用高效液相色谱仪测某样品的成分时，如何确定对照品溶液的浓度？

用高效液相色谱法怎么算的样品浓度~

含量=[（浓度X稀释倍数）/供试品称样量]X100%
首先确定样品成分，获取该成分的纯品（对照品），将对照品溶液配制成与样品成分浓度相当的浓度（比如样品浓度是10mg/ml左右，对照品溶液就配制成10mg/ml）。
对照品溶液和供试品溶液分别进样，进行色谱分析，获得对照品成分峰面积与供试品溶液峰面积
此时已知对照溶液峰面积，对照溶液浓度，求供试品溶液浓度，因为成分在液相中响应值不变，故对照品溶液浓度/对照品溶液峰面积=F（即响应因子）=供试品溶液浓度/供试品溶液峰面积，求得供试品溶液浓度。

扩展资料：
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：
①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
⑥柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物
⑦样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

一般的有关物质对照溶液的浓度根据样品的最低检出限来定。
它们之间的关系为
检出限浓度的100倍为对照溶液的浓度，对照溶液浓度的100倍为样品溶液的浓度。
但在实际操作中应该根据具体的液相条件来确定，参照基线噪音，峰行等因素确定，一般对照溶液浓度比检出限浓度都大于100倍。
还有一个说法是将样品溶液的浓度定到作出的峰是平头的，再定对照溶液浓度，但我个人认为不太可行，那样浓度太大了。

确定是想知道对照品溶液的浓度？这个很好办啊，对照品说明上有它自身的浓度，之后再按你的配制转换下就好了，比如：我们用的标准品浓度为10mg/ml，我们的配制过程是取标准品溶液ml，之后定容到100ml的容量瓶，那标准品的浓度就为：10mg/ml*1ml除以100ml=0.1mg/ml

样品灵敏度和线性范围确定后，采用线性范围的一个点作为外标一点法可定量。

常用的是外标法
1、确定分析条件后（流动相比例，色谱柱类型，PH值，柱温等）用对照标准品进行分析，保存分析图，利用色谱工作站校正，得出校正曲线（校正因子）；
2、用同样的条件分析未知样品，根据出峰时间确定样品（与标准品相同的物质出峰时间应该相同），对照标准样品的校正曲线计算出未知样品的含量。

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荆州市17282733226： 用高效液相色谱仪测某样品的成分时,如何确定对照品溶液的浓度? - ？
佛面妇炎： 常用的是外标法 1、确定分析条件后(流动相比例,色谱柱类型,PH值,柱温等)用对照标准品进行分析,保存分析图,利用色谱工作站校正,得出校正曲线(校正因子); 2、用同样的条件分析未知样品,根据出峰时间确定样品(与标准品相同的物质出峰时间应该相同),对照标准样品的校正曲线计算出未知样品的含量.

荆州市17282733226： 用高效液相色谱法做一个药品中某种成分含量的测定需要多长时间? - ？
佛面妇炎：[答案] 每针大概需要10分钟左右吧,要看你需要做几组试验了,其实实验过程很短的,关键是实验前准备过程较长,高效液相色谱仪的仪器清洗大概需要20个小时左右吧,当然如果上一次做试验的人员已经把仪器清洗好了就不会花费很长时间了!

荆州市17282733226： 高效液相色谱可以鉴定化学成分吗 - ？
佛面妇炎： 你好,高效液相色谱仪鉴定化学成分(定性)是通过样品在相同分析条件下的出峰时间与已经标准样品的出峰时间对比来确定的,其实质是一种推理,需要两个条件:1、知道样品组份中有某种化学成分;2、有该种化学成分的标准品,用于确定该成分的出峰时间;有了这两个条件,才能将未知样品进行分析,当发现有相同时间内的组份峰,就认定为该化学化学; 由上述高效液相色谱仪定性的原理可知,高效液相色谱仪本身并不具备鉴定化学成分的功能,对于某些特定的物质,就算出峰时间一致,也不一定就是同一种化学成分;

荆州市17282733226： 高效液相色谱测某样品含量标准品用使用内标进行标定吗 - ？
佛面妇炎： 这个用不到做的那么复杂了吧,你如果有USP的基准品,再标出自己的标准品就行了,可以多做点,这样用着也不心疼,然后所有的标准曲线什么的都用这个标准品做就可以了,含量当然也是准的.

荆州市17282733226： 用高效液相色谱法分析测定血药浓度时,需要进行哪些预处理 - ？
佛面妇炎： 用高效液相色谱法分析测定血药浓度时,需要进行哪些预处理 首先确定样品成分,获取该成分的纯品(对照品),将对照品溶液配制成与样品成分浓度相当的浓度(比如样品浓度是10mg/ml左右,对照品溶液就配制成10mg/ml).对照品溶液和供试品溶液分别进样,进行色谱分析,获得对照品成分峰面积与供试品溶液峰面积.此时已知对照溶液峰面积,对照溶液浓度,供试品溶液峰面积,求供试品溶液浓度,因为成分在液相中响应值不变,故对照品溶液浓度/对照品溶液峰面积=F(即响应因子)=供试品溶液浓度/供试品溶液峰面积,求得供试品溶液浓度. 如果想算含量,含量=[(浓度X稀释倍数)/供试品称样量]X100%

荆州市17282733226： 高效液相色谱仪可以测定重金属含量吗 怎么测 - ？
佛面妇炎： 液相色谱只能测试易溶于甲醇/水/乙腈等溶剂,可以被色谱柱分离,并且在检测器上有响应的物质,如果没有标准对照品,是无法进行成分的定性和定量的,因为无法确定在某个保留时间出的峰是什么物质.

荆州市17282733226： 如何用液相色谱仪测氨基酸 - ？
佛面妇炎：[答案] 反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸 氨基酸是烟草中的一类重要化学物质,在烟草调制、醇化或发酵、加工直至燃... 加入浓度为5nmol/μ1的内标10μ1,定容至50ml,HP1100液相色谱仪进行氨基酸分析. 样品自动柱前衍生化:Agilent公司G...

荆州市17282733226： 高效液相色谱法在分析实际样品时有哪些应用 - ？
佛面妇炎： 1,为进行分离,可以根据样品的组分将流动相和固定相的组合最佳化.如果熟悉液相色谱,这是非常有利的,但对初学者来说,这是困难的.2,适用样品范围广,80%的分析对象可借此法分析.3,可以使用高效的分离柱,易于分离复杂的多...

荆州市17282733226： 高效液相色谱法(HPLC)测茶叶中有效成分的含量 - ？
佛面妇炎： 高效液相色谱法是以液体作为流动相,借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法. 在高效液相色谱中,若采用非极性固定相,如十八烷基键合相,极...