RNA的提取方法大总结
这篇文章主要讲的是几种常用的RNA提取方法。
1、异硫氰酸胍氯化铯超速离心法
原理：使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质，进行密度梯度超速离心，RNA沉淀于管底，而DNA与蛋白质在上清中。使用这种方法，不但能得到高质量的RNA，而且能同时分离出细胞染色体DNA.
本法对于冷冻时间长、细胞质和细胞核不易分离的组织标本以及富含RNA酶的组织细胞（如胰腺）的RNA提取尤其适合。此法提取的RNA的质量好和成功率高，已成为提取哺乳动物细胞RNA的常规方法。其缺点是操作复杂、流程长，一次提取的样品数量有限。
2、盐酸胍-有机溶剂法
本法有MacDonald 1987年在Strohman报道的方法基础上改进而成的，适用于没有超速离心及设备的情况下提取细胞总RNA。它利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，有机溶剂抽提去除蛋白质，通过选择性沉淀RNA分子而去除DNA，提取的RNA质量较好，但整个操作过程繁杂费时。
3、氯化锂-尿素法
本法首先由Auffray报道，利用高浓度尿素变性蛋白质同时抑制RNA酶，3mol/L LiCl选择性沉淀RNA。其缺点是有时会存在DNA污染，LiCl沉淀RNA会丢失一些小分子量的RNA，如5S RNA等。优点是快速简捷，尤其适用于大量样品少量组织细胞的RNA提取，其质量可以满足Northern分析，Oligo（dT）提取mRNA，SI核酸酶或RNase保护实验等。本法每提取107个细胞能提取总RNA约10?g。
4、热酚法
本法主要用于少量细胞样品RNA提取，其产量不高，但简单易行。
5、快速提取法
本法主要用于培养细胞，通过0.5%SDS裂解细胞，酚抽提去除蛋白质和DNA沉淀，快速纯化RNA。
6、细胞质RNA提取法
本法主要适用于培养细胞，首先去除细胞核，然后用蛋白酶K消化蛋白质，酚/氯仿抽提去除蛋白质。操作简单，同时能进行多个样品操作，多数步骤在室温下进行，提取的RNA质量较高，可满足体外无细胞翻译系统、cDNA合成、引物延伸以及核酸酶SI保护实验。本法提取的RNA产量一般为30～500?g/107个细胞。
7、酚-氯化锂法同时提取细胞RNA和DNA
本法是在Elion和Warner报道的方法基础上，有Sandeep等人于1990年改进而成。它通过酚和SDS裂解细胞，变性，解聚蛋白，抑制RNase，并用EDTA保护DNA，最后根据RNA和DNA在Li+中的不同沉淀速度，而分离DNA和RNA。整个过程在2小时内完成。RNA可用于Northern分析，DNA可用于内切酶消化以及Southern杂交实验。
8、一步快速热酚抽提法
基于Shomczynki和Sacchi两人于1987年报道的RNA快速提取法，美国Promega公司有机地将这些试剂组合成总RNA试剂盒，使操作更为简单方便，并突出体现以下几个优点：1）将已知最强的RNase抑制剂异硫氰酸胍、b-巯基乙醇和去污剂N-十二烷基肌氨酸钠联合使用，抑制了RNA的降解，增强了对核蛋白复合物的解离，使RNA与蛋白质分离进入溶液，提高了RNA的提取产量；2）RNA选择性地进入无DNA和蛋白质的水相，容易被异丙醇沉淀浓缩，对大量或少量组织的细胞RNA提取，均甚合适；3）可在3小时以内处理大量样品，省略了氯化铯密度梯度超速离心步骤及其它方法使用的长时间选择性乙醇沉淀或LiCl沉淀。LiCl沉淀不但会导致小RNA（<5.8S）的丢失，而且Li+盐的残留还会抑制DNA的合成反应。
提取食盐的大致过程
在蒸发量大、降雨量小的海洋国家，海水蒸发是制盐的首选方法。先让盐田内充满海水，等到海水蒸发后就能从中获得盐晶。由于一些海藻和微生物在高盐度的环境下生长良好，因此有时这些盐田会有非常鲜艳的颜色。中国最大的盐场——长芦盐场原盐年产量240多万吨，占中国全国原盐总产量的7%和海盐总产量的四分之...
