EGFP与GFP

egfp，turbogfp，copgfp和colver的区别~

GFP：绿色荧光蛋白，Green Fluorescent Portein。
EGFP：增强型绿色荧光蛋白，Enhanced Green Fluorescent Protein ，64Phe→Leu ，发射出的荧光强度比GFP大 6 倍以上。
copgfp:从copepoda Pontellina plumata (Arthropoda; Crustacea; Maxillopoda; Copepoda）获得的绿色荧光蛋白CopGFP，亮度是EGFP的1.3倍。

turboGFP：从copGFP改进，具有超快速蛋白成熟，适合早期信号检测，超明亮绿色荧光，易于检测，不聚集，融合情况下表现非常好，稳定表达，适合稳定细胞系生产，在多种温度范围内表达(20℃-38℃)，适合冷血动物的特点。
colver：从Aequorea victoria GFP构建的最明亮的荧光蛋白，参考文献:Lam A J, St-Pierre F, Gong Y, et al. Improving FRET dynamic range with bright green and red fluorescent proteins[J]. Nature methods, 2012, 9(10): 1005-1012.目的是用于替代CFP和YFP。

最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在正几乎中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。
荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的发色团起着主要的作用。在 α-螺旋上的 65、66、67位氨基酸——丝氨酸、酪氨酸、甘氨酸经过环化、脱氢等作用后形成发色团。
发色团形成过程是由外周栅栏上的残基催化，底物只需要氧气。这暗示绿色荧光蛋白被广泛用于不同物种的潜力：在不同物种中能独立表达成有功能的蛋白，而不需要额外的因子。不过，现在依然在讨论准确的过程。
发色团上的共轭 π键能吸收激发光能量，在很短的时间后，以波长更长的发射光释放能量，形成荧光。

扩展资料：
由于荧光蛋白能稳定在后代遗传，并且能根据启动子特异性地表达，在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地，荧光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解决问题的新思路，也可能带来更多有价值的新问题。
在细胞生物学与分子生物学中，绿色萤光蛋白(GFP)基因常用做报告基因(reporter gene)。绿色萤光蛋白基因也可以克隆到脊椎动物(例如:兔子)上进行表现，并拿来映证某种假设的实验方法。
通过基因工程技术，绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组，在后代中持续表达。现在，绿色萤光蛋白(GFP)基因已被导入并表达在许多物种，包括细菌，酵母和其他真菌，鱼（例如斑马鱼），植物，苍蝇，甚至人等哺乳动物的细胞。
参考资料来源：百度百科-绿色荧光蛋白

EGFP，即增强绿色荧光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein），GFP，即绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein）。

EGFP是GFP突变系，应用较多的是GFP的突变体：增强型绿色荧光蛋白（EGFP ）（64位苯丙一亮），发射出的荧光强度比GFP大6倍以上。

绿色荧光蛋白，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。

绿色荧光蛋白结构

野生型绿色荧光蛋白，最开始是238 个氨基酸的肽链，约25KDa。然后按一定规则，11条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。

荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的发色团起着主要的作用。在α-螺旋上的65、66、67位氨基酸-丝氨酸、酪氨酸、甘氨酸经过环化、脱氢等作用后形成发色团。发色团形成过程是由外周栅栏上的残基催化，底物只需要氧气。

