常用的荧光素主要有哪些

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免疫荧光的常见荧光~

1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:紫红色粉末,吸收550nm,发射光620nm,橙红色荧光。4)镧系:Eu、Tb5)PE:吸收光490~560nm,发射光595nm,红色荧光。6)其它:酶作用后产生荧光物质。 酶 底物 产物 激发光 发射光Β-G MUG MU 360 450AP MUP MU 360 450HRP HPA 二聚体 317 414⑷合适荧光素的选择1)具有与蛋白质形成共价键的化学基团。荧光素-N=C +NH-蛋白质 荧光素-N-C-N-蛋白质‖ ︱  ︱‖ ︱S H H SH2)荧光效率高,标记后下降不明显。3)荧光色泽与背景色泽对比鲜明。4)标记后能保持生物学活性和免疫活性5)标记方法简单、快速。6)安全无毒

(一)荧光色素   许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有:  
 1.异硫氰酸荧光素
2.四乙基罗丹明  
3.四甲基异硫氰酸罗丹明
 4.藻红蛋白
(二)其他荧光物质   
1.酶作用后产生荧光的物质:某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质.例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷,受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm.其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等.

目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种:异硫氰酸荧光素,四乙基罗丹明,四甲基异硫氰酸罗丹明,酶作用后产生荧光的物质。

荧光素是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多。

荧光素也就是fda。fda可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较bcecf或calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。fda也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。

扩展资料:

间苯二酚加热至150℃,使之全部熔融,边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐,混匀并熔融后升温至185℃,保温半小时,然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌,当完全溶解后,逐渐升温至210~215℃。

整个过程均需不停地搅拌,当反应液开始变稠时,停止搅拌,继续在此温度下加热至完全固化,研碎后得粉状粗品。将粉状粗品与稀盐酸混合加热煮沸,以浸出氯化锌和剩余的间苯二酚,抽滤后水洗、干燥,再用乙醇提取,晾干后即得红色固体荧光素。



荧光素也就是fda
fda可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较bcecf或calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。fda也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488
nm和530
nm。
荧光素酶(英文名称:luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为photinus
pyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(atp)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常常可以进一步加速反应(与肌肉收缩的情况相似)。[1]荧光生成反应通常分为以下两步:
萤光素
+
atp

萤光素化腺苷酸(luciferyl
adenylate)
+
ppi
萤光素化腺苷酸
+
o2

氧荧光素
+
amp
+

这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有越10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。
荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。最为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,omphalotus
olearius)或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominal
trachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的荧光素酶,能够催化同一荧光素底物,而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得最透彻的荧光素酶是来自photinini族萤火虫中的北美萤火虫(photinus
pyralis)。

常用的荧光素主要有哪些
荧光素是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多。目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种:异硫氰酸荧光素,四乙基罗丹明,四甲基异硫氰酸罗丹明,酶作用后产生荧光的物质。


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元秒肾上: 用于标记的荧光素应符合以下要求: 1.应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,结合后不易解离,而未结合者易清除; 2.荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率; 3.荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明; 4.与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质; 5.标记方法简单、安全无毒;

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