒯届荆花： ALP是指碱性磷酸酶 .是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等.碱性磷酸酶是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶.碱性磷酸酶主要用于阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查
乐业县18424524578： 碱性零磷酶(ALP)是什么意思 - ？
蒯届荆花： 碱性磷酸酶(AKP或ALP)属于同源二聚体蛋白,分子量为56KDa.每个单体由449个氨基酸组成,完整的AKP分子呈现典型的α/β的拓扑结构,同时每个单体均具有一个活性中心,活性中心区域由Asp101-Ser102-Ala103三连体、Arg166、水...
