单克隆抗体植入小鼠腹腔和体外培养哪种方法好?

作者&投稿:赖素 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
单克隆抗体植入小鼠腹腔和体外培养哪种方法好?~

1、单抗的大规模制备
目前大量制备单抗的方法主要有两大系统,一是动物体内生产法,这是国内外实验室所广泛采用;另一是体外培养法。
(1) 动物体内生产单抗的方法
迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然首选BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而最好用SPF级小鼠。
(2) 体外培养生产单抗的方法
总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室最常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模生产。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。


单克隆抗体制备有两种方法。

第一种方法是:增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。

第二种也是最普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法。选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射,一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去。通常在接种一周后即有明显的腹水产生,每只小鼠可收集5~10ml的腹水,有时甚至超过40ml。该法制备的腹水抗体含量高,每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平。此外,腹水中的杂蛋白也较少,便于抗体的纯化。接种细胞的数量应适当,一般为500000/鼠,可根据腹水生长情况适当增减。

1、单抗的大规模制备 目前大量制备单抗的方法主要有两大系统,一是动物体内生产法,这是国内外实验室所广泛采用;另一是体外培养法。 (1)动物体内生产单抗的方法 迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然首选BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而最好用SPF级小鼠。 (2)体外培养生产单抗的方法 总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchoragedependentcell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室最常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模生产。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。


制备单克隆抗体时注入小鼠腹腔比用培养液培养有何优点
第一种方法是:增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。第二种也是最普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法。选用BALB\/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射,一周后将杂交瘤细胞接种...

单克隆抗体植入小鼠腹腔和体外培养哪种方法好?
本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而最好用SPF级小鼠。(2) 体外培养生...

在单克隆抗体操作中将专一抗体注射到小鼠腹腔内增值是什么回事_百度知 ...
应该是把杂交瘤细胞注入小鼠腹腔 腹腔有适宜的温度PH等环境 很利于杂交瘤细胞的增殖 这样就免去了人工制作培养基 这里一定不是注射专一抗体的 专一抗体是蛋白质 蛋白质在腹腔中不能自己合成的 希望对你有帮助满意谢谢采纳

单抗制品单克隆抗体制备方法
首先,增量培养法是通过体外培养杂交瘤细胞实现。在这个过程中,关键步骤是在特定的无血清培养基中进行,以优化单克隆抗体的浓缩和纯化过程。这种技术需要专业的仪器设备支持。其次,最常用的制备方法是小鼠腹腔接种法。通常选用BALB\/c小鼠或者其亲代,首先通过降植烷或液体石蜡在小鼠腹腔内注射杂交瘤细胞。接...

小鼠腹水单克隆抗体制备原理
又有使恶性肿瘤细胞迅速无限制繁殖特性的B淋巴细胞杂交瘤,经筛选后克隆化,然后进行大量培养或接种到同系小鼠腹腔内,培养液、腹水或血清中就会产生大量高度的特异性抗体,这就是小鼠单克隆抗体。根据其原理,也可以生产人源单克隆抗体、大鼠单克隆抗体、人一小鼠单克隆抗体等。

单克隆抗体技术的原理、基本过程、意义及应用。
④将选择细胞进行规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖(活体培养基);⑤从细胞培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。单克隆抗体技术的重大意义在于可以用不纯的抗原分子制备特异性强、纯度高、均一性好的单克隆抗体。单克隆抗体的应用:①医学诊断;②抗原蛋白的提纯;③肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术。

制取单克隆抗体时为什么要分别在体内和体外培养杂交瘤细胞? 为什么不...
杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。体内培养,腹水中抗体含量浓度高,产量大,可持续抽取,不需要培养基等成本,不需要重复无菌操作,快速简便。体外培养,需要一整套组织培养技术条件,培养液中抗体含量不如腹水高,需要培养基等成本...

小鼠腹水是什么
在大量制备单克隆抗体中,将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔让其大量生产单克隆抗体。总而言之就是比较粗的单克隆抗体

动物福利的3R理论——关于实验动物的福利
比如生物研究领域制备单克隆抗体,就要把一种细胞打到小鼠腹腔里,过一段时间,让小鼠产生腹水。这时候把腹水抽出来,腹水中就有单克隆抗体,如此反复。现在人们已研制出了一种体外方法,减少了小鼠的使用量。“替代”就是用体外方法或没有感觉的生物学材料替代活体动物。前者是用非生命的体外实验代替活体...

简述单克隆抗体的制备过程
5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!

祥云县13766182978: 单克隆抗体植入小鼠腹腔和体外培养哪种方法好? -
恭刚兰迪: 1、单抗的大规模制备 目前大量制备单抗的方法主要有两大系统,一是动物体内生产法,这是国内外实验室所广泛采用;另一是体外培养法.(1) 动物体内生产单抗的方法 迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法,鉴于绝大多数动...

祥云县13766182978: 单克隆抗体时体内培养与体外培养各自的优缺点 -
恭刚兰迪:[答案] (1) 动物体内生产单抗的方法 迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法. 优点:该法操作简便、经济. 缺点:腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而最好用...

祥云县13766182978: 单克隆抗体体内比体外培养有什么优点呀是在小鼠的体内培养呀,这样比体外培养有什么优点呀 -
恭刚兰迪:[答案] 纯度高,无须提纯

祥云县13766182978: 单克隆抗体时体内培养与体外培养各自的优缺点 -
恭刚兰迪: (1) 动物体内生产单抗的方法迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法.优点:该法操作简便、经济.缺点:腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而最好用SPF级小鼠.(2) 体外培养生产单抗的方法优点:单克隆抗体的浓缩和纯化比较方便.缺点:需要特殊设备.而且这种方法制备的单抗量极为有限,不适用于单抗的大规模生产.要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养.单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大.

祥云县13766182978: 关于单克隆抗体的两种培养方式 -
恭刚兰迪: 因为活的小老鼠有免疫排斥反应,所以,让杂交瘤细胞在老鼠体内存活并增殖,很难. 但是,一旦成功,就直接抽取腹水 ,提取单克隆抗体,这样,算是比较容易. 体外培养,不设计免疫排斥反应问题,只需要把杂交瘤细胞所需的营养和外界条件设置好,就可以实现增殖了.相对比较容易. 但是因为培养时 所用培养基中加入了各种营养物质 还有细胞代谢产物 还有缓冲物质等等 所以分离提纯很困难.

祥云县13766182978: 大规模生产单克隆抗体用体内诱生法还是体外培养法 -
恭刚兰迪: 大量生产单克隆抗体的方法主要有两种: (1)体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞,从一清液中获取单克隆抗体.但此方法产量低,一般培养液内抗体含量为10~60μg/ml,如果大量生产,费用较高.(2)体内接种杂交瘤细胞,制备腹水或...

祥云县13766182978: 简述人工制备单克隆抗体的方法? -
恭刚兰迪: 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...

祥云县13766182978: 单克隆抗体体外培养有什么好处(比体内好) -
恭刚兰迪: 1.方便人为干预 2.方便分离提纯 3.成本相对较低 4.可以进行有效的控制 5.对实验体无危害

祥云县13766182978: 单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义? -
恭刚兰迪: 哈哈~我们刚考到这题 原理: B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力.B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的.将这种B细胞与...

祥云县13766182978: 制备单克隆抗体的技术流程是怎样的呢?
恭刚兰迪: (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原.如为细胞抗原,可取1*107个细胞作腹腔免疫.可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经...

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