PCR过程 cdna转录成mrna步骤
作者&投稿：酉背 （若有异议请与网页底部的电邮联系）
转录中，一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说，以特定的DNA片段作为模板，以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂，合成前体mRNA。
鲜嘉痰热：[答案] 是的,得到的是全体mRNA的cDNA的库.然后通过PCR手段获得需要的目的片段.但是实际操作过程中,由于mRNA的降解,因此一次实验不可能得到全部的cDNA,因此要重复1~2次,才能保证全部mRNA被反转录为cDNA.
临邑县18516795921： 由mRNA反转录形成cDNA的过程大致分为哪些步骤? - ？
鲜嘉痰热： 在PCR仪中,95度变性,72度延伸,Tm温度退火,来回30-35个循环,最后4度,就能得到反转录的cDNA.
临邑县18516795921： 如何根据基因的转录产物mRNA来获取目的基因 - ？
鲜嘉痰热： 可以通过逆转录的方法来推测目标基因,但是这种方法有很大的局限性,因为真核生物的基因含有内含子,其最初转录的mRNA要经过剪切才能成为成熟的RNA,因此逆转录得到的基因比原来的基因短. 基因(遗传因子)是遗传变异的主要物质.基因支持着生命的基本构造和性能.储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡过程的全部信息.环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程.生物体的生、长、衰、病、老、死等一切生命现象都与基因有关.它也是决定生命健康的内在因素.因此,基因具有双重属性:物质性(存在方式)和信息性(根本属性).
临邑县18516795921： CDNA如何克隆 - ？
鲜嘉痰热： 一般用mRNA反转录地方法得到cDNA 或者从文库里直接得到cDNA之后用PCR就可以扩增 克隆cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞.每一cDNA反映一种mRNA的结构...
临邑县18516795921： pcr如何扩增mrna - ？
鲜嘉痰热： PCR是不能直接扩增mrna的,需要先反转录成cdna,然后再扩增.只是拿到RNA后,是信使RNA后,先做一个反转录把RNA变成cDNA,然后就可以PCR扩增了.此答案为转发.
临邑县18516795921： “RT - PCR扩增目的基因cDNA”需要注意的事项有哪些? - ？
鲜嘉痰热： RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术.首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段.RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平...
临邑县18516795921： pcr,cDNA引物的问题 - ？
鲜嘉痰热： 同学,从你问问题的情况我猜想你可能有些基本问题很含糊. 我试着分析一下.1.首先PCR是体外大量扩增目的DNA的技术. 你问模板DNA是什么,这是不需要问的,你想扩增的目的基因是什么什么就是模板.你用cDNA来做PCR模板当然是...
临邑县18516795921： 设计一个检测某一基因是否转录的检测方法的实验,简述其过程与原理. - ？
鲜嘉痰热： 原理:转录是以一条DNA链为模板,合成出一条mRNA的过程.所以,检测某一基因在特定条件下是否转录,可以提取样品的mRNA,反转录成cDNA,然后用扩增该基因的PCR引物扩增,如果有条带就是说明转录,没有条带就是不转录.过程:1.提取样品mRNA;2.反转录合成cDNA;3.设计该基因特异的PCR引物;4.进行PCR扩增,电泳,检测结果.
临邑县18516795921： 提取RNA之后做体外逆转录cDNA,得到的是所有mRNA的cDNA吗?为什么? - ？
鲜嘉痰热： 是的,得到的是全体mRNA的cDNA的库.然后通过PCR手段获得需要的目的片段.但是实际操作过程中,由于mRNA的降解,因此一次实验不可能得到全部的cDNA,因此要重复1~2次,才能保证全部mRNA被反转录为cDNA.
临邑县18516795921： 随机引物 之RT - PCR急急急急急!!!!! - ？
鲜嘉痰热： 就是使用许多随机的碱基组合的引物(随机组合丰富),一般6到8个碱基,许多随机引物组成的一套引物组,由于mRNA相对较长,随即引物与它结合的位点较多,从而很快反转录形成cDNA单链.
