琼脂糖凝胶电泳PCR DNA时 杂出现质 跑在前面的老师说是蛋白 可是Pr会结合EB吗?
由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物 过多。
对策：减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶；减少dNTP的浓度；适当降低Mg2+浓度；增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提高退火温度。
琼脂糖的熔点在62〜65°C之间，融化后在37°C下可维持液态数小时，30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。
扩展资料：
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下，它的结构是稳定的，可以在许多条件下使用（如水，pH4-9范围内的盐溶液）。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。
把琼脂糖，即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂，溶于热水，冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。
参考资料来源：百度百科--琼脂糖凝胶
如果在100 bp附近的带，应该是引物二聚体。
在加样孔那里跑不下去的应该是蛋白无误了。
蛋白质内的各种成分跟化学键都很复杂，能结合EB又有什么难以理解的吗？
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
对策：减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶；减少dNTP的浓度；适当降低Mg2+浓度；增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提高退火温度。琼脂糖的熔点在62〜65°C之间，融化后在37°C下可维持液态数小时，30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 ...
pcr扩增产物的凝胶电泳图怎么分析
通过凝胶成像系统拍摄图片，注意调整对比度。如果是写报告的话，可以标记出marker各条带的分子量以及亮度，详见说明书；然后说明扩增片段与目的片段大小相同，均为xx；如果图像上有杂带可以分析一下，比如可能是引物二聚体之类的情况，以便下次实验可以酌量调整退火温度或者各成分的用量。
琼脂糖凝胶电泳图怎么分析?
每一步提取DNA或RNA后，电泳图的呈现就是初步验证成果的窗口。而且，它在PCR反应的优化、质粒操作、转化验证以及目标片段回收等各个环节中，都扮演着不可或缺的角色。当你面对一张琼脂糖凝胶电泳图时，如同解读一部微观世界的电影，每一条条带都蕴含着丰富信息。首先，通过对比标准样品，你可以确定未知...
用琼脂糖凝胶电泳分析核酸(DNA和RNA)有哪些影响因素?
琼脂糖主要从海洋植物琼脂中提取而来并经糖基化修饰，为一种聚合链线性分子，使用琼脂糖凝胶作为电泳支持介质，发挥分子筛功能，使得大小和构象不同的核酸分子的迁移率出现较大差异，从而达到分离的目的。琼脂糖凝胶电泳操作简单、快速，通过调整其使用浓度，使得分辨率达到大多数实验的要求，因此成为分离、鉴...
琼脂糖凝胶电泳如何判别是阳性克隆?
1、琼脂糖凝胶电泳判别是阳性克隆琼脂糖凝胶电泳判别是阳性克隆根据重组子遗传重组表型改变的筛选法：利用抗生素抗性基因进行筛选，利用报告基因筛选克隆子，据重组子结构特征的筛选法，琼脂糖凝胶电泳比较重组DNA的大小。2、限制性内切酶分析。印迹杂交方法。PCR法。
琼脂糖凝胶电泳中,什么情况需加阳性和\/或阴性对照,
比如PCR产物检测，有可能PCR过程有污染，就需要增加一个阴性对照，即没有模板的PCR体系。也有可能PCR体系本身比如试剂有问题，就需要增加一个阳性对照，即确认过正常的模板进行的PCR。
DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾是什么原因?
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑：1、PCR产物自身原因：往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.对策：①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度....
琼脂糖凝胶电泳之前一定要进行DNA扩增吗?
看你需要看什么东西了，比如你抽提整个基因组，而不是某一个基因的话，在进行琼脂糖点电泳是则不需要进行DNA扩增，此时看到的条带则是整个基因组的条带，而如果你需要对某一个基因研究，PCR是必须的，让你可以分离出这样一种目的基因。
琼脂糖凝胶电泳实验失败原因??
ELECTROPHORESIS的可能问题有， 1. ELECTROPHORESIS BUFFER浓度问题，2. BUFFER太陈旧了从而失效 3. 跑过了（根据SIZE来看）2. 如果证明是DNA复制也就是PCR的问题， 可能性就太多了。具体包括你所使用的PCR BUFFER： 浓度问题（需要1X）， 盐析问题（有时候放置太久其中的SALT会析出， 溶解不透彻就会...
