提取的质粒DNA的质量与产量与哪些因素有关？为什么要用对数期的菌液提取质粒？
溶液2中的主要成分是NaOH和SDS，是用来裂解细胞的。因为NaOH遇到二氧化碳容易反应生成碳酸氢钙，影响使用效果，因此要现配现用。
SDS的话，低温容易产生沉淀。不过在37°C 水浴一下就好。主要还是NaOH的问题。
希望能够帮到你~望采纳~谢谢~
汗，没听说过氨苄青霉素可以破坏细胞壁的，这样子的话就不需要碱裂解了，氨苄青霉素肯定是在扩增菌体的时候加入培养基的，不会对提取本身造成影响，但是可以阻止杂菌生长，增加目的质粒的拷贝数（前提是，质粒是氨苄抗性的，别加错啦）
和菌的生长状况有关，提取时的温度有关要低温，还需要加溶液，操作的时候要温和。对数期菌的 生长状况和数量最佳，有利于提取质粒。
质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子，存在于细胞质中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。
质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性状，有利于细菌在特定的环境条件下生存。
扩展资料：
严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用，只能在细胞周期的一定阶段进行复制，当细胞染色体停止复制时，质粒也就不再复制。
松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响，在整个细胞生长周期中随时都可以复制，在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
根据质粒的不相容性，可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象，反之为相容性。常用于流行病学的调查。
参考资料来源：百度百科——质粒
1.和菌的 生长状况有关
2.和提取时的温度有关要低温
3.加溶液2和3要操作温和!
1.和菌的 生长状况有关
2.和提取时的温度有关要低温
3.加溶液2和3要操作温和!
4.要用酚和氯仿的混合液多次抽提去除蛋白,效果最好!
5.用冰乙醇沉淀最好!
因为对数期菌的 生长状况和数量最佳,有利于提取质粒
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量
用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA。琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向...
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量
方法用大肠杆菌DH5α感受态细胞克隆丰量的pMD-18T重组质粒，紫外分光光度计定量后，根据重组质粒分子量计算其拷贝数，稀释成梯度浓度的荧光实时定量PCR的标准品，取1.0×106、1.0×104和1.0×102拷贝\/μl高中低3个浓度的标准品，反复冻融1、6、11、15次和21次后，以冻融后的质粒标准品为模板同...
提取的质粒dna还可能有什么物质
RNA（加RNase），基因组DNA（控制裂解步骤），蛋白质（过柱时不吸入蛋白和使用蛋白洗脱液），多糖（加异丙醇等），有机溶剂（洗脱前多晾一会儿）
小量一次提取质粒DNA的原理是什么?
小量提取质粒DNA的原理主要包括:1. 裂解细胞和核糖体,释放出质粒DNA。常用SDS和蛋白酶K破坏细胞结构,裂解细胞和核糖体,释放出各种DNA,包括质粒DNA、宿主染色体DNA等。2.去蛋白。添加洗脱液如酚\/氯仿等有机溶剂,可以去除相关蛋白质,留下DNA。3.沉淀DNA。加入苏木素和异丙醇,可以使DNA选择性沉淀,此时质...
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量?
Nano（紫外分光光度计，测定OD260\/280）或琼脂糖凝胶电泳
如何提取质粒DNA
通过离心，可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中,然后用酚、氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。抽提质粒DNA常用碱裂解法，它是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其基本原理为：在碱性条件（pH12.5）下，线性染色体DNA的双螺旋结构解开而变性，质粒DNA的氢键虽然断裂，但两条...
如何判断提取质粒DNA的纯度
估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg\/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。
提取的大肠杆菌质粒里面含有基因组DNA(按照碱法大提质粒)该怎么办?如 ...
可以考虑切胶回收，如果你的质粒在10k以下，污染的基因组DNA量不多，而且基因组DNA弥散不严重的话，在1%的agarose胶里质粒和基因组DNA还是分得比较开的。注意的地方是在加完溶液2裂解细胞的时候要放置在冰上而且时间不能太长，加溶液2以及下一步加溶液3中和时，混合要充分但要轻柔，一般小心颠倒5-10...
