荧光显微镜的使用需要注意哪些问题？何谓直接荧光与间接荧光
显微镜使用注意事项以及使用
直接法是每个抗原的抗体都要荧光标记，而且荧光标记后可能会影响抗体效价甚至失效。所以有人就发明了间接法，这样只要对相应的抗原做出相应的抗体，再用标记好的二抗结合上就行了，不用每个抗体都要荧光标记，而且对一抗的效价影响甚微。
我自己的经验是，直接法跟间接法的结果差不多，敏感性并不像猜测的那么明显，所以直接法还是比间接法有优势
（2） 观察对象必须是可自发荧光或已被荧光染料染色的标本。
（3）应在暗室中进行检查。进入暗室后，接上电源，点燃超高压汞灯5～15min，待光源发出强光稳定后，眼睛完全适应暗室，再开始观察标本。
（4）载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质，载玻片的厚度应在0.8～1.2mm之间，太厚可吸收较多的光，并且不能使激发光在标本平面上聚焦。载玻片必须光洁，厚度均匀，无油渍或划痕。盖玻片厚度应在0.17mm左右。
（5）防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜。
（6）选用效果最好的滤光片组。
（7）检查时间每次以1～2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；标本受紫外线照射3～5min后，荧光也明显减弱；所以，最多不得超过2～3h。 （8）荧光标本一般不能长久保存，若持续长时间照射（尤其是紫外线）易很快褪色。因此，如有条件则应先照相存档，再仔细观察标本。
（9）荧光显微镜光源寿命有限，启动高压汞灯后，不得在15min内将其关闭，一经关闭，必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁开闭，否则，会大大降低汞灯的寿命。标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。
（10）标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发。
（11）若暂不观察标本时，可拉过阻光光帘阻挡光线。这样，既可避免对标本不必要的长时间照射，又减少了开闭汞灯的频率和次数。
（12）荧光亮度的判断标准：一般分为四级，即“一”—无或可见微弱荧光。“+”—仅能见明确可见的荧光。“++”—可见有明亮的荧光。“+++”—可见耀眼的荧光。
（13）较长时间观察荧光标本时，一定要戴能阻挡紫外光的护目镜，加强对眼睛的保护。在未加入阻断滤光片前不要用眼直接观察，否则会损伤眼睛。
(14) 激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现象，因此尽可能缩短观察时间，暂时不观察时，应用挡板遮盖激发光。
(15) 作油镜观察时，应用“无荧光油”。
(16) 荧光几乎都较弱，应在较暗的室内进行。
使用光学显微镜时观察的材料必须满足的条件是
（1）取镜：左手托住镜座右手握住镜臂从盒子内取出，并把显微镜放实验桌上，略偏左距边缘7厘米左右，从盒子内取出并安放好目镜和物镜。（2）对光：把光圈对准通光孔，一只眼睛看着目镜，转动反光镜，让光线经过通光孔反射到镜筒里面，看到较亮的视野后停止转动。（3）安放切片：将所要观察的玻片标本...
显微镜的使用方法和注意事项
显微镜的使用方法和注意事项(1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边1-2寸为宜,便于坐着操作。(2)对光:用拇
实验室使用光学显微镜观察的顺序
对光 1、使遮光器的最大光圈、低倍镜对准通光孔;2、左眼注视目镜，同时两手转动反光镜，直到视野亮白。放置玻片标本 将玻片标本放置在载物台上，使材料对准通光孔。材料对准通光孔，用压片夹将玻片压好。观察 1、下降镜筒，眼睛从侧面注视物镜，下降镜筒距离玻片标本2～3mm时止;2、注视显微镜视野，...
显微镜的正确使用方法是什么?
1、使用高倍物镜之前，必须先用低倍物镜找到观察的物象，并调到视野的正中央，然后转动转换器再换高倍镜。2、换用高倍镜后，视野内亮度变暗，因此一般选用较大的光圈并使用反光镜的凹面，然后调节细准焦螺旋。观看的物体数目变少，但是体积变大。3、显微镜的放大倍数为目镜倍数乘物镜倍数，如目镜为10...
光学显微镜上的100倍物镜怎么用的
再用弹簧压片夹在玻片的两端，防止玻片标本移动。若为玻片移动器，则将玻片标本卡入玻片移动器，然后调节玻片移动器，将材料移至正对通光孔中央的位置。4.低倍物镜观察用显微镜观察标本时，应先用低倍物镜找到物像。因为低倍物镜观察范围大，较易找到物像，且易能找到需作精细观察的部位。【点击了解...
显微镜的使用步骤
显微镜的使用步骤1.放在实验台上略偏左。2.对光：转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。3.把较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。4.把玻片标本放在载物台上，正对通光孔中心。5.调整对焦，直到看清物像为止。生物课上会学。显微镜是由一个透镜或几个...
