什么是PCR扩增技术

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~ 基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新.可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域广泛应用和迅速发展.由于PCR具有敏感性高、特异性强、快速、简便等优点,已在病原微生物学领域中显示出巨大的应用价值和广阔的发展前景.PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物.此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA单链的结合.引物与互补DNA结合后,以靶DNA单链为模板,经反链杂交复性(退火),在Taq DNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷(dNTP)为原料按5'到3'方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链.然后又开始第二次循环扩增.引物在反应中不仅起引导作用,而且起着特异性的限制扩增DNA片段范围大小的作用.新合成的DNA链含有引物的互补序列,并又可作为下一轮聚合反应的模板.如此重复上述DNA模板加热变性双链解开—引物退火复性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循环过程,使每次循环延伸的模板又增加1倍,亦即扩增DNA产物增加1倍,经反复循环,使靶DNA片段指数性扩增.


pcr扩增的原理和步骤
实验方法原理 ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应做准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的...

什么是PCR扩增目的基因?
PCR扩增技术已广泛地用于分离目的基因。如果知道目的基因的全序列或其两侧的序列,可以通过合成一对与模板DNA互补的引物,十分有效地扩增出含目的基因的DNA片段,采用常规PCR技术扩增分离目的基因比较方便,但必须知道待扩增目的基因DNA片段的核苷酸序列,或者至少要求DNA片段两端长约20bp的序列是已知的,这样...

PCR基因扩增原理?
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的...

请写出3-4种pcr技术及其应用。
DNA克隆: 常规PCR可用于扩增特定基因片段,然后将其插入到载体中,进行基因克隆。2. 逆转录PCR(RT-PCR)技术:RT-PCR是在PCR技术基础上,加入了逆转录步骤,将RNA转录为cDNA,再进行PCR扩增。该技术主要用于:基因表达分析: RT-PCR可以用来研究特定基因的表达情况。通过逆转录,将mRNA转录为cDNA,然后...

pcr过程是什么?
pcr过程是是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。具体过程如下:1、变性:加热使模板DNA在高温下(94℃左右)双链间的氢键断裂而形成两条单链。2、退火;使溶液温度降至50~60℃,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合。3、延伸:溶液反应温度升至72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在...

普通基因扩增和PCR的区别?PCR就是基因扩增么?
PCR是聚合酶链式反应的英文缩写,它是一种基因扩增技术,应用这个技术的仪器叫PCR仪,或者叫基因扩增仪。普通PCR仪是定性的(需要在扩增后再电泳分析),荧光定量PCR仪可以定量(有加荧光探针)。通常说 基因扩增仪 是指普通PCR仪。

核酸扩增测试与PCR是什么关系?
数字PCR(dPCR):一种绝对定量PCR技术,通过将样本分割成许多独立的小体积反应,每个小体积中可能含有或不含有目标序列,然后进行PCR扩增,最后统计含有目标序列的反应数量,计算出原始样本中的核酸浓度。环介导等温扩增(LAMP,Loop-mediated Isothermal Amplification):一种在恒定温度下进行的核酸扩增技术,...

生化PCR名词解释
聚合酶链式反应(英文:Polymerase chain reaction,缩写:PCR,又称多聚酶链式反应),是一项利用DNA双链复制的原理,在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。透过这项技术,可在短时间内大量扩增目的基因,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。凯利·穆利斯(Kary Mullis)于1983年开发,当时他是Cetus...

PCR技术扩增的目的是什么?为什么要PCR技术扩增?
目的是合成大量DNA片段,属于基因工程操作程序的 目的基因的获取 ,在人教版选修生物现代生物科技专题课本上有更详细的。

什么是qpcR技术?
深入了解qPCR的魔力,首先,让我们揭开其神秘面纱。qPCR,作为PCR技术的升级版,它的核心原理是通过荧光信号追踪目标片段的扩增,从而定量分析基因转录水平。与传统PCR不同,qPCR更偏好于短片段的扩增,以确保高度特异性和准确性。PCR反应,这个基础技术,是DNA聚合酶在体外条件下复制DNA的接力赛。引物,作为...

赣榆县18438391249: 什么是PCR扩增技术 -
兴幸可谱:[答案] 基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新.可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分...

赣榆县18438391249: 试述PCR扩增的原理和步骤 -
兴幸可谱:[答案] PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物. PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与...

赣榆县18438391249: 什么是反向点杂交技术麻烦高手什么是 PCR - 反向点杂交法 -
兴幸可谱:[答案] PCR是聚合酶链式扩增的英文缩写.反向点杂交是将探针固顶在玻璃芯片或尼龙膜上,用于检测扩增产物中是否含有目标基因的技术.此技术较为成熟,在国内应用较多,如HPV分型诊断试剂、地中海贫血诊断试剂等.

赣榆县18438391249: 什么事PCR扩增技术?
兴幸可谱: 哥哥给你解释下?PCR就是聚合酶的链式反应,扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA 序列的一种技术!给我最佳

赣榆县18438391249: 何为PCR,说明其原理及其应用 -
兴幸可谱:[答案] 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术. PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:...

赣榆县18438391249: pcr技术扩增 -
兴幸可谱: PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能...

赣榆县18438391249: PCR的原理是什么 -
兴幸可谱:[答案] 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至...

赣榆县18438391249: 什么是“PCR基因检测技术” -
兴幸可谱: 针对要检测的基因序列设计PCR引物.然后用待检测的DNA作物底物进行PCR扩增.如果待检物内有目标基因序列,就会有特异性的PCR产物形成

赣榆县18438391249: 什么是PCR实验 -
兴幸可谱: PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环,使...

赣榆县18438391249: 什么是pcr技术,如何检测病原? -
兴幸可谱: ⑴PCR技术的基本原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应.DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模...

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