以下是从海水(富含Na+、Mg2+、Cl-等)中提取各种物质的流程图,根据如图...
从海水（富含Na+、Mg2+、Cl-等）中提取各种物质：海水蒸发得到氯化钠晶体，电解氯化钠得到钠和氯气，A为钠，金属钠燃烧和氧气反应生成淡黄色的过氧化钠，贝壳高温分解：CaCO3 高温 . CaO+CO2↑加入海水溶液中，CaO+H2O═Ca（OH）2，MgCl2+Ca（OH）2═Mg（OH）2↓+CaCl2，通过操作①过滤得到滤渣...
高中化学中有多少种提取物质的方法,每个方法的适用范围和注意事项都简...
加热浓缩，冷却结晶法：用于多种物质溶于水，一种物质浓度较高且随温度的变化溶解度变化大，其他物质浓度小且溶解度随温度的变化不大 注意：溶解度随温度变化差异大 溶液溶质浓度差异大（很多老师不提后边这点，但事实上这点很重要）蒸馏冷凝法：用于沸点不同且热稳定性好的不同种液体混合 提纯液体 ...
工业上冶炼各种金属都用什么方法?
因为电解质除了在水溶液中可以形成自由正，负离子，在熔融时也能形成可以自由移动的正，负离子，也就是说，这五种熔融的盐中分别含有K+,Ca2+,Na+，Mg2+,Al3+和 Cl-，O2- 。电解熔融盐或氧化物和电解盐溶液类似，拿电解氯化钠熔融物作解说，根据电解的原则，负极有大量的电子吸引正离子Na+过去得...
怎样从氯化钠和硝酸钾里提取纯净的氯化钠?
可用结晶法分离，一般方法为蒸发结晶或冷却结晶。硝酸钾的溶解度较大，且随温度变化较大，除去氯化钠中少量的硝酸钾，可用蒸发结晶的方法，而除去硝酸钾中少量的氯化钠，可用冷却热饱和溶液的方法，在结晶操作中，一般将需要提纯的物质结晶出来，因被提纯的物质不可能完全结晶，可少量存在母液中，用蒸发结晶...
高一化学的知识点
物质的检验通常有鉴定、鉴别和推断三类,它们的共同点是:依据物质的.特殊性质和特征反应,选择适当的试剂和方法,准确观察反应中的明显现象,如颜色的变化、沉淀的生成和溶解、气体的产生和气味、火焰的颜色等,进 (1)H能使紫色石蕊试液或橙色的甲基橙试液变为红色。 (2)Na+、K+ 用焰色反应来检验时,它们的火焰分别...
从矿石提取的金属主要有2个方法---用碳还原和电解。
因为电解质除了在水溶液中可以形成自由正，负离子，在熔融时也能形成可以自由移动的正，负离子，也就是说，这五种熔融的盐中分别含有K+,Ca2+,Na+，Mg2+,Al3+和 Cl-，O2- 。电解熔融盐或氧化物和电解盐溶液类似，拿电解氯化钠熔融物作解说，根据电解的原则，负极有大量的电子吸引正离子Na+过去得...
有没有办法从硫酸钠中提取钠的方法?有的话请告诉我,谢谢。
熔融的naso4 电解 就行了
提炼金属的化学方法,用CaH2做还原剂时有什么优点?
