cDNA方面的一些疑问

作者&投稿:索亨 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
基因工程中的一些问题~

1.基因组文库中获取的目的基因是这种生物的所有基因,包含启动子,终止子以及内含子。cDNA文库获取的目的基因是mRNA反转录来的,是这种生物的部分基因,不含启动子,终止子以及内含子。2.目的基因导入过程中要大量实验,需要较多的目的基因,因此用PCR技术可以短期大量扩增目的基因,也是获得大量实验材料的途径。3.cDNA文库获取的目的基因不含内含子,原核细胞也可以表达。若有内含子,原核细胞是不能识别的。4.生物基因正是经限制酶切割后,导入受体菌的群体中储存才形成基因文库的。根据受体菌表现出的性状筛选出所需要的基因,用PCR大量扩增得到大量目的基因。

gfhgfhgfhghf

  没有区别。从同一段cDNA扩增得到的DNA片段既可以克隆入原核载体,在原核细胞中表达,也可以克隆入真核载体,在真核中表达。不过,为了提高在真核细胞中的表达效率,可以在紧邻起始密码子前面加一个六个碱基的kozak序列(通常使用GCCACCATG,ATG就是起始密码子)。如果表达效率还是不能满足要求,可以考虑把密码子进行优化。不过这个一般用不着,仅供学习吧。

  密码子优化。
  遗传密码有64种,但是绝大多数生物倾向于利用这些密码子中的一部分。那些被最频繁利用的称为最佳密码子(optimal codons),那些不被经常利用的称为稀有或利用率低的密码子(rare or low-usage codons)。实际上用做蛋白表达或生产的每种生物(包括大肠杆菌,酵母,哺乳动物细胞,Pichia,植物细胞和昆虫细胞)都表现出某种程度的密码子利用的差异或偏爱。大肠杆菌、酵母、果蝇、灵长类等每种生物都有独特的8个密码子极少被利用[1]。有趣的是,灵长类和酵母有6个同样的利用率低的密码子。大肠杆菌、酵母和果蝇中编码丰度高的蛋白质的基因明显避免低利用率的密码子。因此,重组蛋白的表达可能受密码子利用的影响(尤其在异源表达系统中)的事实并不很奇怪。你的基因利用的密码子可能不是你正在利用的蛋白生产系统进行高水平表达所偏爱的密码子,这种情况是可能的。利用偏爱密码子(preferredcodons)并避免利用率低的或稀有的密码子可以合成基因,基因的这种重新设计叫密码子优化。
  这是一个在线的密码优化网站,不过你要仔细阅读说明。http://genomes.urv.cat/OPTIMIZER/


有关dna的几个疑问?
1、DNA是双螺旋结构,RNA是单链结构 2、DNA的基本单位为脱氧核糖核酸,RNA的基本单位为核糖核酸 3、DNA只有酸解离,RNA具有两性解离 4、DNA的主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令,是建构细胞内其他的化合物,如蛋白质与RNA所需。5、DNA是一种长链聚合物,组成单...

关于DNA,几个小疑惑!生物高手快来,快来快来快来!
有的细胞可以在生物体死亡后存活较长时间,腐烂的也可以,只要细胞结构还没有被破坏就行,木乃伊因为经过了化学防腐处理细胞的活性早已经消失了,所以不能提取出来;化石一般情况下是不能提取的,但是在琥珀中确实能保存DNA片段,不过因为保存得很不完整所以没有太多利用价值。

有关dna的一些疑问
一条染色体是由一条DNA结合一些组蛋白以后形成的。细胞周期包括细胞分裂间期和细胞分裂期。在分裂,是看不到染色体的,这个阶段应该叫做染色质。在分裂期的时候,染色质不断折叠,让我们可以借助显微镜看到它们,这个时候叫做染色体。打个比方,你用一根绳,顺一个方向不断拧,先是拧紧了,然后会折叠起来...

关于DNA的问题
1.是,包括皮肤。一般来说,每个细胞内有23对染色体。每个染色体里有一个DNA分子 2.可以,利用克隆技术 3.除非改变DNA数量而非序列,否则不行

《嫌疑犯x的献身》的关于尸体DNA比对的疑问
因为当时在现场是从自行车和宾馆里面推测出死者是富樫慎二的,死者的指纹和牙齿的痕迹都被毁了,没有办法确定,所以才从侧面推出的

DNA与破案的问题
DNA指纹鉴定 DNA是脱氧核糖核酸的学术名词缩写。DNA看起来象一条不断盘旋的阶梯,并有30亿个梯级附在其上。梯级是由单一的,化学上称为:鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和腺嘌呤,的自然基团构成。这些化合物在DNA上的排列次序,在每一个独立的人体中是唯一的,这使得DNA在辨别个人方面,成为非常有效的工具...

DNA和指纹破案的疑问
让其与接触所留在物品表面的无机盐反应形成指纹像的 至于血迹,这倒是个问题,长期积留得血液有时也会影响个案现场,但是技侦部门会通过一定的实验会知道血迹的种类,形成的时间和具体成分,当然,时间太长了血液就不能称其为血液了,也说不上干扰破案了,这当中的具体理论抱歉不是专业,说不清楚 ...

