关于目的基因的检测与鉴定。第一步,DNA分子杂交技术,为什么可以证明,目的基因插入染色体中了呢?

作者&投稿:叔妮 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高二生物选修三中目的基因的检测与鉴定,为什么说显示出杂交带,就能说明目的基因的插入~

代表杂交成功的关键在于目的基因的表现,而目的基因有一段标记基因,标记基因的显示现象就是杂交带的出现 检测同位素即可

DNA分子杂交技术说白了,就是检测DNA分子的一类技术。
根据碱基互补配对原理,用DNA和DNA杂交。

这类技术中,知名度比较高的,比如基因芯片技术、原位杂交技术、Southern blot技术等。
“为什么它能检测目的基因是否倒入受体细胞?”

目的基因的序列是已知的,人造一条和目的基因能杂交的DNA,固定在板子上,然后把你已经导入目的基因的受体细胞(当然,这个时候你还不知道是不是已经导入细胞,现在的技术操作都是宏观的,你操作过程中是看不见DNA走进细胞的)破碎,里面的DNA就出来了,把这些DNA放在之前的板子上面一会,然后就有技术能看到是不是细胞里的DNA挂在板子上面了,如果挂着,说明,“倒入”了。

假如将重组质粒导入受体细胞中,目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上,当然就得不到杂交带了。方法是:用同位素标记的目的基因的单链做探针与可能插入目的基因的染色体dna杂交,洗去未结合的探针,结合的不被洗去。再通过同位素的放射性,如果存在杂交,将在显影的胶片上将呈现痕迹,则是插入目的基因了;如果没有杂交,探针都被洗去,胶片不出现特定痕迹---一条黑色条带(杂交带),那么就可以判断目的基因未插入染色体。
基因组DNA就是指能够编码蛋白质的整套基因。一般说道基因组DNA指的是核基因组DNA,对于细菌就是拟核中的DNA。是组成生物基因组的所有DNA。
质粒是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子。

1、将受体与重组质粒结合。涂在固态培养基培养1晚上---大约10小时。大约如果是大肠杆菌的话,20分钟一代。这时候,固态培养基上有很多单克隆。
2、将8个单克隆用牙签挑出来(数量你定,看转化率了,有时候导入不成功;运气好的话,挑一个单克隆就能得到你想要的东西),用液体培养基培养,过夜,极大的增加细胞的数量。(杂交需要大量DNA。提DNA需要大量细胞)
3、把所有所有dna都提取出来。进行琼脂糖凝胶电泳。质粒DNA和核DNA由于分子大小不同,所以分开了。质粒由于分子量小,所以跑得快而且相差很远。(如大肠杆菌核DNA 20Kb,质粒小的1.5Kb大的也就10Kb)共两条带。
4、杂交。杂交完毕后,看核DNA的条带那里~有杂交的话有荧光!

首先,检测目的基因的方法有很多种,比如菌液pcr,抗生素筛选,GFP,流式细胞术,酶标,western blot等等,不仅仅是DNA分子杂交。
其次,如果一定要用分子杂交,要提取DNA的话,也可以提取质粒DNA呐~
然后,在提取基因组DNA的时候,由于基因组和质粒的DNA存在方式不同,一般不会混杂质粒DNA。


如何对目的基因进行检测与鉴定
1、直接测定:按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。2、mRNA测定:根据目的基因组得出其转录的mRNA组成,利用探针检测。3、蛋白测定:可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白,也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。

目的基因的检测与鉴定标记基因
标记基因在基因工程中扮演着关键角色,它的主要任务是作为检测工具,以评估目的基因的状况。由于标记基因与目的基因共同存在于运载体中,它们的导入和表达通常是同步的。一个常见的选择是使用已知序列的抗氨苄青霉素基因,通过这种基因,我们可以对受体细胞进行处理。如果细胞对氨苄青霉素没有反应,意味着抗氨苄...

检测转基因生物是否转录出mRNA,应通过何种分子杂交方法实现
1. 目的基因的检测与鉴定分为三个层次:DNA水平、mRNA水平和蛋白质水平。2. 在DNA水平上,使用DNA-DNA分子杂交技术来检测目的基因是否成功导入受体细胞。3. 在mRNA水平上,采用DNA-RNA分子杂交技术来确定目的基因是否转录出了mRNA。4. 在蛋白质水平上,利用抗原-抗体杂交技术来验证目的基因是否被翻译成...

目的基因的监测与鉴定
抗原—抗体杂交技术是用来检测目的基因是否成功表达(翻译)出相应蛋白质的方法,此时目的基因合成的蛋白质可以充当抗原,用能与这种抗原蛋白特异性结合的蛋白质充当抗体来检测,如果受体细胞提取的蛋白质能与这种抗体杂交(即特异性结合)我们就认为目的基因表达成功。你所说的探针应该就是这种抗体(这只是一般...

