色谱法有哪四种常见的方法?色谱法多应用在哪些范畴?
色谱法(层析法)是现代分析化学中重要的分离、分析技术,它是由俄国植物学家茨维特发明的。
茨维特早年曾在日内瓦大学学习物理学、化学,对物质的物理、化学属性有了些了解。回国后,他致力于用物理学、化学的理论和方法研究植物学,强调深入细胞内部研究。比起同行,他的观点富有创意,也正是这种创新精神才导致新方法的发明。
茨维特的研究课题是叶绿体,他认为叶绿体是叶绿素和清蛋白的混合物——叶绿蛋白。它成分复杂,含有不止一种绿色色素。此观点当时不被认同。他力图通过实验证明自己的结论。多次实验后,他发现存在两种叶绿素:叶绿素a和b。叶绿素a当时已经被提纯了,但叶绿素b尚无法制得。为使理论更有说服力,他决心把叶绿素b从溶液中分离出来。经过不断实验和摸索,他发明了极其简单却十分有效的分离仪器:一根玻璃管填充以白垩或氧化铝。不同物质在流动相中有不同吸附系数,含有多种组分的物质通过吸附柱后依次有规律地排列,这样就将物质分离出来且不改变原性状。他把此方法与多色光通过棱镜分色类比,把新方法命名为色谱法。利用色谱法,他顺利分离出了叶绿素b,证实了自己的理论。
科学界对这种简单仪器的可靠性持怀疑态度,认为缺乏理论依据且实验数据不可靠。后来茨维特详细阐述了色谱过程的理论依据,公布了对大量物质吸附特性的研究,还用它分离出类胡萝卜素等重要物质。虽然色谱法已为众人所知,但遗憾的是直至茨维特去世也没得到推广。
经后人努力,色谱技术得到发展,被广泛应用于化学、生物学、医药学、石油化工等领域,在科学和工业的发展中发挥着重要作用。
①的高压力:更大的阻力,流动的液体通过高压迅速通过该柱通过柱的流动相,液体载体。
②高效:分离效率高。选择一个固定相和流动相,以便达到最佳的分离效果,并且是工业精馏塔和气相色谱分离性能高出许多倍。
③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,μL级的注射量。的
④由高性能液相色谱法分析,特别是高沸点的分离和分析,大分子,强极性,热稳定性差的化合物,可用于广泛的应用范围:70%以上的有机化合物的,示出的优点。
⑤分析速度快,载液的流速快:速度更快,更经典的液相色谱通常在15至30分钟的样品分析,部分样品甚至在五分钟内完成,一般不超过1小时。
此外,高效液相层析柱可??反复使用,和样品不被破坏,易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱法相比,有自己的长处和优势互补。的缺点的高性能液相色谱法“列效果。从喷射器到检测器上,在除了比支柱死空间(喷射器,柱接头,连接管和检测器单元等)的任何其他的类型,如果流动相流量的变化在任何要被分离和滞留的物质的扩散会导致扩大的峰,柱效降低显著高性能液相色谱检测器的灵敏度是小于在气相色谱仪中。
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