使用显微镜的七个步骤
此时可能需要调节细准焦螺旋，使物象更加清晰。6. 低倍镜下观察：首先，将要观察的物象移至视野中央。接着，转动转换器，换上高倍物镜。然后，轻轻转动细准焦螺旋，直到物象清晰可见。7. 完成观察：观察结束后，先用高倍镜观察，再转换回低倍镜。最后，将显微镜恢复原状，放回镜箱。
显微镜的过程
关于光学显微镜的使用：1.显微镜的取送：①右手握镜臂；②左手托镜座；③置于胸前。2.显微镜的旋转：①镜筒朝前，镜臂朝后；②置于观察者座位前的桌子上，偏向身体左侧，便于左眼向目镜内观察；③置于桌子内侧，距桌沿5cm左右。3.对光：①转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，然后转动转换器，使低倍...
根据所学显微镜结构有关知识,回答问题:(1)需要将镜筒下降时,你的眼睛应...
我们看不到物镜的位置，就容易让物镜压碎了玻片标本，所以在镜筒下降时我们要注视物镜目的是防止物镜的镜头压坏装片，甚至损坏镜头．（2）光学显微镜的使用步骤：1、取镜和安放①右手握住镜臂，左手托住镜座． ②把显微镜放在实验台上，略偏左．安装好目镜和物镜． 2、对光 ①转动转换器，...
显微镜的使用方法顺序
关于光学显微镜的使用：1.显微镜的取送：①右手握镜臂；②左手托镜座；③置于胸前。2.显微镜的旋转：①镜筒朝前，镜臂朝后；②置于观察者座位前的桌子上，偏向身体左侧，便于左眼向目镜内观察；③置于桌子内侧，距桌沿5cm左右。3.对光：①转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，然后转动转换器，使低倍...
庾饰功亮： (1)严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序. (2)应在暗室中进行检查.进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本. (3)防止紫外线对眼睛的损害,...
萝北县13138831252： 荧光显微镜的使用需要注意哪些问题?何谓直接荧光与间接荧光 - ？
庾饰功亮： (1)严格按照荧光显微镜厂家说明书要求进行操作,不要随意改变程序.(2) 观察对象必须是可自发荧光或已被荧光染料染色的标本. (3)应在暗室中进行检查.进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全...
萝北县13138831252： 荧光显微镜的使用方法 - ？
庾饰功亮： (1)打开灯源,超高压汞灯要预热15min才能达到最亮点. (2)透射式荧光显微镜需在光源与暗视野聚光器之间装上所要求的激发滤片,在物镜的后面装上相应的压制滤片.落射式荧光显微镜需在光路的插槽中插入所要求的激发滤片、双色束分离...
萝北县13138831252： 使用显微镜时,我们应该特别注意什么? - ？
庾饰功亮：[答案] (1)操作时必须特别谨慎,不能有任何剧烈的动作.不允许自行拆卸光学系统. (2)严禁用手指直接接触显微镜镜头的玻璃部分和试样磨面.若镜头上落有灰尘,会影响显微镜的清晰度与分辨率.此时,应先用洗耳球吹去灰尘和砂粒,再用镜头纸或毛刷轻...
萝北县13138831252： 倒置荧光显微镜的操作方法和注意事项? - ？
庾饰功亮：[答案] 荧光显微镜一般都是用到汞灯,在使用时,两次开启光源间隔要在20分钟以上,要不然会缩短汞灯的使用寿命.进口的汞灯价格比较贵.至于用到哪个波段的光,要看你的样品需求了.CFM-550 系列荧光显微镜是由倒置显微镜和落射荧...
萝北县13138831252： 显微镜的使用包括哪些步骤,使用过程中应该注意哪些问题 - ？
庾饰功亮： 1安放:显微镜应放在体前偏左,镜筒在前镜臂在后的方向安放好. 2对光:用低倍镜、较大光圈(遮光器上调);眼看目镜,同时调节反光镜;使视野变得明亮. 3放片:观察对象要正对物镜的孔,将玻片夹好之后再调焦. 4调焦:先用低倍镜...
萝北县13138831252： 显微镜使用过程中应该注意哪些问题 - ？
庾饰功亮：[答案] 1.持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方.2.轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,以免碰翻落地.3.保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手...
萝北县13138831252： 免疫荧光的方法有什么注意环节 - ？
庾饰功亮： 1、冰冻切片制备:建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散.选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等,防止裂片和脱片严重. 2、组织切片固定:切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min,尤其要较长...
萝北县13138831252： 公司新买的显微镜,使用前要注意那些方面的问题? - ？
庾饰功亮：[答案] 微镜属精密仪器,如使用不当会引起仪器损坏或影响成像质量.以下几项请您在使用前一定要引起足够的重视. 确认显微镜输入电压220伏或110伏,并有接地. 不可让显微镜放置在潮湿、灰尘及有酸碱腐蚀的环境中. 不可让显微镜在低温或者高温环境中...
萝北县13138831252： 使用显微镜的注意事项简洁一点 - ？
庾饰功亮：[答案] 一、 操作步骤和注意事项(一)正置显微镜1、安放右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立.桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方.单筒的一般放在左侧,距离桌边3~4厘米处.2、清洁 检查显微镜是否有毛病,是...