从自然界索取金属单质的过程称为金属的提炼。金属提炼方法有火法和湿法两大类。金属提炼一般分为三个过程——矿石的富集、冶炼和精炼。一、金属的冶炼 根据金属的存在形式、金属还原过程的热力学及其他诸多因素，工业冶炼金 属的方法主要有：热分解法、热还原法、电解法和氧化法。1.热分解法 Ag2O、HgO...
盐矿提炼盐的方法
→新碱+新盐。2NaOH+CuSO4→Cu(OH)2↓+Na2SO4和盐发生反应。复分解反应。盐（可溶）+盐（可溶）→两种新盐CuSO4+BaCl2→BaSO4↓+CuCl2和某些金属反应。置换反应盐+金属（某些）→新金属+新盐反应中的金属一定要比盐中的金属活泼才可以把它给置换出来。请看金属活动性。Zn+CuSO4→ZnSO4+Cu。
伍宽赛福：[答案] 摘要:以肝脏组织和NDV感染的鸡胚尿囊液为例,简单介绍了几种提取细胞或组织液中总RNA及mRNA的方法-SOD-蛋白酶K法、异硫氰酸胍法、loigo(dT)纤维素亲和层析法.SDS-蛋白酶K法提取RNA经济可靠,但纯度稍低;异硫...
房山区19580993821： RNA的提取方法步骤及原理. - ？
伍宽赛福：[答案] 分子克隆技术(华农) 实验一 质粒的制备 质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用.质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术. 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要步骤:细菌的培养、细菌...
房山区19580993821： rna的提取还有何种方法?是比较各自的优缺点? - ？
伍宽赛福：[答案] 常见的的总RNA提取方法有苯酚法、阴离子去污剂法、LiCl一尿素法、改良的Gomez法、异硫氢酸胍法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、TRIZOL试剂快速提取法. RNA提取时,就变性剂的选择来说,CTAB(CTAB法)比异硫氰酸胍(RIZOL试剂法)...
房山区19580993821： RNA提取方法有哪些 ？
伍宽赛福： RNAgents总RNA提取系统 1)Promega有哪些系统用于提取总RNA及poly(A)+RNA? 2)RNAgents®总RNA提取系统的工作原理怎样? 3)RNAgents®总RNA提取系统的一般...
房山区19580993821： RNA病毒的提取方法 - ？
伍宽赛福： 1、 TROzlo试剂、氯仿、75%乙醇(0.1% DEPC配制). 2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡. 3、 0.1%DEPC水:100ml dd水中加入DEPC0.1ml,充分振荡,37℃孵育12h以上,121℃高压灭菌20min,于4℃保存. 1、 样品处理 (1) 组织...
房山区19580993821： RNA提取用什么方法,具体的步骤?？
伍宽赛福：1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积不应超过TRIzol体积10℅. b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用...
房山区19580993821： 细胞提RNA方法有哪些 - ？
伍宽赛福： 将Trizol、氯仿、冷PBS、EP管、灭酶枪头、一次性手套、EP管架、吸管等物品带入细胞室. 1、 取出EP管、做好标记 2、 取出细胞、收集上清保存备用 3、 用冷PBS冲洗细胞两次 4、 加入1ml Trizol (24孔板每孔加0.5ml即可),调小刻度用移液器吹打细胞至液体澄清(生化:摇动混匀后室温孵育10min)
房山区19580993821： 怎么提取RNA? - ？
伍宽赛福： 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
房山区19580993821： RNA提取的关键步骤是??? - ？
伍宽赛福： 我只知道DNA的 析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢搅拌..朝一个方向..避免DNA折断
房山区19580993821： 提取昆虫RNA有哪些方法? - ？
伍宽赛福： 1.组织取材后,在酒精里泡一下立即放入冻存管,快速放入液氮.实验时,在液氮中将组织研磨成粉末,趁液氮未挥发将粉末转移到EP管.加入1ml Trizol,吸打均匀,静置5min. 2.加入200微升的氯仿,剧烈震荡30s,室温放置10min,离心...
