愈创木酚测过氧化物酶的时候，我的酶液被稀释了10倍，结果如何处理啊？

测木聚糖酶一般把酶液稀释多少倍~

测木聚糖酶把酶液稀释多少倍要看木聚糖酶活性的定义，稀释倍数并不是非常确定的数值

木聚糖酶活力单位U的定义一般是
在40度、pH值为5.0的条件下，1分钟从浓度为5mg/mL的木聚糖溶液中降解释放1umol 还原糖，所需要的酶量为一个酶活力单位U
如果酶活有1000U，那么稀释倍数应该在3000~4000倍左右为佳。主要看OD差值，一般要严格控制在0.4~0.6之间，低于0.4.要适当减小稀释倍数，大于0.6要适当增加稀释倍数。

过氧化物酶活性的测定与计算（比色法）
过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。
一、原理
在有过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，该物质在 470 nm 处有最大吸收，可用分光光度计测量 470 nm 的吸光度变化测定过氧化物酶活性。 二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料：马铃薯块茎。
（二）试剂
1 ． 100 mmol ／ L 磷酸缓冲液 pH7.0 （见附录）。磷酸氢二钠。。。。。磷酸二氢钠。。。。。
2 ．反应混合液： 100 mmol ／ L 磷酸缓冲液（ pH7.0 ） 50 mL 于烧杯中，加入愈创木酚（(邻甲氧基苯酚） 28 μl ，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解，待溶液冷却后，加入 30 % 过氧化氢 19 μl ，混合均匀，保存于冰箱中。
（三）仪器设备
分光光度计，研钵，恒温水浴锅， 100 mL 容量瓶，吸管， 离心机。
三、实验步骤
1 ．称取植物材料1g ，剪碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆，以 4000 r ／ min 离心 10 min ，上清液转入 100 mL 容量瓶中，残渣再用 5 mL 磷酸缓冲液提取一次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，贮于低温下备用。
2 ．取光径 1 cm 比色杯 2 只，于 1 只中加入反应混合液 3 mL 和磷酸缓冲液 1mL ，作为对照，另 1 只中加入反应混合液 3 mL 和上述酶液 1mL （如酶活性过高可稀释之），立即开启秒表记录时间，于分光光度计上测量波长 470 nm 下吸光度值，每隔 1min 读数一次。
四、结果计算
以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小，即以 ΔA 470 /[min · g （鲜重） ] 表示之。也可以用每 min 内 A 470 变化 0.01 为 1 个过氧化物酶活性单位（ u ）表示。 过氧化物酶活性 [u/ （ g · min ） ]=

把pH=7.0和pKa2=7.2代入，得c(H2PO4^-)=1.585*c(HPO4^2-)
磷酸盐浓度为0.01mol/L，就是c(H2PO4^-)+c(HPO4^2-)=0.01 这样可解出缓冲溶液中两种离子的浓度。
c(HPO4^2-) = 0.0039 mol/L; c(H2PO4-) =0.0061 mol/L
计算： n(P) = 0.01*1 =0.01 mol m(NaH2PO4) = 0.01*120 =1.2g NaH2PO4 + NaOH = Na2HPO4 + H2O m(NaOH) = 0.0039*1*40 = 0.156g
称取无水NaH2PO4 1.2克， NaOH 0.156克，加水溶解，再稀释至1 L即可。

