做透射电镜实验,染色不均匀会造成什么结果
用已知菌种做对照
比如实验室中有大肠杆菌和金黄葡萄球菌
在同一个玻片上分三块区域,两边分别涂大肠杆菌和金黄葡萄球菌
中间区域涂待测菌
革兰氏染色后,观察两边,大肠杆菌红色,金黄葡萄球菌紫色,中间的大肠杆菌红色,待测菌若与大肠杆菌一样颜色,就是阴性菌,是紫色就是阳性菌。
涂片过厚,首先会导致染色出现问题,厚的区域和薄的区域,染色和脱色的反应会不一致,厚的区域冲洗时非常容易脱落。此外,涂片过厚,镜下观察时各种成分互相覆盖无法区分,对观察构成严重影响。
做透射电镜实验,染色不均匀会导致透射成像偏差,影响实验准确性。
透射电镜实验报告:
一、实验目的与任务
1. 初步了解透射电镜操作过程。
2. 初步掌握样品的制样方法(主要是装样过程) 。
3.拍摄多晶金晶体的低分辨率照片(<300000倍)和高分辨率照片(>300000倍),并对相关几何参数、形态给予描述。用能谱分析仪对样品的成分进行分析。
二、实验基本原理
透射电子显微镜是以图像方式提供样品的检测结果,其成像的决定因素是样品对入射电子的散射,包括弹性散射和非弹性散射两个过程。样品成像时,未经散射的电子构成背景,而像的衬底取决于样品各部分对电子的不同散射特性。采用不同的实验条件可以得到不同的衬底像,透射电子显微镜不仅能显示样品显微组织的形貌,而且可以利用电子衍射效应同样获得样品晶体学信息。本次实验将演示透射电镜的透射成像方式和衍射成像方式。
三、实验方法与步骤
1. 登陆计算机 2. 打开操作软件 3. 检查电镜状态 4. 装载样品 5. 插入样品杆 6. 加灯丝电流 7. 开始操作 8. 结束操作 9. 取出样品杆 10. 卸载样品 11. 刻录数据 12. 关闭操作软件 13. 退出计算机 14. 实验记录
透射电镜为何不能运用于对活细胞观测?
透射电镜的原理是靠高能电子束穿过切为薄片的,用高电子密度染料染色的样品,由于样品中物质的电子密度不同而发生散射,最后穿透样品打在荧光屏上成像。活体细胞首先不能通过染色,由于生物样品厚度太厚,电子束无法穿透成像。
检测细胞凋亡的方法有哪些
可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。4、透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱 ...
谁能告诉我一下细胞的透射电镜的制作步骤?
由于电镜电子束穿透能力的限制,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染色...
染核后判断 是正常细胞还是凋亡细胞
3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。4、透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱褶,...
电镜问题
电镜有两种,透射电镜和扫描电镜,能看到物体的细微结构,但制作玻片标本需要特殊处理,要镀一层金属膜才能观察,但不需要染色。
在电镜下观察病毒需要染色吗
扫描电镜观察的话不需要染色,不过扫描电镜可能效果不好 透射电镜染色观察效果会好一些
超薄切片技术
超薄切片技术:探索微观世界的钥匙 在透射电镜的世界里,观察样品的精细结构要求无比精准。超薄切片技术,这项至关重要的技术,为我们揭示了生物样品在纳米级的奇妙世界。它为何如此重要?答案在于:透射电镜的神韵:样品需薄如蝉翼,一般要求厚度少于100纳米,确保电子束能穿透,观察到清晰的内部结构。样品的...
透射电镜(tem)的基本原理是什么?
此外,某些样品可能需要进行特殊处理,如染色或薄膜化,以增强其透射性能。总的来说,透射电镜通过发射电子束,使其穿透样品并产生交互作用,再通过电磁透镜系统放大和成像,最终观察到样品的微观结构。由于其高分辨率和放大倍数,透射电镜广泛应用于材料科学、生物学、医学等领域的研究。
透射电镜TEM载网膜选择及其表面处理-科学指南针
透射电镜(TEM)使用的关键元件包括载网和载网膜,它们的选择和处理直接影响样品的观察效果。载网通常是直径3mm,厚度10-30μm的铜片,分为圆孔和方孔,以及按网孔大小和材质区分。裸网则需覆盖有机膜以固定样品并防止电荷积累,碳支持膜是最常见的,分为方华膜、碳膜、微栅膜、超薄碳膜和纯碳膜,每...
