酶的非水相催化的研究概况

酶在非水相催化中为何需要少量的水~

酶是具有生物活性的蛋白质，要发挥作用有一定条件要求……

人们以往普遍认为只有在水溶液中酶才具有催化活性.
◆酶在非水相介质中催化反应的研究:在理论上进行了非水介质（包括有机溶剂介质,超临界流体介质,气相介质,离子液介质等）中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制,非水介质中酶催化作用动力学等方面的研究,初步建立起非水酶学（non-aqueous enzymology）的理论体系.
◆非水介质中酶催化作用的应用研究,取得显著成果.

人们以往普遍认为只有在水溶液中酶才具有催化活性。
◆酶在非水相介质中催化反应的研究:在理论上进行了非水介质（包括有机溶剂介质，超临界流体介质，气相介质，离子液介质等）中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制，非水介质中酶催化作用动力学等方面的研究，初步建立起非水酶学（non-aqueous enzymology）的理论体系。
◆非水介质中酶催化作用的应用研究，取得显著成果。

1.酶非水相催化的研究概况
◆酶在非水介质中进行的催化作用称为酶的非水相催化。
1.1有机介质中的酶催化：
◆有机介质中的酶催化是指酶在含有一定量水的有机溶剂中进行的催化反应。
◆适用于底物、产物两者或其中之一为疏水性物质的酶催化作用。
◆酶在有机介质中由于能够基本保持其完整的结构和活性中心的空间构象，所以能够发挥其催化功能。
◆酶在有机介质中起催化作用时，酶的底物特异性、立体选择性、区域选择性、键选择性和热稳定性等都有所改变。
1.2气相介质中的酶催化：
◆气相介质中的酶催化是指酶在气相介质中进行的催化反应。
◆适用于底物是气体或者能够转化为气体的物质的酶催化反应。
◆由于气体介质的密度低，扩散容易，所以酶在气相中的催化作用与在水溶液中的催化作用有明显的不同特点。
1.3超临界流体介质中的酶催化：
◆超临界介质中的酶催化是指酶在超临界流体中进行的催化反应。
◆用于酶催化反应的超临界流体应当对酶的结构没有破坏作用，对催化作用没有明显的不良影响；具有良好的化学稳定性，对设备没有腐蚀性；超临界温度不能太高或太低，最好在室温附近或在酶催化的最适温度附近；超临界压力不能太高，可节约压缩动力费用；超临界流体要容易获得，价格要便宜等。
1.4离子液介质中的酶催化：
◆离子液介质中的酶催化是指酶在离子液中进行的催化作用。
◆离子液（ionic liquids）是由有机阳离子与有机（无机）阴离子构成的在室温条件下呈液态的低熔点盐类，挥发性低、稳定性好。酶在离子液中的催化作用具有良好的稳定性和区域选择性、立体选择性、键选择性等显著特点。
◆在酶的非水相催化中，研究最多的非水介质是有机溶剂。
◆酯酶、脂肪酶、蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶等水解酶，过氧化氢酶、过氧化物酶、醇脱氢酶、胆固醇氧化酶、多酚氧化酶、细胞色素氧化酶等氧化还原酶以及醛缩酶等转移酶中的十几种酶都可以在适当的有机溶剂介质中起催化作用。而且酶在有机介质中的热稳定性比水溶液中显著提高。
◆在理论上进行了非水介质（包括有机溶剂介质，超临界流体介质，气相介质，离子液介质等）中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制，非水介质中酶催化作用动力学等方面的研究，初步建立起非水酶学（non-aqueous enzymology）的理论体系。
◆并进行了非水介质中，特别是在有机介质中酶催化作用的应用研究，利用酶在有机介质中的催化作用进行多肽、酯类等的生产，甾体转化，功能高分子的合成，手性药物的拆分等方面均取得显著成果。
2.有机介质中水和有机溶剂对酶催化反应的影响
2.1有机介质反应体系：
◆常见的有机介质反应体系包括：
(1)微水介质（microaqueous media）体系:
◆微水介质体系是由有机溶剂和微量的水组成的反应体系，是在有机介质酶催化中广泛应用的一种反应体系。
◆微量的水主要是酶分子的结合水，它对维持酶分子的空间构象和催化活性至关重要。另外有一部分水分配在有机溶剂中。
◆通常所说的有机介质反应体系主要是指微水介质体系。
(2)与水溶性有机溶剂组成的均一体系：
◆这种均一体系是由水和极性较大的有机溶剂互相混溶组成的反应体系。
◆酶和底物都是以溶解状态存在于均一体系中。由于极性大的有机溶剂对一般酶的催化活性影响较大，所以能在该反应体系的进行催化反应的酶较少。
(3)与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系：
◆这种体系是由水和疏水性较强的有机溶剂组成的两相或多相反应体系。游离酶、亲水性底物或产物溶解于水相，疏水性底物或产物溶解于有机溶剂相。