这暗示绿色荧光蛋白被广泛用于不同物种的潜力：在不同物种中能独立表达成有功能的蛋白，而不需要额外的因子。不过，现在依然在讨论准确的过程。

发色团上的共轭π键能吸收激发光能量，在很短的时间后，以波长更长的发射光释放能量，形成荧光。

以上内容参考：百度百科-绿色荧光蛋白、百度百科-EGFP

EGP 绿荧光蛋白(Green Fluorescent Portein，GFP)
它的27k Da的单体由238个氨基酸构成，本身就是一个生物发光系统，附带有激发后能发射生物荧光的发光色基，其发光过程不同于其它生物发光组织，是不需荧光素酶参与的。光激发GFP荧光是一个特异性的独立过程，并不需要任何的协同因子、底物或其它来自于水母的基因表达产物。当能量由Ca2+-激活光蛋白(Aequorin)传给GFP时引发荧光(Ward et al。，1980)。野生型GFP(wtGFP)的克隆及其在异源系统中等表达使其成为一种新的遗传标记系统(prasher et
al., 1992; Inouye & Tsuji, 1994a; Wang &Hazelrigg，1994)。当GFP在原核或真核细胞中表达并受到蓝光或紫外光辐照时就可发出亮绿色荧光。
GFP色基
GFP色基是由丝氨酸酪氨酸甘氨酸(SerTyrGly)形成的环化三肽所构成，并且只有色基包被在完整的GFP蛋白中才能发出荧光(Cody et al.,1993)，被切断的GFP(即使是C末端的少数几个氨基酸)亦能导致GFP失去发光能力。GFP和GFPS65T的晶体结构研究表明色基紧密地包被在由α折叠围成的β盒中(Orm et al., 1996; Yang et al., 1996)。这一结构提供了色基发射荧光的微环境，该环境排除了基质及氧对色基发光的影响。只具备一级结构GFP是不能发光的，功能性色基的形成是在转录翻译后，并经历一个环化反应和一个需分子氧的氧化步骤。色基高级结构的形成可能是荧光蛋白形成的限速步骤，特别是分子氧受到限制时(Heim et al.,1994;Davis et al.,1995)。wt GFP吸收紫外和蓝光，其吸收峰为λmax＝395nm和λmin＝470nm，发射峰为λ＝509nm。
EGFP是GFP突变系
(1)RedShifted(红偏移)GFP突变系(EGFP & GFPS65T)
色基发生了氨基酸取代，λmax(Excitation)偏移至490nm附近。红偏移突变系的最大激发峰都落在常用滤色片的波长范围内，所以获得的荧光信号要比wtGFP明亮得多。同样，FACS和共焦显微镜的氩离子光源的发射波长为488nm，对RedShifted突变系的激发效率也明显高于wtGFP。EGFP发生了双氨基酸取代，Leu(亮氨酸)取代Phe64(苯丙氨酸)，Thr(苏氨酸)取代Ser65(丝氨酸)(Cormack et al.,1996)。基于等量溶解蛋白的光谱分析，由于Em(消光系数)的增加和色基构型的高效率，EGFP在488nm处激发后灯荧光强度为wtGFP的35倍(Cormack et al.,1996;Yang et al.,1996)。在相同条件下(489nm)测得EGFP得Em为53，000cm-1M-1，而wtGFP为9，500CM-1M-1，GFPS65T为55，000cm-1M-1(Patterson et al.,1997)。EGFP的色基构型在37℃比wtGFP或GFPS65T发光效率更高，在这一温度下表达的EGFP可溶性蛋白95%为有效色基(Patterson et al.,1997)。GFPS65T为Thr取代Ser65的突变体(Heim et al.,1995)，同样条件下，它的荧光强度强于wtGFP4～6倍，并且其唯一的Redshifted激发峰位于490nm，但37℃时色基形成的效率不如EGFP。
你可以两个都试试，应该都没有问题的
上边的我也是看了这个网址后给你发的，我感觉挺好的，还有不明白的，你自己看看吧，那里还有很多东西我没给你拷过来
http://med.wanfangdata.com.cn/periodical/periodical.articles/jgswxb/jgsw99/jgsw9903/990315.htm

增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorecence Protein，eGFP)

增强型绿色荧光蛋白是一种优化的突变型绿色荧光蛋白，其荧光比野生型强35倍，具有结构稳定、高效表达、无种系依赖性等特点，更适用于细胞基因表达和蛋白定位检测及细胞示踪标记。
增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体，可高效转染入神经前体细胞，并保持了神经前体细胞的基本特性。因此，可将增强型绿色荧光蛋白作为一种良好的细胞示踪剂，进行神经前体细胞在体内移植的研究。