关于DNA上的基因问题
第一个,我想你说的大概是非编码区存在的意义,所谓存在即合理,别忘了顺式作用因子通常就是在非编码区的,它们可以调控基因表达的活性。在发生突变或者遗传的情况下,不表达的基因是有可能表达的,这是生物进化的基础。第二个,可以反映,这不需要用很学术的语言来解释,基因表达调控的意义之一就是适应...

浅谈DNA与食物
如果这个DNA中有明显弱点,很多病症有遗传概率,比如糖尿病的遗传或者是乳腺方面的遗传,概率较高。我们会针对这个遗传情况,避免这个病症在未发病的后代身上引发。这样的话,我们就会开出一些养生食谱,制订作息运动表,长期控制客户身体的各项指标,包括心理疏导。 最主要且长期的方式是食养,用食物来控制体内DNA弱点的引爆,...

有几个疑惑点,大家帮忙解决一下
真核细胞DNA含量远远大于原核细胞,充分的遗传物质使它形成一些特殊的基因结构,如重复序列、内含子、假基因等。其中内含子是基因中不编码蛋白质的序列与外显子相间形成结构基因,正是因为它的存在,真核细胞的基因在表达过程中,出现转录后对mRNA进行加工的过程,即将基因中内含子所转录的RNA片段剪切掉...

府谷县13869642008: pcr,cDNA引物的问题 -
路庆施沛: 同学,从你问问题的情况我猜想你可能有些基本问题很含糊. 我试着分析一下.1.首先PCR是体外大量扩增目的DNA的技术. 你问模板DNA是什么,这是不需要问的,你想扩增的目的基因是什么什么就是模板.你用cDNA来做PCR模板当然是...

府谷县13869642008: q - pcr,关于cDNA加的多少量的问题 -
路庆施沛: 这个没有明确的规定,一般用的最多的是1-100ng/ul(工作浓度).浓度太低和太好都会影响扩增效率,但并不是绝对的.因为有一些基因表达水平极低,有一些在特殊情况下又极高.qPCR很多时候仅仅反映的是几个样品之间的趋势,而不是绝对值.

府谷县13869642008: 基因工程中的一些问题
路庆施沛: 1.基因组文库中获取的目的基因是这种生物的所有基因,包含启动子,终止子以及内含子.cDNA文库获取的目的基因是mRNA反转录来的,是这种生物的部分基因,不含启动子,终止子以及内含子. 2.目的基因导入过程中要大量实验,需要较多的目的基因,因此用PCR技术可以短期大量扩增目的基因,也是获得大量实验材料的途径. 3.cDNA文库获取的目的基因不含内含子,原核细胞也可以表达.若有内含子,原核细胞是不能识别的. 4.生物基因正是经限制酶切割后,导入受体菌的群体中储存才形成基因文库的.根据受体菌表现出的性状筛选出所需要的基因,用PCR大量扩增得到大量目的基因.

府谷县13869642008: 关于基因测序的几个问题! -
路庆施沛: 根据一些文献的支持,先片段化,效果较好.因为这样的随机性比先合成要好. 2.加入index只是为了区分每个上机样品,便于分析.对结果没有什么目的和影响 3.如果技术试验流程没有问题的话,有的时候是因为物种本身的特殊性,诸如,杂合度过高,重复序列过高.

府谷县13869642008: Rt - pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带 -
路庆施沛: 没明白…… cDNA作为互补DNA,就是以mRNA为模板通过RT-PCR合成得到的.所以,PCR产物在核酸电泳EB染色之后应该显示cDNA条带才对.你若问什么没得到这样的条带,那么很可能是你引物设计的问题,或者是模板RNA提取的问题,又或者是RT-PCR反应体系与程序的问题…… 可能的话,再补充一次?

府谷县13869642008: 向高手请教几个问题.从肝细胞中分离总RNA,经 - --------获得cDNA,之后经过---------扩增内皮抑素基因. -
路庆施沛: 反转录 PCR cDNA是mRNA的反义互补DNA链,可以替代稳定性不好的RNA作为模版扩增基因.cDNA不是基因

府谷县13869642008: 酵母双杂交的常见问题 -
路庆施沛: 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...

府谷县13869642008: “RT - PCR扩增目的基因cDNA”需要注意的事项有哪些? -
路庆施沛: RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术.首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段.RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平...

府谷县13869642008: 基因工程的一些问题 -
路庆施沛: 就我所知道的说吧,不表达片段不只内含子,还有非编码区的呢?鸟枪法具有盲目性,筛选工程浩大呀... 人工合成的基因大多都以质粒呀,大肠杆菌等为载体,哪来内含子呢?是在它们身上加上我们需要的基因,再导入培养.....就算你拿真核细胞当载体,关内含子啥事呀,它一样能转录翻译,表达出来,我们得到所需性状就够了嘛~

府谷县13869642008: 基因工程问题 -
路庆施沛: 1.大肠杆菌中的目的基因不会跑到人体内.目的基因整合到大肠杆菌质粒后,就直接让它在大肠杆菌体内表达.大肠杆菌生长快,繁殖快,就可以产生大量的胰岛素.然后再从菌体细胞中提取胰岛素就OK了.2.基因工程,又叫遗传工程,或者...

本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网