多酚氧化酶活性测定

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测定多酚氧化酶活性的方法主要有两种,分别是检压法和分光光度法。检压法是基于多酚氧化酶(PPO)的特性,它能催化儿茶素等底物在有氧条件下进行氧化还原反应。依据底物氧化速率与酶浓度和时间的关系,瓦氏呼吸仪通过测量反应过程中耗氧量来估算PPO活性,尽管设备简单,但操作过程复杂,且存在一定的误差。


另一种方法是分光光度法,这种方法利用PPO催化邻苯二酚和D-儿茶素反应生成有色产物,这种产物在460纳米处具有最大的吸收值。吸收值的变化与单位时间内酶的活性成正比,因此可以通过计算得出PPO的活性强度。此方法操作简便,具有较好的重现性,是检压法的一种变种,氧电极法也是利用类似原理,应用广泛。


总的来说,这两种方法各有优缺点,检压法虽然设备简单,但操作复杂,精度较低;而分光光度法则操作简便,结果准确,是测定多酚氧化酶活性的常用手段之一。氧电极法作为其相关技术,也被广泛应用于实际研究中。


扩展资料

生物化学与分子生物学名词,编号:EC 1.10.3.1。一类含铜的氧化还原酶,催化邻-苯二酚氧化成邻-苯二醌,也能作用于单酚单加氧酶的底物。




采用比色法测定多酚氧化酶活力的具体步骤有哪些?
这个不需要什么的吧,只需要准备好比对试纸,滴管和需要比对的溶液就可以了,然后用滴管吸取需要比对的溶液,滴到试纸上,然后看试纸变化和标准进行比对

多酚氧化酶活性测定磷酸缓冲液的作用
可以减少ph值变化对多酚氧化酶活性的影响,让ph值保持在合适的水平,提高实验结果的准确性。磷酸盐缓冲液的作用是一种能够抵抗外界少量的酸和碱的添加,但仍然能保持基本不变的pH值的溶液,其抗pH值变化的作用叫做缓冲作用。调整缓冲剂的配比,可得到不同pH值的缓冲液。

酶活力的测定方法及原理
反应从加入过氧化氢开始计时,连续测定在240 nm吸光度的降低值。酶活性定义为:一个过氧化氢酶单位相当于在规定条件下于温度25℃,pH7.0条件下1分钟分解1μmol过氧化氢所需酶量,结果以U\/mg蛋白或U\/g鲜重表示。3. 多酚氧化酶(Polyphenoloxidase,PPO)活性的测定 PPO活性测定采用邻苯二酚法(Aquino...

用碘量滴定法测土壤多酚氧化酶的对照加土吗
加。土壤中含有一些其他的酶或化合物,这些物质会对实验结果产生干扰,加入土壤作为空白对照,可以消除这些干扰因素的影响,从而更准确地测定土壤多酚氧化酶的活性,同时加入土壤作为对照组也可以帮助确定实验中多酚氧化酶活性的参考范围,如果对照组和实验组的多酚氧化酶活性差异较大,那么就需要重新评估实验的...

多酚氧化酶邻苯三酚比色法(追加)
实验二十六 植物体内多酚氧化酶活性的测定 一、目的 通过实验,掌握植物体内多酚氧化酶活性的测定方法。二、原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:多酚氧化酶 ...

关于土壤酶——多酚氧化酶活性测定的几个问题
pH = pKa2 + Log[摩尔(Na2HCit)\/摩尔(NaH2Cit)]4.5= 4。76 + Log[摩尔(Na2HCit)\/摩尔(NaH2Cit)]那么,(1)[摩尔(NaH2Cit)\/摩尔(Na2HCit)]=10^0.26 又,(2)摩尔(Na2HCit)\/摩尔(NaH2Cit)= 1 x 0.05 = 0.05 摩尔 解联立方程组(1)和(2)可求出所需的:摩尔(Na2HCit)\/...

