什么是基因克隆载体?

作者&投稿:鄣怜 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
什么叫基因克隆~



单独一个包含启动子、编码区和终止子的基因,或者组成基因的某个元件,一般是不容易进入受体细胞的。即使采用理化方法进入细胞后,也不容易在受体细胞内稳定维持。把能够承载外源基因,并将其带入受体细胞(host:cell)得以稳定维持的DNA分子称为基因克隆载体(gene:cloning:vector)。

作为基因克隆载体一般应该具备以下条件:(1)在克隆载体合适的位置必须含有允许外源DNA片段插入的克隆位点,并且这样的克隆位点应尽可能的多。作为克隆位点的限制性内切核酸酶的识别序列一般在克隆载体上只有一个。为了便于多种类型末端的DNA片段的克隆,克隆载体中往往组装一个含多种限制性内切核酸酶识别序列的多克隆位点(MCS)连杆。

(2)克隆载体能携带外源DNA片段(基因),容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好,或能停留在细胞质中进行自我复制;或能整合到染色体DNA、线粒体DNA和叶绿体DNA中,随这些DNA同步复制。

(3)克隆载体必须含有供选择转化子的标记基因,如根据转化子抗药性升降进行筛选的氨苄青霉素抗性基因(apsuperscriptrsuperscript或ampsuperscriptrsuperscript)、氯霉素抗性基因(cmsuperscriptrsuperscript)、卡那霉素抗性基因(kmsuperscriptrsuperscript或kansuperscriptrsuperscript)、链霉素抗性基因(smsuperscriptsuperscriptsm}}r)、四环素抗性基因(tcsuperscriptrsuperscript或tetsuperscriptrsuperscript)等,根据转化于蓝白颜色进行筛选的β-半乳糖苷酶基因(emphasis:role=italiclacZemphasis),以及表达产物容易观察和检测的报告基因emphasis:role=italicgusemphasis(β-葡萄糖苷酸酶基因)、emphasis:role=italicgfpemphasis(绿色荧光蛋白基因)等。

(4)克隆载体必须是安全的,不应含有对受体细胞有害的基因,并且不会任意转入除受体细胞以外的其他生物的细胞,尤其是人的细胞。

(5)容易插入外来核酸片段,容易从宿主细胞中分离纯化出来,便于重组操作。克隆载体在基因工程中占有十分重要的地位。目的基因能否有效转入受体细胞,并在其中维持和高效表达,在很大程度上取决于克隆载体。目前已构建和应用的基因克隆载体不下几千种,根据构建克隆载体所用的DNA来源可分为质粒载体、病毒或噬菌体载体、质粒DNA与病毒或噬菌体DNA组成的载体以及质粒DNA与染色体DNA片段组成的载体等。






克隆是什么东东?
1.在分子水平,克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含义是将某一特定DNA片断通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒和病毒等)中,然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同的该DNA片断的“群体”。 2.在细胞水平,克隆实质由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的一个细胞群体。其中每个细胞的基因都相同。比如,...

基因克隆的方法有哪些
通过不断循环这两个步骤,可以得到大量的目的基因片段。这种方法操作简便,成本低廉,因此广泛应用于基因克隆和分子生物学研究中。此外还包括凝胶纯化法和反转录PCR法等更为精确的方法,可针对不同需求和场景选择合适的克隆技术。以上均为使用较为广泛的基因克隆技术。除了PCR扩增法外,载体克隆技术也是常用的...

基因克隆载体的功能和应具备的条件是什么
一、载体的功能 1.运送外源基因高效转入受体细胞 2.为外源基因 提供复制能力或整合能力 3.为外源基因的扩增或表达提供条件 二、载体应具备的条件 1.具有对受体细胞的可转移性 2.具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点 3.长度尽可能小,以提高其载装能力 4.具有多种单一的酶切位点5. 具有...

克隆载体与表达载体的区别
将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达 但一定被大量复制 而表达载体是一些用于工程生产的细菌 他们被导入目标基因 这些目标基因会在此类细菌中得到表达 生产出我们需要的产物 导入的基因是有克隆载体产出的 ...

基因克隆操作中为什么要用到载体?
这个您可以去看看新课标人教版的生物选修3现代生物科技专题。里面说了的 如果你直接将基因导入细胞,那它是无法表达的。所以你必须要用到载体 载体中包含了许多基因转录所需要的物质。比如说,一个基因要转录,就需要启动子和终止子 而启动子和终止子是不可能在目的基因上的,所以只能位于载体上。另外,...

