光学和电子显微镜样品制备透射电子显微镜制片技术
透射电子显微镜制片技术是微观观察的关键步骤,它的核心目标是保持样品在接近其原始状态下的结构和化学成分。理想的样品厚度应控制在1000埃以内,以确保高分辨率和足够的对比度。为了优化观察效果,常用电子染色、投影和负染色等手段增强生物样品对散射电子的敏感性,从而获得清晰的图像。
针对不同类型的生物材料,样品制备方法各异。对于生物组织和细胞,通常采用超薄切片技术,将大块材料精细切割成合适厚度的切片,然后利用电子染色、细胞化学、免疫标记和放射自显影等方法,揭示超微结构的位置和化学物质变化。而对于生物大分子如蛋白质、核酸,细菌、病毒以及分离的细胞器等颗粒状样本,投影和负染色技术常被用于提升对比度,展示颗粒形态和微细结构的细节。
除此之外,冷冻固定技术也是重要一环,包括冷冻断裂的冰冻蚀刻、冷冻置换以及冷冻干燥等方法。这些技术通过冷冻固定样本,保护其结构,再通过特定的处理步骤,揭示冷冻样本内部的微观信息。
扩展资料
光学和电子显微镜样品制备 optical and electron microscopy,preparation of specimens for 将生物材料制成适于在显微镜下观察的薄片的技术。 光学显微制片技术 光学显微镜制片首先要尽量保持生物材料的天然状态,避免赝像、变形和失真,因此须将生物材料做固定处理;制片必须薄而透明,才能在光学显微镜下成像,除将材料切成薄片或通过轻压或其他手段使之分散外,还需采用其他方法使它透明和染色,以便更好地观察到结构的细节。需长期保存的制片,还应进行脱水和封固。
电子显微镜和光学显微镜有什么区别
第二个是荷兰亚麻织品商人列文虎克(1632年-1723年),他自己学会了磨制透镜。他第一次描述了许多肉眼所看不见的微小植物和动物。1931年,恩斯特·鲁斯卡通过研制电子显微镜,使生物学发生了一场革命。这使得科学家能观察到像百万分之一毫米那样小的物体。1986年他被授予诺贝尔奖。
光学显微镜与电子显微镜的主要区别有哪些
光学显微镜与电子显微镜是两种不同的显微镜,二者在定义上,分类上,组成结构上有区别。1、定义不同 光学显微镜(英文Optical Microscope,简写OM)是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的,光学显微镜的...
扫描电子显微镜样品制备技术的介绍
扫描电子显微镜样品制备技术(preparationof specimens for scanning electron microscopy):扫描电子显微镜以观察样品的表面形态为主,因此扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;③充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。
扫描电子显微镜观察过样品样品会发生什么变化
扫描电子显微镜观测时,样品可能受到的损伤有:(1) 真空损伤。 生物样品从大气中放入真空中时,就会产生真空损伤,是由样品干燥引起的。(2) 电子束损伤。 电子束的能量引起照射点的局部加热、化学结合的破坏等,造样品的破裂或局部漂移。
电子显微镜成像原理
电子显微镜是现代科学研究中的重要工具,它的成像原理和应用广泛。电子显微镜分为透射电镜技术和扫描电镜技术。透射电镜技术使用电子束透过样品,通过聚焦与放大后的物像投射到荧光屏或照相底片上进行观察。透射电镜的分辨率高,可达0.1~0.2nm,放大倍数可达几万~几十万倍。然而,电子易散射或被物体吸收...
为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜
镜筒需要真空,只能观察死的样品。1、电子显微镜镜筒需要真空,条件和成本比光学显微镜更高。2、电子显微镜只能观察死的样品,不能观察活细胞,而光学显微镜可以观察活物,所以电子显微镜还不能完全替代光学显微镜。
光学显微镜与电子显微镜哪个厉害?
使用不便,而且对被观察对象有一些限制(电子显微镜的分辨本领虽已远胜于光学显微镜,但电子显微镜因需在真空条件下工作,所以很难观察活的生物,而且电子束的照射也会使生物样品受到辐照损伤)。所以无法判断光学显微镜和电子显微镜那个更好,如果单纯的从放大倍数上看的话,当然是电子显微镜更厉害咯。
电子显微镜和光学显微镜区别
电子显微镜和光学显微镜的区别主要有以下四点:一、光源不同光学显微镜采用可见光作为光源,电子显微镜采用电子束作为光源。二、成像原理不同光学显微镜利用几何光学成像原理进行成像,电子显微镜利用高能量电子束轰击样品表面,激发出样品表面的各种物理信号,再利用不同的信号探测器接受物理信号转换成图像信息。三...
金属材料的化学成分如何检测?
