多聚甲醛固定细胞后可以看到绿色荧光蛋白吗
化学是二本，生物应该是没有
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这个专业很好的哦，下面谁介绍：
本专业培养掌握现代生物技术及其产业化的科学原理、工艺技术过程和工程设计等基础理论、基本技能，能在生物技术与工程领域从事设计、生产、管理和新技术研究、新产品开发的工程技术人才。学生主要学习微生物学、生物化学、基因工程、发酵工程等方面的基本理论和基本知识，受到生物技术与工程等方面的基本训练，具备在生物技术与工程领域从事设计、生产、管理和新技术研究、新产品开发的基本能力。
生物工程专业设有生物化学工程方向，主要专业课程：细胞生物学、遗传学、生物化学、分子生物学、现代生物技术、微生物学、发酵设备、基因工程、蛋白质与酶工程、生物治理工程、生物矿业工程、生化分离工程等。
本专业学制四年，具有工学学士学位授予权。学生毕业后能从事相关的科学研究、教学和管理工作，也可在工业、医药、食品、环保、园林和农、林、牧、渔等行业从事与化学化工、生物工程相关的应用研究、技术开发、工程技术及管理等工作。
“应用化学”与“分析化学”学科具有硕士学位授予权，“化学工程”学科具有工程硕士学位授予权，“地球化学”学科具有博士学位授予权
绿色荧光蛋的发光机理比荧光素/荧光素酶要简单得多。一种荧光素酶只能与相对应的一种荧光素合作来发光，而绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作，只需要用蓝光照射，就能自己发光。
在生物学研究中，科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记。将这种荧光分子通过化学方法挂在其他不可见的分子上，原来不可见的部分就变得可见了。生物学家一直利用这种标记方法，把原本透明的细胞或细胞器从黑暗的显微镜视场中“揪出来”。
传统的荧光分子在发光的同时，会产生具有毒性的氧自由基，导致被观察的细胞死亡，这叫做“光毒性”，因此，在绿色荧光蛋白发现以前，科学家们只能通过荧光标记来研究死亡细胞静态结构，而绿色荧光蛋白的光毒性非常弱，非常适合用于标记活细胞。
然而，绿色荧光蛋白被发现20多年后，才有人将其应用在生物样品标记上。1993年，马丁·沙尔菲成功地通过基因重组的方法使得除水母以外的其他生物(如大肠杆菌等）也能产生绿色荧光蛋白，这不仅证实了绿色荧光蛋白与活体生物的相容性，还建立了利用绿色荧光蛋白研究基因表达的基该方法，而许多现代重大疾病都与基因表达的异常有关。至此，生物医学研究的一场“绿色革命”揭开了序幕。
后来，美籍华人钱永健系统地研究了绿色荧光蛋白的工作原理，并对它进行了大刀阔斧的化学改造，不但大大增强了它的发光效率，还发展出了红色、蓝色、黄色荧光蛋白，使得荧光蛋白真正成为了一个琳琅满目的工具箱，供生物学家们选用。目前生物实验室普遍使用的荧光蛋白，大部分是钱永健改造的变种。
有了这些荧光蛋白，科学家们就好像在细胞内装上了“摄像头”，得以实时监测各种病毒“为非作歹”的过程。通过沙尔菲的基因克隆思路，科学家们还培育出了荧光老鼠和荧光猪，由于沙尔菲与钱永健的突出贡献，他们与绿色荧光蛋白的发现者下村修共享了2008年的诺贝尔化学奖。
瑞典皇家科学院将绿色荧光蛋白的发现和改造与显微镜的发明相提并论，成为当代生物科学研究中最重要的工具之一。
多聚甲醛固定后利用
6. 多聚甲醛固定也可能影响GFP荧光，因为固定会改变GFP蛋白的构象，影响其产生荧光。7. 针对多聚甲醛固定的影响，提出了几种解决方案：避免预固定易受影响的分子、使用1％多聚甲醛预固定、使用FlowGuard®细胞保存液或避光、4度保存染色后的样本。8. 对于担心荧光稳定性的实验者，可以考虑购买适用...
细胞细胞术检测样品制备方法
加入1ml含5%人血清的PBS，孵育10分钟，离心后弃上清。随后，加入0.5% BSA和荧光标记抗体（5×105个细胞\/20ul），避光冰上放置30分钟。最后，加入1%多聚甲醛固定，待测。 使用流式细胞仪检测荧光值，每管计数10,000个细胞。未标记抗体间接免疫荧光标记法过程为:收集2×106细胞，用冷PBS洗涤一次，...
4%的多聚甲醛可以放室温多久
一个月。根据查询多聚甲醛产品使用说明得知，使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48小时，固定时间太久组织会变脆，如果是在温度4度以下最多可以放一个月，但是肯定会损失抗原。多聚甲醛白色无定形粉末，有甲醛气味。
流式抗体37℃染色多长时间
不超过4小时。流式抗体37℃染色结果（不超过4小时）。暂时无法检测，可以将染色后的细胞用4%多聚甲醛固定后，避光储存在4度，固定后的细胞可以保存一个星期。
12孔板细胞多聚甲醛固定怎么操作
4. 去除固定液并清洗：固定完成后，吸去多聚甲醛溶液，并用PBS清洗细胞2-3次，以去除残留的固定液。这一步骤很重要，因为残留的固定液可能会影响后续的细胞染色或抗体结合。通过上述步骤，12孔板中的细胞就被成功地用多聚甲醛固定了。固定后的细胞可以用于后续的免疫荧光染色、细胞形态观察或其他细胞生物...
