怎样使用显微镜

如何使用显微镜？~

光学显微镜的使用方法

一、使用方法
1．观察前的准备
　　（1）置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为一寸左右。镜检者姿势要端正，一般用左眼观察，右眼便于绘图或记录，两眼必须同时睁开，以减少疲劳，亦可练习左右眼均能观察。显微镜构造见右图。
　　（2）显微镜是光学精密仪器，在使用时要特别小心，使用前要熟悉显微镜的结构和性能，检查各总零件是否完好无损。镜身有无灰尘，镜头是否清洁，做好必要的清洁和调整工作。
　　（3）调节光源　对光时应避免直射光源，因直射光源影响物像的清晰，损坏光源装置和镜头，并刺激眼睛。晴天可直接用窗外的散射光，如明暗天气，可用8－30W日光灯或显微镜灯照明
调节光源及光照的一般步骤：
　　将低倍物镜旋至镜筒下方，旋转粗调节轮，使镜头和载物台距离约为0.5cm左右。
　　上升聚光器，使与载物台表面同样高。否则使用油镜时光线较暗。
　　左眼看目镜，调节反光镜镜面角度（反光镜有凹平两面，光线较强自然光源，宜用平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源，宜用凹面镜。）对光使全视野内为均匀的明亮度。凡检查染色标本时，光线应强；检查未染色标本时，光线不宜太强。可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线．
　　2．低倍镜观察。
　　检查的标本须先用低信镜观察，因为低倍镜视野较大，易发现目标和确定检查的位置。
　　（1）先将标本玻片置于载物台上，并将标本部位处于物镜的正下方，转动粗调节轮，下降物镜或上升载物台使物镜至标本0.5cm处。
　　（2）左眼看目镜，同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮，当在视野内出现物象后，改用细调节轮，上下微微转动，直至视野内获得清晰的物象。然后认真观察标本各部位，确定并将需进一步要观察的部位移视野中央，准备用高倍镜观察。
　　3．高倍镜观察；
　　将高倍镜转正至正下方，在转换接物镜时，需用眼睛在侧面观察，避免镜头与玻片相撞。然后由接目镜观察，再仔细调节光圈和聚光镜，使光线的明亮度适宜，同时再仔细正反两方向微转动细调节轮，直至获得清晰的物象后为止，找到最适宜于观察的部位。需进一步要观察的部位移视野中央，准备用油镜观察。
　　4．油镜观察：
　　（1）上升聚光器，全开虹彩光圈
　　（2）用粗调节轮提起镜筒或下降载物台，转动转换器将油镜转至镜筒正下方。在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。右手顺时针方向慢慢转动粗调节轮使镜筒下降或载物台上升，与此同时，从显微镜的侧面观察使油镜浸入油中，直到几乎与标本接触时为止。注意不要压到标本，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头。
（3）从接目镜内观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用粗调节轮将镜筒徐徐上升或将载物台徐徐下降，直到视野内出现物像为止，然后用细调节轮校正焦距。如油镜已离开油面而仍未见物象，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作至物象看清为止。
５．换片
观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油竟镜）转回到低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油竟镜）下换片，以防损坏镜头。
二、显微镜的保养
　　（1）油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再取一张擦镜纸，滴上少量的二甲苯擦拭，然后再取另一张新擦镜纸将镜头上残留的二甲苯擦净。否则粘固透镜的胶质会被二甲苯溶解，日久镜片易移位脱落。
　　（2）下降聚光器，打开虹彩光圈，使反光镜垂直于镜座，以免积聚灰尘。
　　（3）用绸布将镜身擦拭干净（切不可用手擦拭），除去灰尘、油污、水汽，以免生锈长霉。
　　（4）使显微镜的各部件恢复回原位，下降镜筒，使物镜呈“八”字形置于载物台上，然后将显微镜送回镜箱中。
　　（5）显微镜应存放在干燥阴凉的地方，不要放在强烈的日光下暴晒，霉雨季节应在显微镜箱内放置干燥剂（硅胶），如长时间不用，则光学部分应卸下放在干燥器中，以免受潮生霉。
　　（6）显微镜应严禁与挥发性药品或腐蚀性药品放在一起，如碘片、盐酸、硫酸等药品。
三、注意事项
　　1．拿取显微镜必须一只手拿着镜臂，一只手托着镜座，并保持镜身的上下垂直，应避免震动，轻放台上。切不可一只手提起，以防显微镜、反光镜功目镜坠落。
2．使用前应将镜身擦拭一遍、用擦镜纸将镜头擦净（切不可用手指擦抹）。若遇到镜台或镜头上有干香柏油，可用擦镜纸沾取少量二甲苯将其擦去。
3．使用时如发现显微镜操作不灵活或有损坏，不要擅自拆卸修理，应立即报告指导教师处理。
4．注意保护镜头，切不可压碎标本被片，损坏镜头
5．显微镜使用完毕，应登记显微镜使用卡经指导教师检查后放回镜箱。