2. 化学分析法:比如滴定分析、络合滴定分析、氧化还原滴定分析、分光光度法、电化学法等。这些方法可以用于分析样品中某些特定化学物质的含量。3. X射线荧光光谱法:通过照射样品,使样品发射出X射线,并根据X射线的能量来确定样品的元素种类和含量。4. 扫描电子显微镜(SEM)和能谱分析(EDS):通过SEM...
光学显微镜和电子显微镜的原理?
倒置显微镜是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。 由于上述样品特点的限制,被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中,这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此,物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒...
宜沾松龄: ①快速冷冻,用致冷剂(如液氮、液体氟利昂、液体丙烷等)或其他方法使生物材料急剧冷冻,使组织和细胞中的水只能冻结成体积极小的冰晶甚至无定形的冰──玻璃态.这样,细胞结构不致被冰晶破坏,生物大分子可保持天然构型,酶及抗...
义乌市19199764860: 电子显微镜成像原理 - ?
宜沾松龄: 一、透射电子显微镜的成像原理可分为三种情况: 1、吸收像:当电子射到质量、密度大的样品时,主要的成相作用是散射作用.样品上质量厚度大的地方对电子的散射角大,通过的电子较少,像的亮度较暗.早期的透射电子显微镜都是基于这...
义乌市19199764860: 光学显微镜与电子显微镜的区别(高中生物) - ?
宜沾松龄: 1、发展历史不同 光学显微镜的发展是电子显微镜发展的基础.17世纪中叶,英国的罗伯特·胡克和荷兰的列文虎克,都对显微镜的发展作出了卓越的贡献.1665年前后,胡克在显微镜中加入粗动和微动调焦机构、照明系统和承载标本片的工作...
义乌市19199764860: 请教电子显微镜的粉末样品的制备过程怎么做呢? ?
宜沾松龄: 透射电子显微镜样品制备编辑一、样品要求1.粉末样品基本要求(1)单颗粉末尺寸最好小于1μm;(2)无磁性;(3)以无机成分为主,否则会造成电镜严重的污染,高压跳掉,甚至击坏高压枪;2.块状样品基本要求(1)需要电解减薄或离子减薄,获得几十纳米的薄区才能观察;(2)如晶粒尺寸小于1μm,也可用破碎等机械方法制成粉末来观察;(3)无磁性;(4)块状样品制备复杂、耗时长、工序多、需要由经验的老师指导或制备;样品的制备好坏直接影响到后面电镜的观察和分析
义乌市19199764860: 透射电子显微镜法有什么用? - ?
宜沾松龄: 用途: 透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多.由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量,必须制备更薄的超薄切片,通常为50~100nm. 由于电子的德布罗意波长非常短,透射电...
义乌市19199764860: 什么是透射电子显微镜法 - ?
宜沾松龄: 透射电镜的总体工作原理是:由电子枪发射出来的电子束,在真空通道中沿着镜体光轴穿越聚光镜,通过聚光镜将之会聚成一束尖细、明亮而又均匀的光斑,照射在样品室内的样品上;透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息,样品内致...
义乌市19199764860: 光学显微镜与电子显微镜的主要区别有哪些 - ?
宜沾松龄: 光学显微镜与电子显微镜是两种不同的显微镜,二者在定义上,分类上,组成结构上有区别. 1、定义不同 光学显微镜(英文Optical Microscope,简写OM)是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息...
义乌市19199764860: 电子显微分析技术中,电子的波长有什么决定 作业 - ?
宜沾松龄: 电子是实物粒子(静止质量不为0的微观粒子),根据德布罗意的物质波理论,实物粒子也具有波粒二象性.实物粒子的波动性可由下方程描述:上式中:h为布朗克常数,P为粒子的动量,m为粒子的质量,v为粒子的速度. 因此,在任何情况下,电子的波长是由其速度决定的(电子本身的质量是不变的). 在显微镜等利用电子束的设备中:利用电子枪中阴极所产生的电子在阴阳极间的高压(25-300kV)加速电场作用下被加速至很高的速度(0.3-0.7倍光速).也即通过控制电场强度,控制电子的速度,进而控制电子的波长.
义乌市19199764860: 电子显微镜和光学显微镜成像原理的异同 - ?
宜沾松龄: 在电镜中,作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后达到荧光屏上成像或作用于感光胶来片成像.其电子浓淡的差别产生自的机理是,电子束作用于被检样品时,入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射,由于样品的不同部位对电子有百不同的散射度,故样品电子像以浓淡呈现.而光镜中样品的物像以亮度差呈现,它是由被检样品的不同结构吸引光线多少的不同所造度成的.
义乌市19199764860: 透射电镜标本制作的方法是什么切片法 - ?
宜沾松龄: 生物样品,环氧树脂包埋,超薄切片法.材料样品,方法就很多了.