PCR技术的原理是什么?
PCR技术的基本原理:
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。
在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此为起始点,沿模板5´→3´方向延伸,合成一条新的DNA互补链。
PCR技术的应用:
PCR技术首次临床应用就是从检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变开始的。
PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR就可以检测到。
PCR技术不但能有效的检测基因的突变,而且能准确检测癌基因的表达量,可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。
聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年,PCR已发展到第三代技术。1976年,中国科学家钱嘉韵,发现了稳定的Taq DNA聚合酶,为PCR技术发展也做出了基础性贡献。
PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。
X射线摄影的原理是什么?
X射线摄影(CR)指的是借助于X射线与人体相互作用,把人体内部器官结构、密度、组织成分等信息以摄像方式表现出来,是利用X射线的穿透作用将人体三维的解剖结构投影为二维平面影像的一种成像技术。X射线的物理特性有穿透作用、电离作用、荧光作用、热作用及干涉、衍射、反射、折射作用。X射线摄影主要运用到了...
CR和CT有什么不同?
首先,从技术原理上来说:1. CR技术,即计算机X线摄影,是一种将计算机数字图像处理技术与X射线放射技术结合的产物。它标志着放射学摄影的数字化进程,使用CR系统可以减少对患者照射的X射线量,同时提供高清晰度的图像。2. CT技术,即计算机断层扫描,利用精确准直的X线束或其他射线(如γ射线、超声波)...
DR和CR有什么区别
一、成像原理 · DR 是一种 X 线直接转换技术,它使用平板探测器接收 X 光,平板探测器有 CCD ,非晶硅,非晶硒等种类,有探测器上覆盖的晶体电路把 X 线光子直接转换成数字化电流。 · CR 是一种 X 线的间接转换技术,它利用图像板作为 X 光检测器,图像板受到 X 线照射后立即发出荧光,在...
CR和CT有什么不同?
首先,从技术原理上来说:1. CR技术,即计算机X线摄影,是一种将计算机数字图像处理技术与X射线放射技术结合的新型X线成像方法。它代表了放射学摄影的数字化进程。2. CT技术,即计算机断层扫描,使用精确准直的X线束、γ射线或超声波,与高灵敏度的探测器一起,围绕人体特定部位进行连续的断面扫描。其次...
cr和ct有什么区别
1. 技术原理:CR技术,即计算机辅助放射技术,是通过将X射线胶片经过数字化处理来完成的。它将原始的胶片医学影像转化为数字图像,便于医生进行诊断。CT,即计算机断层扫描,则是通过X射线束对人体特定部位进行断层扫描,探测器接收信号并转换为数字信号,再由计算机处理形成图像。2. 应用领域:CR主要应用于...
CR和DR有什么不同?(转)
回答:DR即直接数字化X射线摄影系统,是由电子暗盒、扫描控制器、系统控制器、影像监示器等组成,是直接将X线光子通过电子暗盒转换为数字化图像,是一种广义上的直接数字化X线摄影。而狭义上的直接数字化摄影即DDR(DirectDigit Radiography),通常指采用平板探测器的影像直接转换技术的数字放射摄影,是真正意义上...
什么是CR
CR即计算机放射摄影技术。1、计算机放射摄影:就是计算机X射线成像,是传统技术与现代计算机技术相结合的产物,是一种X线摄影影像采集技术。2、CR的基本原理:传统的X光片是将透过人体的射线记录在胶片上,再经过显影、定影、水洗等技术流程得到X线影像。而CR是将透过人体的射线记录在含有荧光物质的影像记录...
CT,MR,DR,CR,DSA等简称分别代表什么?
其工作原理是将X线经荧光屏转变为可见光,再经TFT薄膜晶体电路按矩阵像素转换成电子信号,传输至计算机显示图像。DR技术分为非直接转换和直接转换两类,提供高空间分辨率、大动态范围的影像,可观察到对比度低于1%、直径大于2MM的物体,剂量仅为常规摄影的1\/10。3. 数字减影血管造影(DSA):DSA通过注入...
CR的成像原理是什么
CR成像技术的运作原理涉及光激发荧光体的科学。当X射线照射到IP板(碘化铯板)上时,它具有吸收并储存X射线能量的独特能力。这个步骤至关重要,因为IP板是CR系统的核心组件。具体来说,当X射线与IP板的碘化铯分子接触时,这些分子会吸收并暂时存储这部分能量。这个存储过程是高度选择性的,确保只有X射线能...
X线摄影中CR,DR的区别?
CR(ComputedRadiography)也称为间接数字化X线成像技术,主要原理是利用存储荧光体成像,日本富士公司在1981年推出首台用于临床应用的CR,随后美国柯达、德国AGFA公司相继推出自己的CR产品,它采用磷光体结晶构成的成像板(Plated)即IP板吸收X线信息,IP板感光形成潜影,再经过扫描转化成数字化信号进入计算机...
咸固同仁:[答案] 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至...
和平区13452497684: PCR技术原理是什么? - ?
咸固同仁: 原发布者:yqjklhq 一.简述PCR基本原理?PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右...
和平区13452497684: PCR的原理是什么? - ?
咸固同仁: PCR技术基本原理 PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板...
和平区13452497684: PCR技术原理是怎样的?经典点 - ?
咸固同仁:[答案] PCR技术原理:以合成的两条已知序列的寡核苷酸为引物,在DNA聚合酶作用下,利用dNTP为原料,将位于两引物之间的特定DNA片段进行复制.这样经过变性、退火、延伸一个循环,每一个循环的产物作为下一个循环的模板,如此循环30次.每完...
和平区13452497684: PCR扩增技术获取目的基因的原理是? - ?
咸固同仁:[答案] PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PC...
和平区13452497684: 基因的PCR扩增技术原理是什么? - ?
咸固同仁:[答案] 基因的PCR扩增技术原理类似于DNA的变性和复制过程,即将待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两段寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后DNA扩增倍数可达2的n次方 倍. PCR反应的基本成分包括:模板DNA(待扩增DNA...
和平区13452497684: 试述PCR扩增的原理和步骤 - ?
咸固同仁:[答案] PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物. PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与...
和平区13452497684: 实时荧光定量PCR技术原理是什么? - ?
咸固同仁:[答案] 聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 .在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 .无论定性还是定量分析,分析的...
和平区13452497684: PCR实验的原理和方法步骤是什么? - ?
咸固同仁:[答案] 原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(...
和平区13452497684: 菌液PCR原理是? - ?
咸固同仁:[答案] 跟普通PCR原理是一样的,因为94度变形可以裂解细菌,释放出DNA,所以不用提质粒也可以PCR出来条带