蛋白电泳时直接使用4*loading buffer煮蛋白，有没有什么问题？
蛋白电泳1×loading buffer可以配制出来，但是却很难在实际使用的时候用上
比如说蛋白电泳5×loading buffer，在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品。这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1×loading buffer
如果说1×loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品，这样的loading buffer配制出来也没办法用。所以说蛋白电泳1×loading buffer是指应用时的情况，而不是配制的浓度
蛋白电泳1×loading buffer不是配制出来的，而是在使用的时候的使用浓度
假设1×loading buffer是一个单位的buffer，那么一般需要配制至少两个单位的buffer，这样1比1加入样品后就是1个单位的buffer。如果配制成五个单位的buffer，那么只需要和样品按照1比5加入就可以是1个单位的buffer
但是如果直接配制成1个单位的buffer，就不能再加样品了，这样的buffer也没有意义了
loading buffer的主要成分是SDS，甘油，溴酚蓝，TRIS，其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来，SDS是结合蛋白质，使所有蛋白质所带电荷性质一样，但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的。溴酚蓝是指示剂，可以用来观察大概的电泳过程，因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样，从而也可以看做是一个蛋白样品，这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置，但是只能看一个大概
loading buffer浓一点，关系不大，蛋白还是能跑出来的。
SDS-PAGE电泳时蛋白Marker使用前需要煮沸吗?
一般不需要，具体看说明书。我们用过一种非预染marker，要求第一次使用时煮沸。
血清蛋白电泳简介
用微量吸管吸取无溶血血清3～5μl于横线处沿横线加样,样品应与薄膜的边缘保持一定的距离,以免电泳图谱中的蛋白区带变形,待血清渗入薄膜后,反转薄膜,使光面朝上,平直地贴于电泳槽支架上,用双层滤纸或四层纱布将薄膜的两端与缓冲液连通,稍待片刻。 (4)接通电源,注意醋酸纤维素薄膜上的正、负极,切勿接错。电压...
蛋白电泳中AP、SDS、TRIS-HCL、母液各自的作用
AP是聚合的引发剂，主要用来引发丙烯酰胺的交联 SDS是表面活性剂，主要能使蛋白质变性，各个亚基之间解开，形成纺锤样的结构，使得蛋白分离仅仅以分子量大小区分 TRIS-HCL是缓冲液，起调节ph作用 母液是高浓度的缓冲液，可以进行贮存，在使用时，进行稀释 ...
压铸件做电泳银白色亮光效果的工序和价钱
如果直接电泳的话，会显得白度没那么好。）每天生产多少件的话？主要是看你的电泳设备，是自动还是手动的，设备的配置直接决定了你的产能。每平方米的价格，是根据设备的设计、还有电泳漆的上漆厚度及操作过程中的规范程度等决定的。如果需要知道整场以及更详细的工艺流程，请联系志邦电泳。
以醋酸纤维素薄膜为支持物进行血清蛋白电泳,使用pH为8.6的巴比妥缓冲液...
【答案】：A 在pH8.6的缓冲液中，大部分蛋白质常带较强的负电荷，在电场中向正极移动。
蛋白质电泳
D 向正极移动，那么蛋白要带负电。溶液pH大于pl值，两性离子释放质子带负电。所以pH应该大于其中的4个而小于最大的1个，6.7 < pH < 7.3 参考资料：http:\/\/baike.baidu.com\/view\/26521.htm
纸电泳用的滤纸为什么用1M甲酸浸泡处理
原理简单来说，蛋白质氨基酸这些是有等电点存在的，当外界ph偏离了等电点之后，蛋白质和氨基酸将呈带正点或者带负电。如在一定ph环境中，在电场的作用下，带有不同电荷、不同电荷量的蛋白质和氨基酸分别向正负极方向移动。而纸电泳中的滤纸是作为支持介质存在的，使用甲酸浸泡处理之后，可以使其作为介质...
血清蛋白质电泳时为什么要将点样的一端靠近负极端
因此，蛋白质点样端必须靠近负极。1）空腹12小时，抽取静脉血化验，标本一定要新鲜血液。 （2）化验前要告知医生近期所服用的药物以及近期的生理改变。 （3）下列情况可出现生理性升高： ① alpha;1-球蛋白升高可见于妊娠6个月后； ② alpha;2-球蛋白升高可见于出生1-6个月的婴儿，妊娠4-6个月...
尿蛋白电泳分析大概要多久出结果
4小时电泳，2-3小时染色，0.5-1小时脱色，才能出结果。尿蛋白电泳是指是将尿蛋白按其分子量大小、顺序分为不同组分，应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的一种试验。用。尿蛋白类型按分子量分为低分子蛋白、中分子蛋白、高分子蛋白及混合性蛋白四种，此项检查，可以大致推断尿蛋白的来源(是溢出性...
