pcr的原理是什么？
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
循环参数
1、预变性
模板DNA完全变性与PCR酶的完全激活对PCR能否成功至关重要，建议加热时间参考试剂说明书，一般未修饰的Taq酶激活时间为两分钟。
2、变性步骤
循环中一般95℃，30秒足以使各种靶DNA序列完全变性，可能的情况下可缩短该步骤时间。变性时间过长损害酶活性，过短靶序列变性不彻底，易造成扩增失败。
3、引物退火
退火温度需要从多方面去决定，一般根据引物的Tm值为参考，根据扩增的长度适当下调作为退火温度。然后在此次实验基础上做出预估。退火温度对PCR的特异性有较大影响。
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。
耐热DNA聚合酶-Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：
1、模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2、模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
3、引物的延伸：DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链；
重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
应用
1、鉴定基因
人体内的细胞共有有约为30亿个碱基对的DNA，每个人的DNA会有差异，具有差异的碱基对数目达几百万之多，因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异，由此可以识别不同的人。所谓“DNA指纹”，就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。
由于DNA是遗传物质，因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。
2、亲子鉴定
利用医学、生物学和遗传学的理论和技术，从子代和亲代的形态构造或生理机能方面的相似特点，分析遗传特征，判断父母与子女之间是否是亲生关系。
3、诊断遗传病
聚合酶链式反应允许白血病、淋巴瘤等恶性疾病的早早期诊断。此法是当今癌症研究中最发达的，并已被常规使用。聚合酶链式反应分析能以高于其他细胞10,000倍的敏感度在核酸DNA样本中直接探测具特定转录的恶性细胞。
聚合酶链式反应同样可以对不可培养的或生长缓慢的微生物（如分支杆菌、厌氧细菌、组培分析和动物模型中的病毒）进行定位。在微生物学中，聚合酶链式反应诊断性应用的基础是传染媒介的探测和从病原种系中借助特定基因的分离出非致病的种系。
以上内容参考 百度百科-聚合酶链式反应
PCR的原理是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
PCR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。
在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。扩展资料
标准的PCR过程分为三步：
1、DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。
2、退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。
3、延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。
有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。
CR的成像原理是什么
CR是计算机放射摄影。它成像板IP为影像载体来替代传统的X线胶片，采用与常规X线摄影一致的投照技术，在X线对成像板曝光的同时记录下X线影像信息。接过信息的读取与处理后，即可获得数字化的X线影像信号。一般来说，这种潜影信息在IP中的留存时间可达8h以上。当需要解读潜影信息时，可用激光束扫描成像板激发...
cr与dr的比较
1、工作原理和图像质量。CR系统使用可重复使用的磷光屏来转换X射线影像为电子信号，然后进行扫描并转换为数字图像。相比之下，DR系统直接使用固态探测器将X射线转换为数字图像，无需中间介质。因此，DR系统通常具有更高的图像质量，而CR系统的图像质量相对较低。2、成像速度和效率。DR系统相对于CR系统具有...
CR的成像原理是什么?
CR（Computed Radiography）计算机放射摄影。它以成像板IP（Imaging plate）为影像载体来替代传统的X线胶片，采用与常规X线摄影一致的投照技术，在X线对成像板曝光的同时记录下X线影像信息，接过信息的读取与处理后，即可获得数字化的X线影像信号。CR的构成主要包括两大部分：成像板与信息读出装置。成像板是X线...
cr成像原理
CR成像原理是利用X射线穿透物质后的特征影像，通过光电效应或荧光效应，将X射线转化为可见光，再通过光电转换器将可见光转化为电信号，再经过数字处理系统进行处理，形成我们所看到的影像。CR成像技术具有较高的分辨率和灵敏度，广泛应用于医学、安全检查、工业检测等领域。
dr和cr是什么意思drcr是什么意思
4、在非晶硅影像板中，X线经荧光屏转变为可见光，再经TFT薄膜晶体电路按矩阵像素转换成电子信号，传输至计算机，通过监视器将图像显示出来，也可传输进入PACS网络。5、CR成像原理是用影像板IP（Imaging Panel）替代传统的胶片增感屏，用存储介质记录X线影像，通过激光扫描使存储信号转换成光信号，再用光电...
关于CR的工作原理,正确的是A.IP由基层、荧光体层和保护层构成B.IP由...
【答案】：A 经x线照射后，IP将接受的X线光子能量以潜影形式在晶体内，数小时不消失。所以BCDE都不正确。
CR的成像原理(四象限理论)
成像原理涉及生物样本的造影技术，根据样本的大小，可以大致分为组织造影和细胞分子显影两大类。这些技术往往依赖于光学技术，并依据生物样本的特异性进行发展。在某些情况下，还会利用除光以外的波动性质，如核磁共振和超声波等。
什么是cr指标?
CR指标又叫中间意愿指标,它和AR、BR指标又很多相似之处,但更有自己独特的研判功能,是分析股市多空双方力量对比、把握买卖股票时机的一种中长期技术分析工具. CR指标的原理 CR指标同AR、BR指标有很多相似的地方,如计算公式和研判法则等,但它与AR、BR指标最大不同的地方在于理论的出发点有不同之处.CR...
二苯碳酰二肼分光光度法测定cr的原理
二苯碳酰二肼分光光度法测定cr的原理如下：酸性溶液中，六价铬与二苯碳酰二肼反应生成紫红色化合物，于波长540nm处进行分光光度测定。
CR指标是什么?
CR指标是什么?CR指标详解。CR指标指的就是能量指标,CR指标又叫中间意愿指标、价格动量指标,它和AR、BR指标有很多相似之处,但更有自己独特的研判功能,是分析股市多空双方力量对比、把握买卖股票时机的一种中长期技术分析工具。基本原理CR指标同AR、BR指标有很多相似的地方,如计算公式和研判法则等,但它与AR、BR指标最...
鄞悦康赛： 原发布者:yqjklhq 一.简述PCR基本原理?PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右...
朝阳县15367285310： PCR技术原理是怎样的?经典点 - ？
鄞悦康赛： PCR技术原理:以合成的两条已知序列的寡核苷酸为引物,在DNA聚合酶作用下,利用dNTP为原料,将位于两引物之间的特定DNA片段进行复制.这样经过变性、退火、延伸一个循环,每一个循环的产物作为下一个循环的模板,如此循环30次.每完成一个循环需2~4分钟,2~3h就能将带扩目的基因扩增放大几百万倍.
朝阳县15367285310： PCR的原理是什么 - ？
鄞悦康赛：[答案] 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至...
朝阳县15367285310： 数字PCR的原理? - ？
鄞悦康赛： 数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性). 单个分子可以被扩增一百万倍或更多. 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针...
朝阳县15367285310： PCR的原理是什么? - ？
鄞悦康赛： PCR技术基本原理 PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板...
朝阳县15367285310： 试述PCR扩增的原理和步骤 - ？
鄞悦康赛：[答案] PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物. PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与...
朝阳县15367285310： PCR扩增技术获取目的基因的原理是? - ？
鄞悦康赛：[答案] PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PC...
朝阳县15367285310： pcr的工作原理是什么啊,能不能通俗说说,网上的看不懂... - ？
鄞悦康赛： PCR技术的基本原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应.DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链.在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此为起始点,沿模板5´→3´方向延伸,合成一条新的DNA互补链.
朝阳县15367285310： PCR原理是什么? - ？
鄞悦康赛： DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径.双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝.在 聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生...
朝阳县15367285310： 实时荧光定量PCR技术原理是什么? - ？
鄞悦康赛：[答案] 聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 .在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 .无论定性还是定量分析,分析的...
