5%卵清蛋白溶液与ph4.7的缓冲溶液等量混合有什么现象?
EDTA配位滴定金属离子必须在一定的PH值条件下进行,通常用缓冲溶液来稳定溶液PH值.配位滴定时如果不使用缓冲溶液,则配位反应无法进行,导致滴定失败.
试液中铜离子的测定加入NaAc-HAc缓冲溶液的目的是稳定PH值。
常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。
柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。
磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。
标准缓冲溶液(均用pH标准缓冲物质配制) 1.1 苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液:c(KHC8H4O4)=0.05 mol/L(25℃时,pHs=4.003). 苯二甲酸氢钾的pH标准缓冲物质,有小塑料袋和瓶装两种,配制方法如下: a)袋装配制法:在250 mL(或500 mL)量瓶中(根据袋中标准缓冲物质量,选择量瓶大小),按袋上的说明配制成所需的浓度.保存于聚乙烯瓶中. b)瓶装配制法:称取5.10 g苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4预先在115℃±5℃,烘2~3 h,于干燥器中冷却),溶于水并稀释至500 mL,混匀.保存于聚乙烯瓶中. 1.2 0.025 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.025 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)混合标准缓冲溶液(25℃时,pHs=6.864):磷酸二氢钾和磷酸氢二钠的pH标准缓冲物质,有小塑料袋装(混合磷酸盐)和瓶装(两种pH标准缓冲物质分别包装)两种.配制方法如下: a)袋装配制法:在量瓶(根据袋上说明确定量瓶大小)中按袋上说明配制成所需浓度后,保存于聚乙烯瓶中. b)瓶装配制法:迅速称取3.40 g磷酸二氢钾(KH2PO4)和3.55 g磷酸氢二钠(Na2HPO4)(均预先在115±5℃烘2~3 h,于干燥器中冷却)溶于蒸馏水,转入1 000 mL量瓶中,加水至标线,混匀. 1.3 0.008 695 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.030 43 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)标准混合缓冲溶液(25℃时,pH=7.413):磷酸二氢钾和磷酸氢二钠两种pH标准缓冲物质分别用瓶包装,配制方法如下:迅速称取1.18 g磷酸二氢钾和4.31 g磷酸氢二钠(均预先在115℃±5℃烘2~3 h,于干燥器中冷却),溶于水,全量移入1 000 mL量瓶中,加水至标线,混匀.保存于聚乙烯瓶中. 1.4 硼砂标准缓中溶液:c(Na2B4O7·10H2O)=0.010 mol/L(25℃时,pHs=9.182). 硼砂的pH标准缓冲物质也有塑料袋装和瓶装两种,配制方法如下: a)袋装配制法:在500 mL量瓶中,按袋上说明配制成所需浓度后,分装于5个100 mL聚乙烯瓶中,瓶口用石蜡熔封. b)瓶装配制法:称取1.91 g硼砂(预先在盛有蔗糖饱和溶液的干燥器中平衡两昼夜),溶于刚煮沸冷却的蒸馏水,全量转入500 mL量瓶中,加水至标线,混匀.分装于5个100 mL聚乙烯瓶中,瓶口用石蜡熔封,有效期为三个月,经常使用的缓冲溶液,每周更换一次. 各种标准缓冲溶液的pH值随温度的变化而变化.45℃的pH值列于表21中. 表21 45℃标准缓冲物质的pH值温度,℃ 苯二甲酸氢钾(27.1.3.1.1) 混合磷酸盐(27.1.3.1.2) 磷酸盐(27.1.3.1.3) 硼砂(27.1.3.1.4)
卵清蛋白溶液中加入0.1molNaOH液呈碱性并煮沸后立即冷却,为什么变性而...
而 什 么 是 沉 淀 :蛋 白 质 分 子 凝 聚 从 溶 液 中 析 出 的 现 象 称 为 蛋 白 质 沉 淀 。那 么 , 如 过 你 使 用 氢 氧 化 钠 将 蛋 白 质 溶 液 p H 调 节 到 等 电 点 , 蛋 白 质 中 的 电 荷 分 布 趋 向 中 性 , 并 不 是 发 生 ...
...超声改性和茶多酚辅助超声改性蛋清蛋白凝胶的机理
研究发现,蛋清蛋白主要由卵清蛋白、溶菌酶和卵黏蛋白构成,这些成分共同形成蛋清凝胶的基础。在凝胶形成过程中,卵转铁蛋白、溶菌酶和卵黏蛋白参与形成凝胶骨架,而卵清蛋白在完全形成凝胶后成为主要的结构蛋白质。蛋清凝胶分为厚蛋清凝胶和薄蛋清凝胶,厚蛋清凝胶韧性较强、质地柔软,薄蛋清凝胶则脆硬,...