蛋白质SDS-PAGE电泳时电泳槽中无气泡产生是什么原因
电泳时水被电解，阴极产生H2，阳极产生O2，实际就是电解水实验啦。不产生气泡说明没通电，要么是电线没接牢，要么是电泳仪坏了，要么是没插电源。
太朗优维： 蛋白电泳1*loading buffer可以配制出来,但是却很难在实际使用的时候用上 比如说蛋白电泳5*loading buffer,在使用的时候也就是1个体积的loading buffer要加上4个体积的蛋白样品.这样最后的蛋白电泳loading buffer就被稀释到1*loading buffer 如果说1*loading buffer就是说1体积的loading buffer要加上0体积的蛋白样品,这样的loading buffer配制出来也没办法用.所以说蛋白电泳1*loading buffer是指应用时的情况,而不是配制的浓度
漾濞彝族自治县19123127908： 蛋白电泳时直接使用4*loading buffer煮蛋白,有没有什么问题? - ？
太朗优维： 按照比例加入,必然不会出现问题.loading buffer的主要成分是SDS,甘油,溴酚蓝,TRIS,其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来,SDS是结合蛋白质,使所有蛋白质所带电荷性质一样,但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的.溴酚蓝是指示剂,可以用来观察大概的电泳过程,因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样,从而也可以看做是一个蛋白样品,这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置,但是只能看一个大概
漾濞彝族自治县19123127908： 怎样计算电泳中蛋白分子量 - ？
太朗优维： 1.首先要选择一款未经过染色的蛋白Marker,和你所要确定分子量大小的蛋白一起电泳. 2.在电泳过程中尽量选择靠中间的泳道,避免边缘效应引起条带歪斜,没有样的孔用loading填满. 3.电泳结束后,考马斯亮蓝染色. 4.如果有凝胶成像系统,可以直接先拍照,然后用系统带的软件,根据Marker每一个条带的位置,分析目标蛋白分子量. 5.如果没有这种系统,就只能用土一点的办法,量每一个Marker条带相对于加样孔的迁移量,对应每个条带的分子量做标准曲线(excel可以),通过标准曲线得到的方程和目标蛋白的迁移率计算目标蛋白的分子量大小就可以了.
漾濞彝族自治县19123127908： SDS - PAGE蛋白质电泳问题 - ？
太朗优维： 1,浓缩胶的要求就是将所有蛋白在浓缩胶和分离胶梯度的时候将所有蛋白压缩成一条线,保证他们在同一起跑线上.如果蛋白样品是不同时间的同一种,可能就是浓缩胶没摇匀.至于加样散,原因就可能是胶质不均了.对于结果应该影响不大...
漾濞彝族自治县19123127908： 蛋白电泳WB中的重复利用问题 - ？
太朗优维： 电泳液和转膜液都可重复利用3次左右 考马斯亮兰染液也可以重复用.新配的染液10分钟即可,重复3次后要染30分钟. 一抗二抗可以重复利用,但是注意要在5%milk中加入0.2% sodium azide ,并且用完以后放入4度保存,我的经验重复使用4-5次是肯定没有问题的.如果保存不当,就会污染微生物,只能丢弃.
漾濞彝族自治县19123127908： 为什么蛋白电泳需要浓缩胶而DNA电泳不用 - ？
太朗优维： DNA分子量大,就算是100bp,差不多是12K,分开很容易,条带比较单一.而蛋白相对来说就小了些,30到40K的蛋白,很常见,而且各蛋白间相差小.多半是大大小小的蛋白混合物.相差小. 并且DNA结构简单,由四种碱基组成,同样100bp速度接近.而蛋白由20种AA组成,各蛋白组成差别大. 所以DNA电泳,不用浓缩胶就可以跑得很好.没必要用浓缩胶. 而蛋白电泳,本身的原因,再加上进入电泳孔的时间不同,如果不用浓缩胶,分跑得很宽而分不开.有了浓缩胶,会在进入分离胶时,让所有的蛋白在同一起跑线上,这一条线,很细很细.染料在浓缩胶中可以观察得到.
漾濞彝族自治县19123127908： 有一混合蛋白质溶液,PI为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3.电泳时欲使4种泳向正极,缓冲液的PH为7.0还是8.0? - ？
太朗优维： 7.0题目说电泳时欲使4种泳向正极 也是就4个蛋白质带负点. 缓冲液的PH为7.0 PI为4.6、5.0、5.3、6.7都带负电,如果换成缓冲液的PH为8.0,那么就有5个蛋白质向正极了 ,不符合题意.
漾濞彝族自治县19123127908： 为什么血清蛋白电泳不选用弱酸性电泳缓冲液而选用弱碱性电泳缓冲液? - ？
太朗优维： 因为血清蛋白的等电点为4.7-4.9,属于弱酸性,在弱酸性环境下,该蛋白不带电,电泳就不能顺利进行,所以要在弱碱性环境下电泳啊~~
漾濞彝族自治县19123127908： 电泳仪的使用注意事项 - ？
太朗优维： 1、注意使用安全,电泳中会使用一些有毒药品,很容易沾在电泳仪上,所以使用和搬动的时候最好戴手套,每次使用完毕后也应当清理干净 2、设定最大电压和电流的时候应该注意不能超过电泳仪本身的限度,否则容易造成电泳烧胶,失败甚至烧坏电泳仪,电泳槽
漾濞彝族自治县19123127908： 求;蛋白质电泳电流要求是多少,对结果影响大吗?谢谢 - ？
太朗优维： 当然大了,如果你是搞科研的就会知道,不同的等电点和电场力可以对不同的蛋白质引发不同的效果,这是电泳最大的作用.