◆如果采用固定化酶，则以悬浮形式存在两相的界面。
◆催化反应通常在两相的界面进行。一般适用于底物和产物两者或其中一种是属于疏水化合物的催化反应。
(4)（正）胶束体系：
◆胶束又称为正胶束或正胶团，是在大量水溶液中含有少量与水不相混溶的有机溶剂，加入表面活性剂后形成的水包油的微小液滴。
◆表面活性剂的极性端朝外，非极性端朝内，有机溶剂包在液滴内部。
◆反应时，酶在胶束外面的水溶液中，疏水性的底物或产物在胶束内部。反应在胶束的两相界面中进行。
(5)反胶束体系：
◆反胶束又称为反胶团，是指在大量与水不相混溶的有机溶剂中，含有少量的水溶液，加入表面活性剂后形成的油包水的微小液滴。
◆表面活性剂的极性端朝内，非极性端朝外，水溶液包在胶束内部。
◆反应时，酶分子在反胶束内部的水溶液中，疏水性底物或产物在反胶束外部，催化反应在两相的界面中进行。
2.2水对有机介质中酶催化的影响：
(1)水对酶分子空间构象的影响：
◆酶分子需要一层水化层，以维持其完整的空间构象。
◆维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量称为必需水（essential water）。
◆必需水与酶分子的结构和性质有密切关系。不同的酶，所要求的必需水的量差别很大。
(2)水对酶催化反应速度的影响：
◆有机介质中水的含量对酶催化反应速度有显著影响。
◆在催化反应速度达到最大时的水含量称为最适水含量。
◆在实际应用时应当根据实际情况，通过实验确定最适水含量。
(3)水活度：
◆在有机介质中含有的水，主要有两类，一类是与酶分子紧密结合的结合水，另一类是溶解在有机溶剂中的游离水。
◆研究表明，在有机介质体系中，酶的催化活性随着结合水量的增加而提高。
◆水活度（water activity, Aw）是指体系中水的逸度（fugacity）与纯水逸度之比。通常可以用体系中水的蒸汽压与相同条件下纯水的蒸汽压之比表示。即：
Aw = P/P0
式中，P为在一定条件下体系中水的蒸汽压，
Po为在相同条件下纯水的蒸汽压
◆ 研究表明，在一般情况下，最适水含量随着溶剂极性的增加而增加。
◆而最佳水活度与溶剂的极性大小没有关系。所以采用水活度作为参数来研究有机介质中水对酶催化作用的影响更为确切。
2.3有机溶剂对有机介质中酶催化的影响：
◆常用的有机溶剂有辛烷，正己烷，苯，吡啶，季丁醇，丙醇，乙腈，已酯，二氯甲烷等。
(1)有机溶剂对酶结构与功能的影响：
◆酶具有完整的空间结构和活性中心才能发挥其催化功能。
◆在有机溶剂中，酶分子（经过修饰后可溶于有机溶剂者除外）不能直接溶解，而是悬浮在溶剂中进行催化反应。
◆有些酶在有机溶剂的作用下，其空间结构会受到某些破坏，从而使酶的催化活性受到影响甚至引起酶的变性失活。
(2)有机溶剂对酶分子表面结构的影响：
◆酶在有机介质中与有机容剂接触，酶分子的表面结构将有所变化。
(3)有机溶剂对酶活性中心结合位点的影响：
◆当酶悬浮于有机溶剂中，有一部分溶剂能渗入到酶分子的活性中心，与底物竞争活性中心的结合位点，降低底物结合能力，从而影响酶的催化活性。
◆有机溶剂分子进入酶的活性中心，会降低活性中心的极性，可能降低酶与底物的结合能力。
(4)有机溶剂对酶活性的影响：
◆有些有机溶剂，特别是极性较强的有机溶剂，如甲醇，乙醇等，会夺取酶分子的结合水，影响酶分子微环境的水化层，从而降低酶的催化活性,甚至引起酶的变性失活。
◆有机溶剂极性的强弱可以用极性系数lgP表示。P是指溶剂在正辛烷与水两相中的分配系数。极性系数越大，表明其极性越小；反之极性系数越小，则极性越强。
◆研究表明，有机溶剂的极性越强，越容易夺取酶分子结合水，对酶活力的影响就越大。极性系数lg P< 2的极性溶剂一般不适宜作为有机介质酶催化的溶剂使用。
(5)有机溶剂对底物和产物分配的影响：
◆有机溶剂与水之间的极性不同，在反应过程中会影响底物和产物的分配，从而影响酶的催化反应。
◆有机容剂能改变酶分子必需水层中底物和产物的浓度。
◆一般选用2≤lg P≤5的有机溶剂作为有机介质为宜。
3.酶在有机介质中的催化特性
3.1底物专一性：
◆在有机介质中，由于酶分子活性中心的结合部位与底物之间的结合状态发生某些变化，致使酶的底物特异性会发生改变。
◆不同的有机溶剂具有不同的极性，所以在不同的有机介质中，酶的底物专一性也不一样。
◇在极性较强的有机溶剂中，疏水性较强的底物容易反应；而在极性较弱的有机溶剂中，疏水性较弱的底物容易反应。
3.2对映体选择性：
◆酶的对映体选择性（enantioselectivity）又称为立体选择性或立体异构专一性，是酶在对称的外消旋化合物中识别一种异构体的能力大小的指标。
◆酶立体选择性的强弱可以用立体选择系数（KLD）的大小来衡量。立体选择系数越大，表明酶催化的对映体选择性越强。
◆立体选择系数与酶对L-型和D-型两种异构体的酶转换数（Kcat）和米氏常数（Km）有关。即：