ppo酶活性高说明什么
普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中,甚至在土壤中腐烂的植物残渣上都可以检测到多酚氧化酶的活性。由于其检测方便,是被最早研究的几类酶之一。多酚氧化酶是一种蛋白体,在茶树生命活动和茶叶加工过程中参与一系列由酶促活动而引起的化学变化,故又被称为生物催化剂。

果蔬中PPO多酚氧化酶酶活的测定方法
薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法鉴定

紫色没食子素
没食子素就是邻苯三酚!实验室有的,紫色没食子素就是多酚氧化酶催化氯化没食子素生成的东西。我把步骤给你,但是很简单,因为是在论文上的,具体的我都扔了。。土壤多酚氧化酶活性的测定主要催化氯化邻苯三酚生成紫色没食子素。取约1g土壤,置于50ML磨口三脚瓶中,注入10ML1%邻苯三酚溶液,30℃...

多酚氧化酶提取实验中缓冲液中加入抗血酸的作用是什么
测定抗坏血酸氧化酶的活性。多酚氧化酶提取实验中缓冲液中加入抗血酸的作用是可以测定抗坏血酸氧化酶的活性,氧化为脱氢抗坏血酸。多酚氧化酶是一类含铜的氧化还原酶,遇到空气中的氧气后,活性会增强。

隆化县15261103771: sod酶活性测定方法 -
芒吴复方: 1、测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法.其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力. 2、在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧...

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芒吴复方: 实验二十六 植物体内多酚氧化酶活性的测定 一、目的 通过实验,掌握植物体内多酚氧化酶活性的测定方法.二、原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌.用分光光度法在525nm波长下测其吸光...

隆化县15261103771: 测定多酚氧化酶除了用分光光度法外,还有其他什么测定方法 -
芒吴复方: 放射性自显影技术,酶标法,免疫荧光

隆化县15261103771: 多酚氧化酶活性的计算和表示方法 -
芒吴复方: 常用检压法和分光光度法.前者应用多酚氧化酶(PPO)可催化儿茶素等底物在有氧条件下的氧化还原反应,根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比这一原理,用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法设备简便,但操作复杂,误差较大.后者利用邻苯二酚和D-儿茶素在PPO催化下生成有色产物.其显色物质在460纳米处有最大吸收,吸收值在单位时间内的变化和单位酶活性成正比,计算PPO活性强度.操作方法简便,重现性好.与检压法原理相似的方法有氧电极法,应用也较多.

隆化县15261103771: 多酚氧化酶测活时能用间苯二酚来代替邻苯二酚吗 -
芒吴复方: 不能底物 浓度 吸收峰波长/nm 间苯二酚M-diphenol 0.04 - 邻苯二酚O-diphenol 0.04 396

隆化县15261103771: 采用什么方法可以定量测定酶活性 -
芒吴复方: 酶活性测定的原理: 超氧物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD) 活性的测定 SOD采用氮蓝四唑(nitro-blue tetrazolium,NBT)法(Beauchamp和Fridovich,1971).反应步骤为:取200μl粗提液,加入3.7 ml NBT反应液50mmol/LpH7.8的磷酸缓...

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芒吴复方: 薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法鉴定

隆化县15261103771: 紫色没食子素 -
芒吴复方: 确实不能凭空设计,我之前也这样找的,很漫长,因为是在论文上的,具体的我都扔了.,置于50ML磨口三脚瓶中,注入10ML1%邻苯三酚溶液. 土壤多酚氧化酶活性的测定主要催化氯化邻苯三酚生成紫色没食子素.取约1g土壤!实验室有的...

隆化县15261103771: 土壤酶(过氧化物酶和多酚氧化酶)活性的测定方法, -
芒吴复方: 土壤酶的测定是套成熟的古老方法,目前所用均为原方法的修改.具体可参考《土壤酶及其研究法 》[专著] / 关松荫编著 北京 : 农业出版社, 1986

隆化县15261103771: 测定植物中多酚氧化酶的意义是什么?谢谢 -
芒吴复方: 应该是利用测出来的酶活来为食品加工保鲜抗氧化做贡献吧

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