动物脏器多聚甲醛固定后储存条件
动物脏器多聚甲醛固定后储存条件：常温下储存。4%多聚甲醛固定时间不要太久，固定后可以放在梯度蔗糖中脱水，4度保存。多聚甲醛固定时间是不能太久的，24-48小时足够了。固定时间超过1星期，固定液中的醛类物质会与蛋白形成共价结合，这种结合会导致无论你用什么修复方法，蛋白的抗原表位都无法暴露。
甲醛固定细胞会杀死细胞吗
甲醛是一种常用的组织学固定剂，既可以固定细胞，也可以固定组织。它通过与细胞中的蛋白质反应，形成具有稳定空间结构的蛋白-甲醛缩合物，从而使细胞获得固定、保护和保存。虽然甲醛是一种强致癌物质，但是在其正确的使用方式下，甲醛固定不会杀死细胞。一般而言，在组织学检测中使用的甲醛浓度较低，不会对...
4%多聚甲醛固定细胞时间
15分钟。多聚甲醛通常用于生物医学领域的标本固定过程中，4%多聚甲醛固定细胞时间保持在15分钟即可，要注意的是多聚甲醛有毒，只能在通风橱中使用。
肿瘤组织在4%多聚甲醛中可以放置多久?
使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48hours,固定时间太久组织会变脆 如果是在温度4°以下最多可以放一个月，但是肯定会损失抗原的
多聚甲醛固定后的样品能用于酶反应么
冰冻切片一般不需要抗原修复，石蜡切片需要抗原修复。目前进行的常规石蜡切片标本，一般均用甲醛固定。事实上经甲醛固定的部分组织细胞，免疫组化标记敏感性明显降低，其原因为：(1)在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇；(2)甲醛在保存过程中会形成羧甲基，而封闭抗原决定族；(3)在用固定剂...
杨朗冠心： 甲醛、多聚甲醛这些固定液的固定时间是不能太久的,一般24-48小时足够了.如果固定时间超过1星期,固定液中的醛类物质会与蛋白形成共价结合,这种结合会导致无论你用什么修复方法,蛋白的抗原表位都无法暴露(也就是说你在做组化或者免疫荧光时抗原修复这一步骤没有用了).这种组织做出来的结果,要么得不到阳性,要么各种假阳性.但是做HE或者其他不涉及抗原抗体结合的染色还是可以的.
黄南藏族自治州13185591641： 细胞免疫荧光怎么封片 - ？
杨朗冠心： 细胞免疫荧光的详细操作步骤 1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍.注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心. 2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍. 3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍. 4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍. 5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍. 6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍. 7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片. 8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周.
黄南藏族自治州13185591641： L - 多聚赖氨酸包被细胞爬片免疫荧光步骤 - ？
杨朗冠心： 第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4. PBS浸洗...
黄南藏族自治州13185591641： 免疫荧光如果不在玻片在弄是不是就不用加多聚甲醛 - ？
杨朗冠心： 我们实验室一般是多聚甲醛固定以后,接着往后面做,直到最后加二抗反应完后,用抗荧光淬灭剂封片之后放在负二十度保存.
黄南藏族自治州13185591641： 做细胞免疫荧光,4%的多聚甲醛放到4度能直接用吗 - ？
杨朗冠心： 可以,推荐密封,放于四度冰箱中待用.
黄南藏族自治州13185591641： TUNEL检测的中文名称 - ？
杨朗冠心： 原位末端转移酶标记技术.凋亡细胞的DNA双链断裂或一条链出现缺口,产生一系列3′-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)作用下,将脱氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物标记到DNA的3′末端,从而进行凋亡细胞的检测.
黄南藏族自治州13185591641： 细胞转染了GFP固定后还能发荧光吗 - ？
杨朗冠心： 细胞转染GFP质粒并进行表达之后,一般细胞内会有大量的GFP蛋白,可以发出绿色荧光. GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级,因此只要这个结构仍然保持着,就可以发出荧光. 由于GFP的beta-barrel结构非常稳定,一些版本的GFP蛋白(如EGFP)甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性,因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的,一般需要用光漂白法. 基于其非常稳定的结构,即便细胞被固定了,仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光.此时荧光可能较弱.在荧光显微镜下是有可能看得到的.
黄南藏族自治州13185591641： 求助:细胞膜蛋白免疫荧光染色问题 - ？
杨朗冠心： 细胞膜蛋白免疫荧光染色问题 1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同? 参考见解:只是固定方法不同.细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的. 2、问:近期要做免疫荧光双标...
黄南藏族自治州13185591641： 细胞转染后是死细胞还是活细胞有绿荧光蛋白的表达 - ？
杨朗冠心： 活细胞,死细胞不能表达蛋白
黄南藏族自治州13185591641： 做免疫荧光的细胞 多聚甲醛固定后怎么 - ？
杨朗冠心： 我没有用国戊二醛.根据箍狗结果,大多是两者混合在一起作为固定液使用,即同时使用.