( Kcat/Km)L
KLD =
(Kcat/Km)D
式中，KLD ：立体选择系数
L: L-型异构体
D: D-型异构体
Km: 米氏常数。即酶催化反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。
Kcat: 酶的转换数。是酶催化效率的一个指标。指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。
◆酶在有机介质中催化，与在水溶液中催化比较，由于介质的特性发生改变，而引起酶的对映体选择性也发生改变。
◆酶在水溶液中催化的立体选择性较强，而在疏水性强的有机介质中，酶的立体选择性较差。
3.3区域选择性：
◆酶在有机介质中进行催化时，具有区域选择性（regioselectivity）, 即酶能够选择底物分子中某一区域的基团优先进行反应。
◆酶区域选择性的强弱可以用区域选择系数Krs 的大小来衡量。区域选择系数与立体选择系数相似，只是以底物分子的区域位置1，2，代替异构体的构型L,D。即：
K1，2 =(Kcat/Km)1 /(Kcat/Km)2
3.4键选择性：
◆酶在有机介质中进行催化的另一个显著特点是具有化学键选择性。
◆键选择性与酶的来源和有机介质的种类有关。
3.5热稳定性：
◆许多酶在有机介质中的热稳定性比在水溶液中的热稳定性更好。
◆酶在有机介质中的热稳定性还与介质中的水含量有关。通常情况下，随着介质中水含量的增加，其热稳定性降低。
◆在有机介质中，酶的热稳定性之所以增强，可能是由于有机介质中缺少引起酶分子变性失活的水分子所致。
◆某些酶在有机介质与水溶液中的热稳定性如表7-1所示。
表7-1 某些酶在有机介质与水溶液中的热稳定性
酶
介质条件
热稳定性
猪胰脂肪酶
三丁酸甘油酯
水， pH7.0
T1/2 < 26 h
T1/2 < 2 min
酵母脂肪酶
三丁酸甘油酯/庚醇
水，pH7.0
T1/2 =1.5 h
T1/2 < 2 min
脂蛋白脂肪酶
甲苯，90℃，400 h
活力剩余40％
胰凝乳蛋白酶
正辛烷，100℃
水，pH 8.0, 55℃
T1/2 = 80 min
T1/2 = 15 min
枯草杆菌蛋白酶
正辛烷，110℃
T1/2 = 80 min
核糖核酸酶
壬烷，110℃，6 h
水，pH 8.0, 90℃
活力剩余95％
T1/2 < 10 min
酸性磷酸酶
正十六烷，80℃
水，70℃
T1/2 = 8 min
T1/2 = 1 min
腺苷三磷酸酶
( F1-ATPase)
甲苯，70℃
水， 60℃
T1/2 > 24 h
T1/2 < 10 min
限制性核酸内切酶
（Hind Ⅲ）
正庚烷，55℃，30d
活力不降低
β-葡萄糖苷酶
2-丙醇，50℃，30 h
活力剩余80％
溶菌酶
环己烷，110℃
水
T1/2 =140 min
T1/2 = 10 min
酪氨酸酶
氯仿，50℃
水，50℃
T1/2 =90 min
T1/2 =10 min
醇脱氢酶
正庚烷，55℃
T1/2 > 50 d
细胞色素氧化酶
甲苯，0.3％水
甲苯，1.3％水
T1/2 =4.0 h
T1/2 =1.7 min