基因克隆
(1) T\/A克隆 T\/A克隆是把PCR片段与一个具有3’-T突出的载体DNA连接起来的方法(图15)。使用该方法进行基因克隆时不需要考虑酶切位点问题,但需要选择Taq DNA聚合酶进行PCR扩增,其产物的3’端才会多一个突出的A;此外,T\/A克隆选用商业化的T载体,其为线性化的载体,在3’端有一个突出的T;并且基因片段连入...

『分子克隆_载体构建』载体介绍
按功能区分载体根据其功能,扮演着不同的角色:克隆大师<\/:拥有复制起始位点(Ori)和多克隆位点(MCS),用于扩增和传递DNA片段。表达艺术家<\/:加入转录和翻译调控元件,如启动子、核糖体结合位点和终止子,让基因在细胞中高效表达。进入细胞的方式根据受体细胞类型,载体可分为:真核伙伴<\/:在真核...

什么是克隆基因
克隆基因是指某种目的基因的分离过程,通常是将生物材料的遗传物质如DNA以酶切成片断,插入到载体中,通过无性繁殖(细菌或细胞的倍增)使其扩增,然后再以某种探针选择、钓取目的基因。

基因工程有哪些
基因表达载体是基因工程的核心部分,其主要功能是承载外源基因并调控其表达。载体通常由质粒或病毒改造而成,包含多种调控序列,如启动子、终止子等,以便准确地在特定细胞或组织中表达目标基因。此外,为了便于克隆操作以及后续的筛选过程,还常常会引入抗生素抗性基因等标记基因。构建基因表达载体是基因工程的...

什么是克隆
细胞克隆则是在细胞水平上开展研究工作以获得大量相同的细胞。个体克隆则是经过一系列的操作产生一个或多个与亲代完全相同的个体,这种克隆所用的生物材料可能是一个细胞,也可能是一个组织。很显然,基因克隆,细胞克隆和个体克隆是在三个不同的层次上所开展的工作。以原有的基因或细胞或生物个体作为模板,复制出多个与...

南川区19438414080: 基因克隆载体 - 搜狗百科
连柳异福: 基因载体就是能将基因送入到宿主细胞中的运载体,选择基因载体的条件为:1:能够在宿主细胞中复制并稳定的保存.2:具有多个表达基因的切点,以便与外源基因拼结.3:有某些特殊基因,以便进行筛选.

南川区19438414080: 基因载体与基因表达载体的区别? -
连柳异福:[答案] 在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表达载体则用于在宿主细胞中获得外援...

南川区19438414080: 克隆载体与表达载体的区别如题 -
连柳异福:[答案] 克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达 但一定被大量复制而表达载体是一些用于工程生产的细菌...

南川区19438414080: 什么是宿主细胞? -
连柳异福: 宿主细胞指的是目的基因进行克隆的细胞,例如人的生长激素基因导入大肠杆菌进行克隆,大肠杆菌细胞就是生长激素基因的宿主细胞.如果目的基因的宿主是细菌或真菌,通常用质粒做目的基因的载体,特殊情况下用噬菌体做载体;如果宿主细胞是动植物,载体通常选取病毒或染色体DNA构建.我们把经过改造完成的能运送目的基因的载体称为克隆载体.

南川区19438414080: 基因克隆的载体有哪些基本特征 -
连柳异福: 1.要有可转移性 已进入宿主细胞 2.要有自主复制或者是整合功能 能携带目的基因一起稳定复制或表达 3.要是足够大的装载量 如plasmid 15kb YAC 400kb 4.要有合适的筛选标记 便于筛选 5.有合适的多克隆位点 便于目的基因的插入 6.要足够安全

南川区19438414080: 克隆的主要载体有哪些类型? -
连柳异福: 载体(Vector)是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具.载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等.载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记...

南川区19438414080: 什么是基因克隆..还有简述一下基因克隆的应用前景 -
连柳异福: 一般来说,基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组DNA,然后送入受体生物中去表达,从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合.因此基因克隆技术又称为分子克隆、基因的...

南川区19438414080: 什么是基因的载体 -
连柳异福: 基因工程是要按人们的意愿去有目的地改造,创建生物遗传性,因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆.分离或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖,需要载体携带它们到合适的细胞中复制和表现功能.对理想的基因工程载...

南川区19438414080: 克隆载体的定义是什么? -
连柳异福: 就是能够通过限制性内切酶,将目的DNA片段整合进去,并且能够转入宿主细胞进行表达的生物DNA. 常见的有质粒,病毒,噬菌体等.

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