你想知道的琼脂糖凝胶电泳
注：PCR产物跑完胶结束后可放到4℃冰箱 备注：1、凝胶厚度和孔径大小 一般而言， 较厚的凝胶 运行过程中产生热量也较多，可导致条带扩散。 由于凝胶染色的高背景或凝胶染色和\/或脱色所需时长(如进行 电泳后染色 )，可能会出现可视化不佳的情况。 对于 琼脂糖 凝胶，厚度以3 - 4 mm为佳，不推荐...
笪维抗骨： 你是说在加样孔那的,还是最前面的?最好有张图看看. 如果在100 bp附近的带,应该是引物二聚体. 在加样孔那里跑不下去的应该是蛋白无误了. 蛋白质内的各种成分跟化学键都很复杂,能结合EB又有什么难以理解的吗?
会东县15299291351： 琼脂糖凝胶回收后DNA位置变了的原因 - ？
笪维抗骨： pcr产物经琼脂糖凝胶电泳纯化回收后,纯化产物再次跑电泳,有时会出现电泳位置在marker上的变化. 1.可能是marker的问题,有时候marker就是不太准. 2.pcr产物在琼脂糖电泳时,看上去是单一的条带,有时候其实是混杂的条带,所有切胶回收再跑电泳,有时候会出现杂带. 另外,由于pcr产物带较宽,纯化后的产物带较窄.如果出现偏差较大的,可能是扩增产物的错误,或者重新电泳.
会东县15299291351： 琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾 - ？
笪维抗骨： 电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑: 1、PCR产物自身原因: 往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过...
会东县15299291351： 用琼脂糖凝胶电泳怎么检测DNA质量 什么是标准 - ？
笪维抗骨： DNA如果降解或者混有其他杂质比如蛋白质、RNA的话,在电泳中可以检测的到. 线性的单一DNA样品一般是单条带,质粒的话可能会有2-3条带. 如果条带变宽、变暗、或者变成弥散的DNA条带,表示DNA非特异的降解.' 如果条带变成多条,表示可能被酶切.如果质粒被单酶切,可能变成一条亮带. 如果有蛋白质污染,上样孔可能发亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分会有弥散. 等等. 标准是电泳条带亮度.通过亮度可以粗略计算DNA条带的含量.如果DNA有损失,对应的条带会变暗或者消失
会东县15299291351： DNA的琼脂糖凝胶电泳的应用和发展举例.要详细一点的.谢谢了.很急啊! - ？
笪维抗骨： 应用: 1、DNA的制备. ⑴ 适合分离大片段DNA. 琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广,尤其适于分离大片段DNA.普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb,利用脉冲...
会东县15299291351： 在PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳实验中,如何知道所观察的样品在电泳过程中的大概位置 - ？
笪维抗骨： 看溴酚蓝作为指示,溴酚蓝大概跟250bp的条带位置差不多,如果你的条带长度短于250bp,那么溴酚蓝跑到胶的一半长度就可以拍照了;如果你的条带长度大于250bp,那么溴酚蓝跑到胶的三分之二或者四分之三位置就可以拍照了.主要看你经验,多跑几次就有感觉了.
会东县15299291351： 如何通过琼脂糖凝胶检测DNA(电泳的原理及影响因素)? - ？
笪维抗骨： 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法.其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用.琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力.DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,因此在电场中向正极移动. 影响因素的话,DNA的长度,结构,胶的浓度,电压等会对电泳造成影响.
会东县15299291351： 简明扼要讲一下Southern blotting,PCR,原位杂交 - ？
笪维抗骨： Southern blotting:印迹(Blotting)通常是指通过吸附或电泳方法将经凝胶电泳分离的大分子物质从胶上转移到固相载体上,再与特定的探针反应从而达到检测或鉴定这些大分子物质的过程.Southern于1975年首先建立从琼脂糖凝胶电泳中分离...
会东县15299291351： PCR产物电泳时减少杂带的方法 - ？
笪维抗骨： PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使用胶回收试剂盒.
会东县15299291351： 琼脂糖凝胶电泳实验失败原因?? - ？
笪维抗骨： 可能性太多了. 1. 你跑胶一般都要放MARKER或者叫DNA LADDER吧,这个MARKER除外对DNA标记大小以外, 还可以用来监控ELECTROPHORESIS的质量, 如果MARKER显示而DNA没显示, 说明ELECTROPHORESIS正常而DNA有问...