3.6 pH值特性：
◆在有机介质反应中，酶所处的pH 环境与酶在冻干或吸附到载体上之前所使用的缓冲液 pH 值相同。这种现象称之为pH印记（pH-imprinting）或称为pH记忆。
◆酶在有机介质中催化反应的最适pH值通常与酶在水溶液中反应的最适pH 值接近或者相同。利用酶的这种pH印记特性，可以通过控制缓冲液中pH值的方法，达到控制有机介质中酶催化反应的最适pH值。
4.有机介质中酶催化反应的条件及其控制
◆酶在有机介质中可以催化多种反应，主要包括：合成反应、转移反应、醇解反应、氨解反应、异构反应、氧化还原反应、裂合反应等。
◆酶在有机介质中的各种催化反应受到各种因素的影响：酶的种类和浓度、底物的种类和浓度、有机溶剂的种类，水含量、温度、pH和离子强度等。
4.1有机介质中酶催化反应的类型：
(1)合成反应：
① 脂肪酶或酯酶在有机介质中可以催化有机酸和醇进行酯类的合成反应：
② 蛋白酶可以在有机介质中催化氨基酸进行合成反应，生成各种多肽。
(2)转移反应：
(3)醇解反应：
(4)氨解反应:
(5)异构反应：
(6)氧化还原反应：
(7)裂合反应：
4.2酶的选择：
◆不同的酶具有不同的结构和特性，同一种酶，由于来源的不同和处理方法（如纯度、冻干条件、固定化载体和固定化方法、修饰方法和修饰剂等）的不同，其特性也有所差别，所以要根据需要通过试验进行选择。
◆在酶催化反应时，通常酶所作用的底物浓度远远高于酶浓度，所以酶催化反应速度随着酶浓度的升高而升高，两者成正比。
◆在有机介质中进行催化反应，对酶的选择不但要看催化反应的速度的大小，还要特别注意酶的稳定性、底物专一性、对映体选择性、区域选择性、键选择性等。
4.3底物的选择和浓度控制：
◆由于酶在有机介质中的底物专一性与在水溶液中的专一性有些差别，所以要根据酶在所使用的有机介质中的专一性选择适宜的底物。
◆底物的浓度对酶催化反应速度有显著影响，一般说来，在底物浓度较低的情况下，酶催化反应速度随底物浓度的升高而增大。当底物达到一定浓度以后，再增加底物浓度，反应速度的增大幅度逐渐减少，最后趋于平衡，逐步接近最大反应速度。
4.4有机溶剂的选择：
◆有机溶剂是影响酶在有机介质中催化的关键因素之一，在使用过程中要根据具体情况进行选择。
◆有机溶剂的极性选择要适当，极性过强（lgP < 2）的溶剂，会夺取较多的酶分子表面结合水，影响酶分子的结构，并使疏水性底物的溶解度降低，从而降低酶反应速度，在一般情况下不选用；
◆极性过弱（lgP ≥ 5）的溶剂，虽然对酶分子必需水的夺取较少，疏水性底物在有机溶剂中的溶解度也较高，但是底物难于进入酶分子的必须水层，催化反应速度也不高。
◆通常选用2 ≤ lgP ≤ 5 的溶剂作为催化反应介质。
4.5水含量的控制：
◆有机介质中，水的含量对酶分子的空间构象和酶催化反应速度有显著影响。
◆要通过试验确定反应体系的最适水含量。
◆最适水含量与溶剂的极性有关，通常随溶剂极性的增大，最适水含量也增大；而达到最大反应速度的水活度却变化不大，都在0.5～0.6之间。
◆在实际应用时应当控制反应体系的水活度在0.5～0.6的范围内。
4.6温度控制：
◆温度是影响酶催化作用的主要因素之一。在最适温度下酶催化的反应速度达到最大，这个温度称为。
◆在微水有机介质中，由于水含量低，酶的热稳定性增强，所以其最适温度高于在水溶液中催化的最适温度。
◆要注意的是酶与其它非酶催化剂一样，温度升高时，其立体选择性降低。
4.7 pH值的控制：
◆酶在有机介质中催化的最适pH值通常与在水溶液中催化的最适pH值相同或者接近。
◆在有机介质中，酶的催化活性与酶在缓冲溶液中的pH值和离子强度有密切关系。
◆酶分子从缓冲溶液转到有机介质后，酶分子保留了原有的pH印记。
◆通过调节缓冲溶液pH和离子强度的方法对有机介质中酶催化的pH值和离子强度进行调节控制。