卵白蛋白适合什么人吃
卵白蛋白对胰蛋白酶抑制效果的科学研究:鸡卵白蛋白对蛋白酶有明显抑制效果而且抑止水平与温度、p H值等息息相关,能一部分抑止枯草杆菌胰蛋白酶特异性,不抑止胰细肤水胰蛋白酶。卵白蛋白可做为固定化酶木瓜蛋白酶的媒介。一方面,卵清媒介的得到及制取都十分非常容易,低成本;另一方面,在药业和食品工业...
过敏性咳嗽有什么症状?
症状有:第一、咳嗽不只是过敏性哮喘有咳嗽的症状表现,其它哮喘也有。但是过敏性哮喘患者在发作期咳嗽往往会减轻,进而转为喘息,当发作结束时,又会有大量分泌物排出,很容易被误诊成支气管炎。第二、胸痛胸痛这种过敏性哮喘的表现只会在患者发病比较重的时候出现,一般认为与呼吸肌过度疲劳有关。当合并...
下列各蛋白质在电场中朝哪个方向移动(正极、负极、原点)?
【答案】:a.卵清蛋白的pI=4.6在pH5.0时带负电荷在电场中朝正极移动。 b.β一乳球蛋白pI=5.2在pH5.0时带正电荷在电场中朝负极移动;在pH7.0时带负电荷在电场中朝正极移动。 c.胰凝乳蛋白酶原pI=9.5在pH5.0时带正电荷在电场中朝负极移动;在pH9.5时净电荷为零在电场中不移动...
不锈钢塑料薄膜的去除方法
不锈钢上的保护膜都是非常薄的,所以用开水一烫就卷了,一卷就好取下来了。
为什么有些抗原一生只得一次
回答:人工抗原 用化学合成法或基因重组法制备含有已知化学结构决定簇的抗原, 称之为人工 抗原.它可包括人工结合抗原、人工合成抗原和基因重组抗原.无论对免疫学理 论研究和分子疫苗的制备都具有重要意义. (一)人工结合抗原 将无免疫原性的简单化学基团与蛋白质载体偶联, 或将无免疫原性的有机分子 如二...
求免疫组化冰冻切片荧光染色具体流程
(1)将标记完毕的荧光蛋白液装入一透析袋或玻璃纸袋内,液面稍留空隙,紧扎。 (2)浸入0.02mol\/pH 7.1~7.4的PBS中(悬于大于标记物体积约50~100倍的PBS内),在4℃中透析,每日更换3~4次PBS,约5~7天,透析液中无荧即可(在荧光光源照射下)。 (三)葡聚糖凝胶G-50柱层析法 除游离荧光素可用2×46cm柱层析...
请哪位高人帮我回答一下有关细胞生物学的问题
(3)1.可以利用oligo-DT或者oligo-U对提取的总RNA进行亲和层析,提取mRNA,然后用DNA探针或者RNA探针进行southern杂交。2.当然卵清蛋白作为一种蛋白质,自然可以利用免疫荧光技术。(4)利用的是western blot。这个不细说了 (5)将M期的hela细胞与其他间期细胞在仙台病毒下诱导融合,并继续培养一段时间...
抗原抗体反应的应用
腹水中含有较多的杂蛋白和非特异性IgG,并且含有许多蛋白酶,易使抗体失活,因此腹水收集后应尽快纯化,以防止降解。大瓶培养:采用1000mL或更大的摇瓶培养。大瓶培养上清体积大,但抗体浓度低,给抗体纯化带来很大困难,消耗人力和培养液,增加生产成本。中空纤维反应器:是比较经济的单克隆抗体生产方法。该装置由具有半透膜...
枕度安利: 乙醇引起的变性与沉淀实验取3支试管,编号.依顺序加入试剂:试管一: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL试管二: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的NaOH溶液各1mL试管三: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1...
天门市18335304299: 关于蛋白质变性的问题1mL5%卵清蛋白溶液,加1mL95%乙醇,再加PH4.7的缓冲溶液,后加水8mL,再加0.1NHCL数滴,沉淀溶解,为什么?1mL5%卵清... - ?
枕度安利:[答案] 1.有机溶剂助沉法 + 等电点法沉淀蛋白.乙醇有机溶剂变性蛋白 PH4.7的缓冲溶液更加沉淀蛋白.(卵清蛋白的等电点pI是4.6-4.7)当你加入HCL时,pH降低了,远离等电点,因此蛋白溶解了.2.NaOH 加入后,一定远离pI,无沉淀.乙...
