质粒上 切点是什么意思

质粒上的ORF是什么意思~

ORF可能是以下含义：
ORF:Open Reading Frame
开放阅读框架
ORF:Outbound Route Filtering
出站路由过滤

并不是。有些质粒上没有合适切点，而自然存在的质粒分子一般都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。
作为基因工程使用的载体必须满足以下条件：
1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。
2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。
3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。
4） 载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。
5） 载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。

质粒上的切点就是限制性内切酶的切割位点。

每一种限制性内切酶都识别特定的碱基序列，并有特定的切割位点，比如：

限制性内切酶BamHI，识别序列：5' G^GATCC 3' ，切割位点是GA之间（已经标出）。

就是有一个限制酶切位点，目的基因左右两侧都有限制酶切位点，质粒是环状，只需有一个。限制酶识别位点处的特定DNA序列，然后切割。

---

博乐市18530044214： 生物的基因工程中,目的基因为什么有两个切口,而质粒只有一个切口? - ？
滕咳丽扶： 目的基因有两个切口是为了把目的基因切下来,而质粒上一个切口是为了切出一个让目的基因插入的点,不过,一般情况下质粒和目的基因是同时用两个不同的限制酶切割,所以一般都是两个切口

博乐市18530044214： 质粒上一种内切酶的切点只有一个吗?质粒含有多个不同种内切酶的切点? - ？
滕咳丽扶： 质粒上的一种内切酶的酶切位点可以有多个,比如T载体上的酶切位点就有重复的,但要看你干吗用了,一般只有一个,如果有多个酶切位点且距离比较远的话就把你的质粒切碎了,质粒上肯定还有多个不同的内切酶位点供选择,只有1个内切酶酶切位点的质粒没什么用处.

博乐市18530044214： 名词解释载体和限制酶.谢谢. - ？
滕咳丽扶： 载体:在基因工程重组DNA技术中将目的基因转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子.三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒. 限制酶:限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶,简称限制酶. 哪里不明白请追问,满意请采纳,希望对你有帮助~

博乐市18530044214： 克隆的主要载体有哪些类型? - ？
滕咳丽扶： 载体(Vector)是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具.载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等.载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记...

博乐市18530044214： 质粒的必修条件?作为质粒必须具有一个或多个没切位点,多个指的是同一种限制酶的切点有几个,还是在同一质粒上几个有不同种类的限制酶切割点? - ？
滕咳丽扶：[答案] 当然是同一质粒上几个有不同种类的限制酶切割点 目的是与外缘基因连接,因为这两者不是需要同一种限制性内切酶吗?可如果获得外缘基因那种内切酶,在质粒中没有酶切割点不就没用了吗.所以质粒需要几个有不同种类的限制酶切割点

博乐市18530044214： 质粒上oriT 意思代表什么 oriC代表什么? - ？
滕咳丽扶： 你好!质粒DNA中被切开的特定的地方就是oriT或称为bom(basis of mobility)、nic(nick site) 如果对你有帮助,望采纳.

博乐市18530044214： 质粒上,每种酶的切割位点最好只有一个,以便获得结构单一的重组DNA,这句话是什么意思 - ？
滕咳丽扶： 这个跟遗传学有类似的地方比如质粒是D目的基因是d,则两两组合的结果有DD,Dd,dd.那一个切割位点,可以跟好的获得不是组合的DNA

博乐市18530044214： 质粒上有多个限制酶的切割位点,这句话怎么理解 - ？
滕咳丽扶： 意思很明确啊 人为的插入了很多酶切位点

博乐市18530044214： 有一环状dna上有三个同一种酶的切点,问最多有几种片段 - ？
滕咳丽扶： (1)质粒切割前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被改酶切割后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此...