基因工程四部曲!
基因工程的四部曲是指?1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测 绝对正确,相信我!

重组DNA技术主要包括哪几个步骤?
重组DNA技术主要包括四个步骤:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因 获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因与...

基因工程中,目的基因的为什么要先检测后鉴定?检测和鉴定分别是指什么...
检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定:个体生物学水平鉴定,鉴定抗性等。例如 向棉花细胞中导入抗虫基因 检测指的是受体细胞中是否有这种抗虫基因 (检测方法在上面)) 但 这只能判断受体细胞中是否有目的基因 并不能充分说明棉花真的有...

正确表示基因操作“四步曲”的是( )①提取目的基因②目的基因导入受体细 ...
基因工程的基本操作步骤主要包括四步:(1)目的基因的获取,即①提取目的基因;(2)基因表达载体的构建,即③使目的基因与运载体结合;(3)将目的基因导入受体细胞,即②;(4)目的基因的检测与表达,即④检测目的基因的表达是否符合特定性状要求.所以正确表示基因操作“四步曲”的是①③②④.故选...

高中生物选修三知识点总结
1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子杂交技术。2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用 用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。3.最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取 蛋白质,用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交。4.有时还需进行 个体...

标记基因的作用
作用:1、标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用;2、在基因工程意义上,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;3、在基因定位意义上,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。标记基因目的是为检测目的基因是否成功导入,由于一般...

琼结县13096302903: 目的基因的检测与鉴定过程是什么? -
大功安神:[答案] 目的基因的检测是看看目的基因进入受体细胞没,所以先利用基因探针检查受体细胞中是否含有目的基因;其次需要考虑,受体细胞中有了目的基因后是否能顺利转录,因此还是基因探针来检查信使RNA;含有信使RNA后还得考虑是否能翻译形成蛋...

琼结县13096302903: 如何对目的基因进行检测与鉴定 -
大功安神:[答案] 可以从三方面对目的基因进行鉴定: 1直接测定:按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对; 2 mRNA测定:根据目的基因组得出其转录的mRNA组成,利用探针检测; 3蛋白测定:可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白,也可采用...

琼结县13096302903: 基因重组技术的基本过程 -
大功安神:[答案] 1.目的基因的获取(获取目的基因是实施基因工程的第一步.)目的基因来源(可以从自然界中已有的物种中分离出来,也可以用人工的方法合成)获取目的基因的方法: ①从基因文库中获取(基因组文库,部分基因文库) ②利用PCR技术扩增目的...

琼结县13096302903: 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,分别是:___. -
大功安神:[答案] 基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与鉴定.其中,基因表达载体的构建是基因工程的核心. 故答案为: 目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的...

琼结县13096302903: 基因工程的操作步骤: ①目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③目的基因的检测与鉴定 ④提取目的基因 .正确的操作顺序是() -
大功安神:[选项] A. ③②④① B. ②④③① C. ④①②③ D. ③④①②

琼结县13096302903: 基因工程 目的基因的检测与鉴定 -
大功安神: 利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无就是DNA与DNA杂交, 利用分子杂交检测目的基因的转录就是DNA 与RNA 杂交

琼结县13096302903: 如何检测目的基因是否发挥作用第一步是,检测目的基因 -
大功安神: 基因表达包括转录和翻译两个过程,因此检测目的基因是否表达的第一步是检测目的基因的mRNA.基因治疗分为体内基因治疗和体外基因治疗,其中直接向人体组织细胞中转移基因的治病方式叫体内基因治疗.

琼结县13096302903: 目的基因检测与鉴定的关键步骤为什么是检测基因 -
大功安神: 我觉得可能是因为要先检测目的基因是否进入受体细胞,才能把那些含有目的基因的细胞从很多细胞中筛选出来,至于这些基因能不能正常表达,则是下一步的事了.

琼结县13096302903: 基因工程的基本操作程序有那些? -
大功安神: (1)提取目的基因:获取目的基因是实施基因工程的第一步.如植物的抗病(抗病毒 抗细菌)基因,种子的贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因干扰素基因等,都是目的基因. 要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因,是...

琼结县13096302903: 基因工程的步骤 -
大功安神: 1目的基因的获取(基因文库 基因组文库中挑选,PCR扩增,DNA合成仪人工合成)2基因表达载体的构建(启动子,终止子,目的基因,标记基因)3将目的基因导入受体细胞(植物细胞,微生物细胞,动物细胞)4目的基因的检测与鉴定(分子水平,个体水平)

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