5.酶非水相催化的应用
◆酶在有机介质中的催化如见表 7-2）。
表 7-2 酶非水相催化的应用
酶 催化反应 应用
脂肪酶 肽合成 青霉素G前体肽合成
酯合成 醇与有机酸合成酯类
转酯 各种酯类生产
聚合 二酯的选择性聚合
酰基化 甘醇的酰基化
蛋白酶 肽合成 合成多肽
酰基化 糖类酰基化
羟基化酶 氧化 甾体转化
过氧化物酶 聚合 酚类、胺类化合物的聚合
多酚氧化酶 氧化 芳香化合物的羟基化
胆固醇氧化酶 氧化 胆固醇测定
醇脱氢酶 酯化 有机硅醇的酯化

(1)手性药物的拆分：
◆有不少手性药物，其两种对映体的化学组成相同，但是其药理作用不同，药效也有很大差别。如表7-3所示。
表7-3 手性药物两种对映体的药理作用
药物名称
有效对映体的作用
另一种对映体的作用
普萘洛尔（Propranolol）
萘普生（Neproxen）
青霉素胺（Penicillamine）
羟基苯哌嗪(Dropropizine)
反应停（Thalidomide）
酮基布洛芬（Ketoprofen）
喘速宁（Trtoquinol）
乙胺丁醇（Ethambutol）
萘必洛尔（Kebivolol）
S构型，治疗心脏病,β-受体阻断剂
S构型，消炎、解热、镇痛
S构型，抗关节炎
S构型，镇咳
S构型，镇静剂
S构型，消炎
S构型，扩张支气管
S,S构型，抗结核病
右旋体，治疗高血压,β-受体阻断剂
R构型，钠通道阻滞剂
R构型，疗效很弱
R构型，突变剂
R构型，有神经毒性
R构型，致畸胎
R构型，防治牙周病
R构型，抑制血小板凝集
R,R构型，致失明
左旋体，舒张血管

(2)酶在手性化合物拆分方面的应用：
(3)手性高分子聚合物的制备：
(4)酚树脂的合成：
(5)导电有机聚合物的合成：
(6)发光有机聚合物的合成：
(7)食品添加剂的生产：
(8)生物柴油的生产：
◆柴油是石油化工产品，由于石油属于不可再生的能源，石油资源的短缺是世界面临的危机之一，寻求新的可再生能源已经成为世界性的重大课题。
◆生物柴油是由动物、植物或微生物油脂与小分子醇类经过酯交换反应而得到的脂肪酸酯类物质。可以代替柴油作为柴油发动机的燃料使用。
◆生物柴油可以采用酸、碱催化油脂与甲醇之间的转酯反应，而生成脂肪酸甲酯。
(9)多肽的合成：
(10)甾体转化：

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东区19341413005： 酶的非水相催化的研究概况 - ？
一陈坩乐： 人们以往普遍认为只有在水溶液中酶才具有催化活性. ◆酶在非水相介质中催化反应的研究:在理论上进行了非水介质(包括有机溶剂介质,超临界流体介质,气相介质,离子液介质等)中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制,非水介质...