光学显微镜的使用注意事项

（一） 显微镜的构造及各部名称

关于显微镜的结构与使用方法已于生物学和组织胚胎学课程中学过，在寄生虫学的学习中，要求进一步熟练使用。显微镜的构造及各部名称见图1。

（二） 显微镜的使用

利用自然光源镜检时，最好用朝北的光源，不宜3采用直射阳光；利用人工光源时，宜用日光灯的光源。

镜检时身体要正对实习台，采取端正的姿态，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

镜检时载物台不可倾斜，因为当在五套载物台倾斜时，液体或油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影响检查结果。

图1 显微镜

镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

显微镜的重光为对光，接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本时，光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等，均为自然光状态的物体，有大有小，色泽有深有浅，有的无色透明，而低倍、高倍接物镜转换较多，故须随着镜检时对不同标本和要求，需要随时调节焦距和光线，这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。

1． 对光：

（1）将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。

（2）拨动反光镜，调节至视野最亮无阴影。反光镜有平、凹两面，光源强时用平面，较暗时用凹面，需要强光时，将聚光器提高，光圈放大；需要弱光时，将聚光器降低，或光圈适当缩小。

（3）将待观察的标本置载物台上，转动粗调节器使镜筒下降至接物镜接近标本。于转动粗调节器的同时，须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本之间的距离。

（4）左眼于接目镜观察，同时左手转动粗调节，使镜筒徐徐上升以调节焦距，使视野内的物象看到上时即停，再调微调节器，至标本清晰为止。

2． 接物镜的使用及光线的调节：

显微镜一般具有三个接物镜，即低倍、高倍及油镜，固定于接物镜转换盘孔中。观察标本时，先使用低倍接物镜，此时，视野较大，标本较易查出，但放大倍数较小（一般放大100倍），较小的物体不易观察其结构。高倍接物镜放大的倍数较大（一般放大400倍），能观察微小的物体或结构。

寄生虫的蠕虫卵，微丝蚴，原虫的滋养体及包囊，昆虫的幼虫，均使用低、高倍镜。组织细胞内的原虫，则使用油镜。使用低、高倍镜观察，如在低倍镜下不能准确鉴定所见的物体或其内部构造时，则转高倍镜观察。使用油镜观察，一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。