透射电镜收费
透射电镜一般是几百块1小时。根据透射电镜型号不同,价格也不同,少的200也有,多的上千也有。透射电子显微镜Transmission Electron Microscope,TEM是使用最为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1~0...
生冒爱通: 做透射电镜实验,染色不均匀会导致透射成像偏差,影响实验准确性.透射电镜实验报告:一、实验目的与任务 1. 初步了解透射电镜操作过程. 2. 初步掌握样品的制样方法(主要是装样过程) .3.拍摄多晶金晶体的低分辨率照片(<300000倍...
重庆市18671704518: 电子显微镜成像原理 - ?
生冒爱通: 一、透射电子显微镜的成像原理可分为三种情况: 1、吸收像:当电子射到质量、密度大的样品时,主要的成相作用是散射作用.样品上质量厚度大的地方对电子的散射角大,通过的电子较少,像的亮度较暗.早期的透射电子显微镜都是基于这...
重庆市18671704518: 生物必修一中,在观察DNA和RNA在细胞中分布的实验中,为什么观察时应选择染色均匀,细胞质色泽较浅的区域,而不是色泽较深的区域? - ?
生冒爱通: 颜色深的区域染料较多,浓度太大可能会附着其他细胞器,或凝结、或局部浓度较高的色斑等等,影响观察
重庆市18671704518: 水滑石做阻燃剂,如何使用? - ?
生冒爱通: 镁铝类水滑石兼具了氢氧化铝和氢氧化镁阻燃剂的优点,又克服了它们各自的不足,具有阻燃、消烟、填充功能,是一种高效、无卤、无毒、低烟的新型阻燃剂[10~13].镁铝类水滑石阻燃剂的工业化生产和应用已引起国内外的关注.本文通过...
重庆市18671704518: 在高倍显微镜观察细胞有的清晰有的模糊是切片薄厚不均的原因吗 - ?
生冒爱通: 切的厚薄有关系,也可能是染色不均造成的,还有光圈的开放大小等都会影响的,实验是很严谨的东西,要仔细的去想每一个可能出错的地方实验才会有意义,成功与否都没有你自己思考得到的东西有价值.努力吧
重庆市18671704518: 色谱柱填充不均匀对实验有什么影响 - ?
生冒爱通: 会造成拖尾现象,实际上就是各种物质分离区间互相重叠,分离效果变差.
重庆市18671704518: 透射电子显微镜的使用注意事项 - ?
生冒爱通: 就是TEM,注意的东西多了,你要问哪方面的?我做实验的时候看过好几本书都是只有TEM的.我的意思是你把问题说具体点,我也许能回答你. 比如TEM的样品必须非常薄,通常小于20mm吧.想用好TEM,就先要把reciprocal lattice学好
重庆市18671704518: 什么是透射电子显微镜法 - ?
生冒爱通: 透射电镜的总体工作原理是:由电子枪发射出来的电子束,在真空通道中沿着镜体光轴穿越聚光镜,通过聚光镜将之会聚成一束尖细、明亮而又均匀的光斑,照射在样品室内的样品上;透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息,样品内致...
重庆市18671704518: 革兰氏染色中 蓝色和红色不明显或不均一是什么原因 - ?
生冒爱通: 阳性颜色不一样是因为操作过程或实验室环境原因引起的
重庆市18671704518: TEM所用的铜网、镍网和钼网的区别及各自的适用范围? - ?
生冒爱通: 铜载网是最广泛使用的载网.它也最便宜,并且相对于镍来说,具有更进一步的优势,即它的非磁性.但是铜在低的pH条件下具有活性,因此,镍的高的化学阻性使其在某些应用条件下具有 优势.对免疫金研究工作,铜不能被使用,因为在低的pH条件下,能发生包埋反应.对使用X射线能谱仪研究时,一般希望制备载网的材料不要提供X射线到能谱上,或不要提供难以解释的复杂数据,因此,铍载网经常是最好的选择.用于高温研究,主要使用钼载网(有时使用钨载网),因为这些金属具有低的热膨胀系数.如果样品(或碳膜)与热膨胀系数不同,将导致样品破裂.目前,这些载网仍然用于高温研究,但现在有更现代和更坚固的载网可供高温研究使用