反相色谱的原理是什么？
1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。
应用特点：正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物，而且以中性样品为主。适于分离样品如下：
①对于反相色谱法很难分离的异构体，可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析；
②根据被分离样品极性差别进行族类分离；
③易于水解样品的分离分析；
④分离分析高脂溶性样品，其在极性有机溶剂中溶解度很小；
⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。
2、流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。
应用特点：反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。
扩展资料
原理：
反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。
与HIC一样，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖，表现出强烈的疏水性。因此，必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。
溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。
RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。
由于反相介质表面为强烈疏水性，并且流动相为低极性的有机溶剂，生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。
参考资料来源：百度百科-正相色谱
参考资料来源：百度百科-反相色谱
气相色谱仪的原理是什么?
面对未知的样品，气相色谱仪首先运用其精密的分离机制。这个过程的核心在于利用物理化学性质的差异，如沸点、极性和吸附性能。样品中的每一种组分，就像被赋予了不同的个性，它们在载气（如氮气或氦气）的推动下，进入色谱柱。在这里，每种组分与流动相和固定相之间建立起微妙的动态平衡，通过反复的分配和...
气相色谱仪原理是什么?
气相色谱工作原理：利用试样中各组份在气相和固定液体相间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同， 因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测...
液相和气相色谱仪的原理和组成部件是什么?
液相色谱仪：色谱分离基本原理：在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相.色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的.使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱...
高效液相色谱法( HPLC)的原理是什么?
反应的进行程度可以通过不同的方法进行监测，包括薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）等。这些技术都是基于色谱原理，通过对样品中各组分的分离和检测，实现对反应进程的监测。薄层色谱法（TLC）薄层色谱法是一种常用的分离和分析技术，适用于小规模和中等规模的分析。它的主要步骤包括样品制备、点样...
气相色谱原理
气相色谱原理一般指气相色谱仪原理。气相色谱仪原理如下：气相色谱仪是以气体作为流动相（载气）。当样品由微量注射器“注射”进入进样器后，被载气携带进入填充柱或毛细管色谱柱。由于样品中各组分在色谱柱中的流动相（气相）和固定相（液相或固相）间分配或吸附系数的差异，在载气的冲洗下，各组分在两相...
气相色谱原理是什么?
气相色谱原理是利用色谱柱先将混合物分离。当样品由微量注射器“注射”进入进样器后，被载气携带进入填充柱或毛细管色谱柱。由于样品中各组分在色谱柱中的流动相（气相）和固定相（液相或固相）间分配或吸附系数的差异，在载气的冲洗下，各组分在两相间作反复多次分配使各组分在柱中得到分离。然后用接在...
气相色谱法与高效液相色谱法相同点和不同点
最基本的原理相同，都是吸附-脱附平衡，利用组分在固定相和流动相中的分配系数不同达到分离的目的。一、不同点 （一）应用范围不同 1、气相色谱法 分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析，一般对500℃以下...
简要说明气相色谱分析的基本原理。
气相色谱法由于所用的固定相不同，可以分为两种，用固体吸附剂作固定相的叫气固色谱，用涂有固定液的单体作固定相的叫气液色谱。按色谱分离原理来分，气相色谱法亦可分为吸附色谱和分配色谱两类，在气固色谱中，固定相为吸附剂，气固色谱属于吸附色谱，气液色谱属于分配色谱。按色谱操作形式来分，...
液相色谱原理
高效液相色谱（HPLC）的原理：以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相...
气相色谱法的原理
气相色谱法的原理是利用气体作流动相的色层分离分析方法。汽化的试样被载气（流动相）带入色谱柱中，柱中的固定相与试样中各组份分子作用力不同，各组份从色谱柱中流出时间不同，组份彼此分离。采用适当的鉴别和记录系统，制作标出各组份流出色谱柱的时间和浓度的色谱图。根据图中表明的出峰时间和顺序...
阮崔艾可： 正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱.其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点.溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心.反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱. 反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定.分离效率高,它能分离蛋白质、...
盐田区19315452488： (色谱分析)正相色谱和反相色谱的出峰先后顺序? - ？
阮崔艾可：[答案] 反相色谱主要是以水等极性物质作为流动相,按相似相容原理,出峰先后是从极性强的到极性弱的;而正相色谱的流动相大多为非极性物质,出峰先后则是从弱极性的到强极性的.
盐田区19315452488： 反相高效液相色谱的原理？
阮崔艾可： 在反相液相色谱中,固定相的极性小于流动相,洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性,疏水性强的保留时间长!
盐田区19315452488： 何谓正相色谱和反相色谱?在应用上有什么特点 - ？
阮崔艾可： 正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上.由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱...
盐田区19315452488： 反相高效液相色谱法与高效液相色谱用的仪器是不是一样 - ？
阮崔艾可： 反相色谱是色谱的一种.反相的意思是说固定相是非极性的,流动相是极性的.而正相色谱则相反,也就是流动相是非极性的,固定相是极性的.同一台色谱仪,通过更换色谱柱和流动相,就可以实现正相或反相的检测
盐田区19315452488： 反相色谱,是非极性固定相和极性流动相,用于分离非极性或者弱极性物质.我想请教的是,如果流动相极性... - ？
阮崔艾可： 不知道楼主说的极性偏大是什么意思.反相色谱的具体分离原理也可以用疏溶剂理论来解释,这样你就容易明白了(可以百度一下疏溶剂理论).溶剂的极性越大,比如纯水,非极性的目标物就越不容易被洗脱.如果分离度不好,加大水的比例会延长保留时间,很可能会得到满意的分离度,因此是会影响到分离效果的.
盐田区19315452488： 反相色谱的概念？
阮崔艾可： 反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种,对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析,反相液相色谱正受到越来越多的关.反相色语法是以表面非极性载体为固定相,面以比固定相极性强的溶...
盐田区19315452488： 高效液相色谱的正反色谱的原理是什么呢? ？
阮崔艾可： 高效液相色谱正反色谱编辑正相色谱法采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间
盐田区19315452488： 反向高效液相色谱法 分离,定性和定量的 原理是什么 - ？
阮崔艾可： 简单的说:色谱分离的原理就是物质在固定相和流动相之间的分配系数存在差异,经过多次反复吸附解吸或者溶解挥发,最后达到分离.液相色谱就是流动相是液体.反相指固定相的极性小于流动相的极性. 定性通过保留时间 定量通过峰面积 同一物质在相同色谱条件下保留时间一致,需要对照品比对定性. 同一物质的浓度与峰面积成正比例关系,所以根据对照品的浓度和峰面积,可以定量得出样品的浓度. 不够详细,就这些吧!