东区19341413005： 非水介质中酶的结构与性质发生了哪些变化 - ？
一陈坩乐： 人们以往普遍认为只有在水溶液中酶才具有催化活性. ◆酶在非水相介质中催化反应的研究:在理论上进行了非水介质(包括有机溶剂介质,超临界流体介质,气相介质,离子液介质等)中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制,非水介质中酶催化作用动力学等方面的研究,初步建立起非水酶学(non-aqueous enzymology)的理论体系. ◆非水介质中酶催化作用的应用研究,取得显著成果.

东区19341413005： 酶促反应中的作用 - ？
一陈坩乐： 摘要 本文用丙酮沉淀法从蘑菇中提取多酚氧化酶,以多孔玻璃粉为载体,用吸附沉积法将酶固定,研究了该酶在氯仿介质中催化对氯苯酚氧化反应的机理遵循米氏(Michaelis-Menten)动力学方程;而且,在有机介质中含水率大小直接影响酶的...

东区19341413005： 酶在有机介质中与在水溶液中的特点有何改变 - ？
一陈坩乐： 1、对酶的选择不仅要看催化反应速度大小,还要注意没的稳定性,底物专一性, 对映体选择性,区域选择性,键选择性等.2、对底物的选择和浓度控制:必须考虑底物在有机溶剂和必须水层中的分配情况.3、选择适宜的有机溶剂:它的极性不能过强或过弱.4、控制好水的含量:使反应体系保持在最适水含量.5、温度的选择最好在最适温度.6、PH:保持在最适PH,通过调节缓冲液的PH和离子强度来实现对有机介质中的酶催化的PH和离子强度的调节.

东区19341413005： 在酶非水相催化中,有机溶剂对酶的影响因素有哪些 - ？
一陈坩乐： 酶在非水相介质中催化反应的研究:在理论上进行了非水介质(包括有机溶剂介质,超临界流体介质,气相介质,离子液介质等)中酶的结构与功能、非水介质中酶的作用机制,非水介质中酶催化作用动力学等方面的研究,初步建立起非水酶学(non-aqueous enzymology)的理论体系.

东区19341413005： 为什么在非水相中酶仍可以保持催化活性和稳定性？
一陈坩乐： 并非酶都怕有机溶剂,有些酶在特定的非水相中仍可催化.此时酶仍保持基本结构及解离状态.根据酶的特性及反应需要,有多种非水相体系,如两相互溶体系、低水有机相体系、反相微团等,酶的状态各有不同.

东区19341413005： 酶工程研究的主要内容和任务是什么? - ？
一陈坩乐： 酶工程的主要内容包括酶的发酵工程,酶的分离工程,固定化酶和固定化细胞,化学酶工程,生物酶工程,酶反应器和传感器,酶的非水相催化,酶抑制剂及酶的应用. 酶工程研究的目的是为了获得大量所需要的酶,并且能高效利用所得的酶

东区19341413005： 溶于水介质和溶于非水介质有什么区别 - ？
一陈坩乐： 往普遍认水溶液酶才具催化性.◆酶非水相介质催化反应研究:理论进行非水介质(包括机溶剂介质,超临界流体介质,气相介质,离液介质等)酶结构与功能、非水介质酶作用机制,非水介质酶催化作用力等面研究,初步建立起非水酶(non-aqueous enzymology)理论体系.◆非水介质酶催化作用应用研究,取显著.

东区19341413005： 为什么在非水相中酶仍然可以保持催化活性和稳定性 - ？
一陈坩乐： 酶的功能取决于其蛋白的二级或更高级结构,只要在非水相中二级结构没被破坏,就仍具有酶活性,而组成蛋白质的aa本身既含有疏水基团,也有亲水基团,所以非水相有些酶仍可以保持催化活性和稳定性

东区19341413005： 非水介质的酶催化反应 - ？
一陈坩乐： 包括酶水活度,有机体系,表面活性剂,还有就是水相介质中酶反应要注意的事项,建议看下华东理工大学袁勤生老师编的酶学原理这本书,这样你就很清楚了