没有什么本质区别 EGFP是GFP的改良 我估计GFP不行的话EGFP也不行

就是增强型的 Enhanced ，试试吧，生物这东西，莫名其妙的。

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阿尔山市15725012916： EGFP与GFP - ？
壤严华佗： 全文是天涯上回答GFP和EGFP区别的一段话,但是最原始的来源应该是Clontech公司的Living ColorsTM User Manual翻译过来的,非常像!地址是 http://coli.usal.es/web/abydl/biblioteca/bibelectro.alu/documentos/protocolos/Manual_GFP_Clontech.pdf 你可以自己看一下!

阿尔山市15725012916： 推荐一些用于活细胞培养的荧光蛋白或荧光染料? - ？
壤严华佗： GFP、EGFP、RFP,最常用的就是这三种自发荧光的蛋白了,还有FLuc,RLuc,这是两种需要激发的荧光蛋白

阿尔山市15725012916： 做RNA干扰为什么要使用EGFP做对照 - ？
壤严华佗： 不一定非得用GFP做阴性对照,也可以用其他基因做对照.只要是大家熟悉的,能够合理反映实验结果的对照基因都可以.

阿尔山市15725012916： 细胞转染了GFP固定后还能发荧光吗 - ？
壤严华佗： 细胞转染GFP质粒并进行表达之后,一般细胞内会有大量的GFP蛋白,可以发出绿色荧光. GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级,因此只要这个结构仍然保持着,就可以发出荧光. 由于GFP的beta-barrel结构非常稳定,一些版本的GFP蛋白(如EGFP)甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性,因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的,一般需要用光漂白法. 基于其非常稳定的结构,即便细胞被固定了,仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光.此时荧光可能较弱.在荧光显微镜下是有可能看得到的.

阿尔山市15725012916： EGFP全称是什么? - ？
壤严华佗： 一种绿色荧光蛋白

阿尔山市15725012916： 亚细胞定位用gfp号还是yfp好 - ？
壤严华佗： YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白 GFP就是绿色荧光蛋白,YFP就是Thr203以Tyr取代,发出黄色的荧光,成为黄色荧光蛋白 因此两者最大的区别则是发射波长了亚细胞定位用YFP或者GFP都是可以的 需要考虑: 如果是标记在N端很可能影响定位 如果是红色的探针,选用绿色GFP比较经典,两者叠合的橙色也是很多文献上常采用的.但如果是蓝色的探针,则选用黄色YFP比较容易区分一点

阿尔山市15725012916： EGFP的酶切连接方案想从pEGFP - N2上的EGFP切下来替换质粒pLM21上的GFP.EGFP与GFP两端没有相同的酶切位点,请高人相助,如何设计方案. - ？
壤严华佗：[答案] 先从pLM21上用相应的酶切下来GFP,然后不要从pEGFP-N2上切下eGFP,而是用PCR扩增出来,扩增的时候使用的引物要设计上pLM21的GFP两端的相应的酶切位点,然后分别纯化基因片段,连接、转化、挑选正确重组子即可.

阿尔山市15725012916： 报告基因的列举 - ？
壤严华佗： (1)最常用的报告基因大多是编码抗生素抗性蛋白的基因,通过检查产物是否具有抗生素的抗性来确定基因的表达情况. (2)氯霉素乙酰基转移酶(CAT):该报告基因来源于大肠杆菌转位子9,是第1个用于检测细胞内转录活性的报告基因.氯霉素...

阿尔山市15725012916： EGFP是什么?有什么应用 - ？
壤严华佗： 增强型的GFP 激发后发射光更强 和GFP一个用法

阿尔山市15725012916： 求助,EGFP的酶切连接方案 - ？
壤严华佗： 先从pLM21上用相应的酶切下来GFP,然后不要从pEGFP-N2上切下eGFP,而是用PCR扩增出来,扩增的时候使用的引物要设计上pLM21的GFP两端的相应的酶切位点,然后分别纯化基因片段,连接、转化、...