[原理]
sod的活力测定方法很多，常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍，化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和o2
-，利用sod分解而间接推算酶活力。在化学方法中，最常用的有黄嘌呤氧化酶法，邻苯三酚法，化学发光法，肾上腺素法，nbt-还原法，光化学扩增法，cyte还原法等。其中改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。化学发光法和光化学扩增法不适用于测定mn-sod，但对于cu/zn-sod反应极灵敏。cyte还原法用于mn-sod活力测定结果稳定，重复性好。但专一性和灵敏度不够理想，而且需要特殊仪器，实际应用受到限制。亚硝酸盐形成法与cn—抑制剂或sds处理相结合，应用于mn-sod测定，灵敏度比cyte还原法提高数倍，而且专一性强，重复性好，操作方便，不需要特殊仪器和设备，易于实际应用和推广，是目前较好的测定方法之一。
在一般情况下，sod酶活性测定只能应用间接活性测定法。本实验采用邻苯三酚自氧化方法。
邻苯三酚在碱性条件下，能迅速自氧化，释放出o2
-，生成带色的中间产物，反应开始后反应液先变成黄棕色，几分钟后转绿，几小时后又转变成黄色，这是因为生成的中间物不断氧化的结果。这里测定的是邻苯三酚自氧化过程中的初始阶段，中间物的积累在滞留30～45s后，与时间成线性关系，一般线性时间维持在4min的范围内，中间物在420nm波长出有强烈光吸收。当有sod存在时，由于它能催化o2
-与h+结合生成o2和h2o2，从而阻止了中间产物的积累，因此，通过计算即可求出sod的酶活性。
酶活力单位定义：在25℃恒温条件下，每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯酚自氧化率达50%的酶量定义为1个酶活力单位。
[试剂和器材]
1、试剂
（1）ph8.2、50mmol/l
tris-hcl
称取tris
0.61g，edta-2na
0.037g，用双蒸水溶解至80ml左右，用hcl调节ph
=8.20（用ph计校正），最后定容至100ml。
（2）10mmol/l
hcl
（3）50
mmol/l邻苯三酚
称取邻苯三酚0.063g，用10mmol/l
hcl溶液溶解，定容至10ml，避光保存。
（4）sod样液
2、器材
（1）恒温水浴槽
（2）紫外分光光度计
（3）试管、刻度吸管、微量注射器
[方法和步骤]
1、邻苯三酚自氧化速率的测定
取两支试管按下表加入25℃预热过的缓冲液,然后加入预热过的邻苯三酚（空白管用10mmol/l
hcl代替邻苯三酚
），迅速摇匀，立即倾入1cm比色杯中，在325nm波长处测定光吸收值，每隔30s读数一次，测定4min内每分钟光吸收值的变化。要求自氧化速率控制在每分钟的光吸收值为0.07（可增减邻苯三酚的加入量，以控制光吸收值）。
试剂
空白管（ml）
自氧化管（ml）
ph8.2、50mmol/l
tris-hcl
2.98
2.98
10mmol/l
hcl
0.02
0.01
50
mmol/l邻苯三酚
-
0.01
2、sod样液的活性测定
样品管取代自氧化管。样品管测定时先加入预热的待测酶液，再加邻苯三酚。其余步骤同邻苯三酚自氧化速率的测定。
试剂
空白管（ml）
样品管（ml）
ph8.2、50mmol/l
tris-hcl
2.98
2.98
10mmol/l
hcl
0.02
-
sod样液
-
0.01
50
mmol/l邻苯三酚
-
0.01
（3）计算

要除以稀释倍数，就是分母乘以稀释倍数

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洞头县18491315542： 愈创木酚测过氧化物酶的时候,我的酶液被稀释了10倍,结果如何处理啊? - ？
昔奇复方： 要除以稀释倍数,就是分母乘以稀释倍数

洞头县18491315542： 分析结果是酶活力还是酶活性?？
昔奇复方： 酶活性 过氧化物酶广泛存在于植物的各个组织器官中.在有过氧化氢存在的条件下,过氧化物酶可以使愈创木酚氧化,产生茶褐色物质,在470nm处有最大吸收峰,可根据单位时间内A470的变化值,计算POD活性大小. 建立了加入过氧化氢后电流变化斜率与酶活之间的线性关系 所以在有效时间内,确实存在一定的正相关

洞头县18491315542： 愈创木酚法测过氧化物酶,是反应时间越长,OD值就越大么 - ？
昔奇复方： 过氧化物酶广泛存在于植物的各个组织器官中.在有过氧化氢存在的条件下,过氧化物酶可以使愈创木酚氧化,产生茶褐色物质,在470nm处有最大吸收峰,可根据单位时间内A470的变化值,计算POD活性大小.所以在有效时间内,确实存在一定的正相关

洞头县18491315542： 过氧化物酶活性的测定就有哪些方法 - ？
昔奇复方： 实验 48 过氧化物酶活性的测定(比色法) 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时...

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洞头县18491315542： 在过氧化氢酶催化下,H2O2分解释放的O2与愈创木酚反应生成茶褐色产物;氧气产生越多,溶液颜色越深.为探究pH对酶活性的影响,某研究小组运用比色... - ？
昔奇复方：[选项] A. 先将过氧化氢酶和反应物分别加缓冲液处理,一段时间后再混合 B. 依据0〜Imin的曲线斜率,可比较不同pH条件下的酶活性 C. pH5〜8缓冲液处理组,反应结束时的产物相对量是不同的 D. 在pH为3的缓冲液中过氧化氧酶因空间结构被破坏而失活

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洞头县18491315542： 怎样测定 植物过氧化物酶活性?请教阿里巴巴故意网高手 - ？
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