质粒DNA如何提取的?
试述碱裂解法提取质粒的基本原理及关键试剂的作用如下：将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要用碱处理的强度和时间不...
质粒DNA提取和细胞基因组DNA提取的异同
不同点 一、提取方法不同 DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。二、提取原理不同 质粒DNA提取...
苦习美平：[答案] 1.和菌的 生长状况有关 2.和提取时的温度有关要低温 3.加溶液2和3要操作温和! 4.要用酚和氯仿的混合液多次抽提去除蛋白,效果最好! 5.用冰乙醇沉淀最好! 因为对数期菌的 生长状况和数量最佳,有利于提取质粒
汶川县13954339906： 哪些因素影响DNA提取的质量 - ？
苦习美平： 1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量. 2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全理解,虽然理论上讲室温下福尔马林与DNA几乎不发生的,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联. 3.固定温度等其他因素对DNA的影响核酸与固定剂的反应由反应成分、浓度、酸硷度以及温度等因素的调节,其中温度效应显得特别重要. 4.组织处理过程对DNA的影响我们发现,从常规组织处理的蜡块中提取的DNA,其大部分分子量晨100bp-10000bp之间,主要分布于100-1500bp,仅约1/3的组织所提取DNA>20kb.
汶川县13954339906： 大肠杆菌感受态细胞的制备要注意哪些因素 - ？
苦习美平： (1)质粒DNA的质量和浓度: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的,转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,则会使转化率下降.一般地,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%,...
汶川县13954339906： 质粒DNA提取及电泳分析实验结果图的分析,希望各位大侠尽力帮忙哦 - ？
苦习美平： 1,虽然不知道你点了多少,如果是1ul,2ul,这个质粒的提取量也就还行,就我的感觉,应该在200ng/ul的浓度或更高(看你点了多少样); 2,不告诉大家你用的marker,分子量试不好说的,更何况,你没酶切过,用质粒与线性的Marker比较没有任何意义.纯度也没什么大问题,质粒提取出现3条是最正常的,4条带表明有基因组DNA污染,但你的这个带很弱,问题不大;稍有疑问的是,你主带的下方还有1,2条更小的带,如果排除电泳污染的话,应该是不同程度的超螺旋所致. 这个提取的质粒,酶切,转化都没问题的.
汶川县13954339906： 如何判断提取质粒DNA的纯度 - ？
苦习美平： 可以通过紫外吸收检测. 因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD...
汶川县13954339906： 质粒DNA提取和细胞基因组DNA提取的异同 - ？
苦习美平： 不同点 一、提取方法不同 DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法.化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法.生物方式:酶法. 质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,...
汶川县13954339906： 质粒DNA的提取方法总共有哪些,回答的全给高分??? - ？
苦习美平： 碱裂解法: 此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析.方法如下: 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基. 2、37℃振荡培养过夜. 3、取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3...
汶川县13954339906： 提取基因组dna后,怎么判断dna纯度与质量 - ？
苦习美平： 用紫外分光光度计测OD值 A260/A280正常1.8左右 如果制备的DNA样品A260/A280<1.7,说明样品中含酶和蛋白质过高,应将样品用酚、氯仿、异戊醇抽提,再用乙醇沉淀DNA A260/A280>2,说明样品中RNA过高,可用RNase消化后,用酚、氯仿、异戊醇抽提,再用乙醇沉淀DNA
汶川县13954339906： 生物化学实验中制备质粒DNA方法中,酚氯仿裂解法的实验原理 - ？
苦习美平： 质粒DNA的制备 【实验目的】 1.了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用; 2.掌握质粒DNA分离和纯化的原理; 3.学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法. 【实验原理】 质粒是细菌内的共生型遗传因子,它能在细菌中垂直遗传并...