天门市18335304299: 关于蛋白质变性的问题 - ?
枕度安利: 1.有机溶剂助沉法 + 等电点法沉淀蛋白.乙醇有机溶剂变性蛋白 PH4.7的缓冲溶液更加沉淀蛋白.(卵清蛋白的等电点pI是4.6-4.7)当你加入HCL时,pH降低了,远离等电点,因此蛋白溶解了.2.NaOH 加入后,一定远离pI,无沉淀.乙醇...
天门市18335304299: 一个乙醇引起蛋白质变性实验,有几个不明白的地方 - ?
枕度安利: 首先,只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性,低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构(氢键)破坏而沉淀析出,类似于盐析.其次,变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变.你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%,而且最后蛋白会再溶解.因此,这个实验不足以证明蛋白质变性. 后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点,增大蛋白质的溶解度,进而使蛋白质再溶解.
天门市18335304299: 蛋白质在pH4.7的缓冲液中,然后再加入NaOH,会出现什么反应 - ?
枕度安利:[答案] 不同的蛋白出现的情况不太一样.不过大多数蛋白的等点电在4.7.也就是说,蛋白在4.7时会沉淀.而加入NaOH,沉淀会溶解.当然,如果等电点比较高的,会是先溶解,后产生沉淀. 这是表面现象.如果NaOH加得多会降解.
天门市18335304299: 要配制ph=4.70的缓冲溶液500ml,计算用多少毫升0.50mol/L HAc溶液与50ml0 - ?
枕度安利: 根据pH=4.70可知 该缓冲溶液最终的缓冲对应为HAc-NaAc 且根据50mL 0.5mol/L的NaOH可知缓冲液中NaAc的浓度为0.05mol/L 根据缓冲溶液pH计算公式:[H+]=Ka*(cHAc/cNaAc) 按Ka(HAc)=1.8*10^-5来计算10^-4.7=(1.8*10^-5)*(cHAc/0.05) cHAc=0.055 需要0.5mol/L的HAc溶液55mL
天门市18335304299: 乙醇引起的变性与沉淀实验时,其中一管加入pH4.7 醋酸 - 醋酸钠的缓冲溶液有何目的? - ?
枕度安利: 实验用的蛋白质是卵清蛋白,其pI=4.6 与缓冲溶液的pH4.7接近,就可形成沉淀
天门市18335304299: 配制PH=4.70的缓冲溶液500ml,问应用50ml0.50mol/LNaOH和多少ml0.50mol/LHAc溶液混合再稀释至500ml?(Ka,HAc=1.76*10的负5次方)提示:[H+]=Ka*... - ?
枕度安利:[答案] PH=4.7 H离子浓度为 10的-4.7次方 也就是说 H离子全部来自 HAc HO根被中和 再根据 Ka(HAc)就可求出 自己动手做记忆才深刻!
天门市18335304299: 蛋白质的沉淀反应 - ?
枕度安利: 首先:你要知道,蛋白质是带有电荷的,一种蛋白质在某一个pH下,蛋白质的电荷被中和,溶解度最小,这个pH成为等电点.(你们用的蛋白质的等电点估计就是4.7) 其次,乙醇使得蛋白质的二级、三级、四级结构变化,但是不改变蛋白质的一级结构,也就是说,蛋白质还是原来的两性物质(既有酸性又有碱性,所以能够溶于酸和碱).好了1号管有乙醇,还有缓冲液(缓冲液就是由酸碱组成的),1号管沉淀了,你要说明这是因为乙醇而不是缓冲液啊.所以你需要二号三号管来证明,酸和碱都没有使蛋白质沉淀(因为变性的蛋白质被酸碱溶解了),而且中和之后就发现沉淀出现了,说明沉淀是因为乙醇而不是酸碱.至于甲基红,是为了指示酸碱度,你不是要中和嘛,没有指示剂你怎么滴定?
天门市18335304299: pH4和7的标准缓冲溶液怎么配制?请说出试剂的配制方法.谢谢啊 - ?
枕度安利: 缓冲溶液的配制应该遵循PH=PKa±1的原则.只有这样才能达到有效的缓冲效果. 根据上述原则可以用醋酸(PKa=4.7)配制PH=4的缓冲溶液; 用磷酸二氢钠(PKa^2=7.2)配制PH=7的缓冲溶液. 用磷酸二氢钠-磷酸氢二钠配制缓冲溶液的方法...