如何看流式细胞术结果中的图

如何看流式细胞周期结果图？~

博凌科为解答：流式细胞术在许多研究生课题中常用到，但对其结果的分析却不是很清楚。在此收集点相关资料并以实验中的一张图片为例，大家共同学习。图中白色箭头及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的，方便讨论。流式细胞术分析细胞周期结果示图 首先来认识下图：1、纵坐标Cell Number：即计数到的有效细胞数；2、横坐标DNA Content：即DNA量，为什么用DNA量来区别各周期我们等下再讲；3、G1、G2、S三期在上图已经用箭头标示；4、右侧数字含义：Mean G1=195.4即G1期DNA含量平均值为195.4；%G1=73.6即G1期细胞数占总数的73.6%；以此类推关于结果的具体分析我们会在接下来一起学习讨论。主要从细胞周期的角度看各参数的意义：1、细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。可分为四个阶段（见图）：① G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间；② S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期；③ G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间；④ M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。细胞周期图示 2、从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类：①连续分裂细胞，在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。②休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。③不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关，如：小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时，人类胃上皮细胞24小时，骨髓细胞18小时，培养的人了成纤维 细胞18小时，CHO细胞14小时，HeLa细胞21小时。不同类型细胞的G1长短不同，是造成细胞周期差异的主要原因。3、流式细胞结果图各参数的意义：常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞DNA含量（横坐标）来分析的：G1期：细胞DNA复制还没有开始，也是DNA含量最少的，即流式检测结果图的第一个峰；S 期：细胞开始复制，到完成复制，是一个一倍DNA到二倍DNA的过程，在流式结果图中显示期跨度特别大（第二个不高但很宽的峰）；G2期：DNA复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍DNA，在流式结果图中的第二个峰；M期：细胞分裂过程，此时细胞内也是二倍DNA，用DNA含量的方法是无法与G2期分开，所以有第三峰明显升高时报告：G2/M期阻滞。

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1、单参数直方图

每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布，以直方图的方式来显示。在图中，横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，其单位是道数（channel），可以是线形（line）或者对数（log）。纵坐标一般是相对细胞/粒子数（count）！
2、 二维图

在二维图的中，横坐标/纵坐标都表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，可以是线形（line）或者对数（log）。双参数图可以将样品细胞群分开，从而方便对感兴趣的细胞进行分析。

1、单参数直方图

每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布，以直方图的方式来显示。在图中，横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，其单位是道数（channel），可以是线形（line）或者对数（log）。纵坐标一般是相对细胞/粒子数（count）！
2、 二维图

在二维图的中，横坐标/纵坐标都表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，可以是线形（line）或者对数（log）。双参数图可以将样品细胞群分开，从而方便对感兴趣的细胞进行分析。

流式细胞仪检测的都是相对荧光强度，因此一般都是用来比较两个或以上样本的荧光强度的差异。而荧光强度则是由荧光标记抗体或者其他荧光染料根据不同目的来选用的。
你可以贴一组具体的图来，我可以给你一些指导。

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沭阳县19278261916： 如何看流式细胞术结果中的图 - ？
宜娜芩连： 博凌科为解答:FCM数据的存贮的方式是FCS2.0(flow cytometry standard),采用列表排队(List Mode)方式.易于加工处理分析,但缺乏直观性,数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种;由数据还可以做出标准曲...

沭阳县19278261916： 如何看流式细胞图 - ？
宜娜芩连： 流式的图一般是两种形式.一是柱状图,X轴是信号强度,Y轴是计数.数据通常显示为峰值.比如阴性或者信号弱的峰在左侧,而阳性或者信号强的就位于右侧.柱状图一次只能显示一个通道信号,通常用来判断阳性,阴性的区别或者单个通道信号在不同样本间的变化. 另外一种形式是散点图.就是把两个通道的信号同时显示在图上.优点是由于同时显示两个通道的信号,可以提供比柱状图更多的信息.多色流式样本检测一般都是通过上下级关系的图来显示不同的图.比如在上一级的图中先针对某个细胞群画了个门,然后该门内所有细胞又可以用其他通道的信号显示到另外一个图上进行进一步的分析.

沭阳县19278261916： 流式细胞术图像如何分析 - ？
宜娜芩连： 那些方框叫做圈门,旁边的数字说的是门里面所占的百分比,后面那2张图是计数,右上计数的是48%那群的,下图是计数45%那个门里面的, 整张图的横坐标左边是阴性,右边是阳性

沭阳县19278261916： bd流式细胞仪ros结果分析怎么看 - ？
宜娜芩连： 你是做的荧光染色看ROS水平吧.说的具体一些.一般就是荧光强度越高,代表ROS的水平越高.看你用的哪种染料了.

沭阳县19278261916： 流式细胞术的图片看不懂 - ？
宜娜芩连： 这应该是流式里最简单的图了吧,是不是通过FOXP3抗体分选调节性T细胞的?直接问帮你检测的仪器工程师就好了啊.横坐标是信号强度,纵坐标是细胞数量,中间那个H框是人为限定的一个取值范围,也就是阳性细胞.图示中设置的值是接近10^3,大于这个值被视为阳性细胞.

沭阳县19278261916： 如何分析流式细胞结果分析凋亡二维点图 - ？
宜娜芩连： 流式细胞仪(Flow cytometer )是对细胞进行自动分析和分选的装置.它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来.多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少.也就是说,它的细节 分辨率为零.

沭阳县19278261916： 流式细胞术检测小鼠脾脏t细胞亚群结果怎么分析 - ？
宜娜芩连： 简单的概括:1先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞2然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞)3再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8

沭阳县19278261916： 流式细胞术简称FCM,是利用流式细胞仪对特定的细胞群加以分选的多参数计量技术.下图甲为细胞周期过程中,运用该技术测得不同DNA含量的细胞分布... - ？
宜娜芩连：[答案] (1)图甲中对细胞进行放射性同位素标记,研究DNA含量变化,应选择标记胸腺嘧啶(或T). (2)据图甲分析,AB段DNA含量为2N,表示G1期,BC段DNA含量为2N→4N,表示S期,CA段DNA含量为4N,表示分裂期,则一个完整的细胞周期的表示方...

沭阳县19278261916： hoechst 33342 流式细胞术检测用哪个通道？
宜娜芩连： “通道”这个称呼一般只用于特定的机器,大多数的流式细胞仪上来来说,是要看光谱来匹配所要使用的检测头.该荧光染料的光谱如下 从图中可以看出,最大激活在350nm波长,所以要使用紫外激光.而最强释放波长在450nm左右.在选机器的检测器的时候,首先要选是针对紫外激光器的探头,然后看探头前方滤镜的通过波长,一般是450/50这样的.就可以了.和DAPI通用.

沭阳县19278261916： 流式细胞术简称FCM,是利用流式细胞仪对特定的细胞群加以分选的多参数计量技术.如图甲为一个细胞周期中,运用该技术测得不同DNA含量的细胞分布... - ？
宜娜芩连：[答案] (1)图甲中对细胞进行放射性同位素标记以研究DNA含量变化,而DNA分子特有的碱基是胸腺嘧啶,因此应选择标记胸腺嘧啶(或T). (2)甲图中AB段DNA含量为2N,表示G1期,BC段DNA含量为2N→4N,表示S期,CA段DNA含量为4N,表示分裂...