色谱分离技术中,薄层色谱的基本操作过程及注意事项

作者&投稿:茅苇 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
~ 薄层色谱操作注意事项

影响薄层色谱分析的因素有很多,比如样品处理方法、薄层板制备技巧、点样方法、展开剂的遴选、温湿度的掌控等等很多方面,在这里对其操作要点作一下简单介绍:

1铺制薄层板:铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外,也影响板涂层的厚度,进一步影响上样量。涂层薄,点样易过载;涂层厚,显色不那么明显。通常,板的质量对薄层鉴别的影响不是很大,影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。
2点样:尽量用小的点样管。如果有足够的耐性,最好只用1微升的点样管。这样,点的斑点较小,展开的色谱图分离度好,颜色分明。样品溶液的含水量越小越好,样品溶液含水量大,点样斑点扩散大。样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。

薄层色谱用于定量时,点样是最主要的误差来源。

供试液的溶剂均有不同程度的洗脱力,所以在点样的同时,样品在原点就可是成环形展开,原点直径的扩散促进了这种展开,Kaiser称之为“上样环形色谱效应”。如果样品在溶剂中的溶解度很大,原点将变成空心环。这种效应对随后的先行展开造成很不利的影响。
供试液的溶剂在原点的残留,也会改变展开的选择性,特别是供试液的溶剂与展开剂的极性相差较大时更明显。再者,亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分(特别在高湿度环境)对色谱的影响也不可低估。因此点样时的同步干燥或继后干燥以除去原点残存的溶剂是需要的。但应尽可能避免高温加热,如用吹风筒加热,样品变为固态后,部分或全部强烈的吸附在吸附剂的颗粒上,而促进了硅胶的有催化作用的活性表面故态化学反应,导致样品的变性(尤其热不稳定物质),至少移动相在展开时对这部分样品的溶解速度比移动速度慢得多而形成拖尾(斑点拖尾的原因之一)。


薄层色谱薄层色谱原理
薄层色谱是一种基于化合物在特定物质中吸附或溶解性能差异的分离技术。基本原理是利用混合物中各组分的极性差异,使其在吸附剂上移动,形成不同程度的解析,通过测量化合物移动与展开剂移动的距离比例(即比移值Rf)来鉴别化合物。Rf值受化合物极性影响,极性越大吸附越强,Rf值越小。薄层色谱适用于微量...

用薄层色谱分离混合物时,如何判断各组分在薄层上的位置
随后,刮取未显色板的等Rf部分,即可。荧光显色最好,其余的可能对化合物造成破坏,因此必须裁一小条显色。涂布于支持板上的支持物作为固定相,以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的...

几种色谱分离方法(纸色谱、薄层色谱及萃取色谱)的固定相和分离机理有...
(2)薄层色谱是根据不同物质在两相间的吸附能力不同而进行分离的。其固定相为涂布在薄板上的硅胶、氧化铝或聚酰胺等载体,流动相是各种配比的展开剂。(3)萃取色谱是将溶剂萃取与色谱分离技术相结合的液相分配色谱,一般在柱上进行,为色谱柱。以涂渍或吸留于多孔、疏水的惰性载体的有机萃取剂为固定相...

高温色谱法色谱的分类
在色谱分析领域,常见的色谱技术根据分离原理可以分为几个主要类别:首先,薄层色谱法是一种广泛使用的分离技术。当处理有色物质时,可以通过观察它们在薄层板上形成的色带来识别和区分。对于无色物质,可以利用紫外线,如短波(254nm)或长波(365nm),进行检测。在必要时,可以使用显色剂让它们呈现出颜色...

薄层色谱在有机合成中的应用
薄层色谱(TLC)是一种常见的分离技术,它可以用于快速分离和检测有机化合物。在有机合成中,TLC常用于以下方面:1. 反应监控:通过TLC可以监测反应的进程和产物的纯度。反应物和产物在TLC上的Rf值不同,可以用来检测反应进展情况和产物的纯度。2. 分离和纯化:TLC可以用来分离和纯化有机化合物。将混合...

薄层色谱法简介
薄层色谱法,简称薄层层析,是一种重要的层析分离技术,其基础原理是将涂布在支持板上的固定相(支持物)与流动相(合适的溶剂)相结合。在这一过程中,混合样品会进行分离、鉴定和定量分析。它的优势在于高效,特别适用于快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱等各类物质,这些物质在生物化学...

簿层色谱基本原理
薄层层析是一种基于薄层支持板(如玻璃板或涤纶布)进行样品分离的技术。该方法首先将支持物均匀涂布形成薄层,然后使用相应的溶剂进行展开。根据固定相的不同,薄层层析可分为吸附层析(如硅胶或氧化铝)、分配层析(纤维素)、离子交换层析(离子交换剂)和凝胶层析(分子筛凝胶)等。吸附层析在实验中应用...

薄层色谱的原理
薄层色谱法(TLC)系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后。根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于...

mpr薄层是什么意思?
MPR薄层是什么意思:解读薄层分析技术 MPR薄层是一种薄层分析技术,该技术性能独特,可以将物质分离并进行定量分析。它广泛应用于生物化学、医学、环境和农业等领域。MPR薄层分析可衡量物质含量,成分和质量,并可产生具体的结果。MPR薄层的应用范围及方法 MPR薄层技术广泛应用于许多领域,包括有机化学、药学、...

什么叫薄层色谱法?原理是什么?!!急!!
薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也...

图木自治县市15546072353: 薄层色谱基本操作有哪几个关键技术 各项操作应该注意什么 -
皇的迪尔: 薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱.是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点.一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离...

图木自治县市15546072353: 简述薄层层析法的基本操作方法. -
皇的迪尔: 薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层...

图木自治县市15546072353: 薄层色谱的操作过程 -
皇的迪尔: 你那个薄层板多大啊,小块的话,在1到2厘米的地方用铅笔画条线,然后在这条线上确定你要点样的点(两个或者以上,根据你要点样的品种定)然后在层析夜层析,液体不要没过那条线,过了五分之二或者四分之三的时候拿出来,在那个地方再画条线,完成啦,然后计算你要的结果就好了

图木自治县市15546072353: 薄层色谱法起源及使用是什么? -
皇的迪尔: 薄层色谱法起源于60年代,至今,它已成为一般实验室必不可少的分离分析手段,常常被首选成不可替代的方法.薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它...

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