3． 低倍、高倍、油镜头的识别：

（1）标明放大倍数10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.30。

（2）低倍镜最短，高倍镜较长，油镜最长。

（3）镜头前面的镜孔低倍镜最大，高倍镜较大，油镜最小。

（4）油镜头上常刻有黑色环圈，或“油”字。

4． 低倍镜换高倍镜的使用方法：

（1）光线对好后，移动推进器寻找需要观察的标本。

（2）如标本的体积较大，不能清楚查见其构造因而不能确认时，则将标本移至视野中央，再旋转高倍接物镜于镜筒下方。

（3）旋转微调节器至物象清晰为止。

（4）调节聚光器及光圈，使视野内的物象达到最清晰的程度。

5． 油镜的使用方法：

（1）原理：使用油镜观察时，需加香柏油，因为油镜需要进入镜头的光线多，但油镜的透气孔最小，这样进入的光线就少，物体不易看清楚。同时又因自玻片透过的光线，由于介质（玻片－空气－接物镜）密度（玻片：n=1.52，空气：n=1.0）不同而发生了折射散光，因此射入镜头的光线就更少，物体更看不清楚。于是采用一种和玻片折光率相接近的介质如香柏油，加于标本与玻片之间，使光线不通过空气，这样射入镜头的光线就较多，物象就看得清楚（图2）。

（2）油镜的使用：

a．将光线调至最强程度（聚光器提高，光圈全部开放）。

b．转动粗调节器使镜筒上升，滴香柏油1小滴（不要过多，不要涂开）于接物镜正下方标本上。

c．转动接物镜转换盘，使油镜头于镜筒下方。

d．俯身镜旁侧面在肉眼的观察下，转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内，轻轻接触玻片为止。

e．慢慢转动粗调节器，使油镜头徐徐上升至见到标本的物象为止。

f．转动微调节器，使视野物象达到最清晰的程度。

g．左手徐徐移动推进器，并转动微调节器以观察标本。

h．标本观察完毕后，转动粗调节器将镜筒升起，取下标本玻片。立即用擦镜纸将镜头上的香柏油擦净。

6． 注意事项：

（1）使用显微镜之前，应熟悉显微镜的各部名称及使用方法，特别应掌握识别三种接物镜之特征。

（2）寄生虫学实习中所观察的标本，大多数为无色和颜色较浅，因此必须注意光线的调节。

（3）新鲜标本观察时，须加盖玻片，以免标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜，同时可使标本表面匀平，光线得以集中，有利于观察。

（三） 显微镜的保养

图3 加用盖玻片后，标本表面匀平，光线得以集中，便于检查示意图

1．显微镜在从木箱中取出或装箱时，右手紧握镜臂，左手稳托镜座，轻轻取出。不要只用一只手提取，以防显微镜坠落，然后轻轻放在实习台上或装 入木箱内。

2．显微镜放到实习台上时，先放镜座的一端，再将镜座全部放稳，切不可使镜座全面同时与台面接触，这样震动过大，透镜和微调节器的装置易损坏。

3．显微镜须经常保持清洁，勿使油污和灰尘附着。如透镜部分不洁时，用擦镜纸轻擦，如有油污，先将擦镜纸蘸少许二甲苯拭去。

4．显微镜不能在阳光下暴晒和使用。

5．接目镜和接物镜不要随便抽出和卸下必须抽取接目镜时，须将镜筒上口净用布遮盖，避免灰尘落入镜筒内。更换接物镜时，卸下后应倒置在清洁的台面下，并随即装入木箱的置放接物镜的管内。

6．显微镜用完后，取下标本片，经聚光器降下，再将物镜转成“八”字形，转动粗调节器使镜筒下降，以免接物镜与聚光器相碰。

7．显微镜应放在干燥的地方，以防生霉。

二、体视显微镜的使用

体视显微镜能获得立体感觉，其原理是由于通过两个接目镜对物体从不同的方向在人眼的网膜上形成的象而产生的。本显微镜具有倾斜成45°的双筒，通过双筒可以观察到宽广视野中正立的具有立体感的物象。其中右侧接目镜筒上有视度调节圈的位置，如观察者双眼视度具有差异，可以先调节显微镜使左眼成像清晰，然后旋转右侧视度调节圈至右眼成像清晰。双筒可以在一定角度内相对地转动以适应工作者两眼间距离。本显微镜的工作距离为100mm，在方形镜身两侧有手轮可旋转，利用它的转动可在不变更工作距离情况下更换显微镜放大倍数。显微镜总放大倍数的读数，在使用25×接目镜时，以右侧数盘上数字为准，而使用6.3×接目镜时，则以左侧数盘上的数字为准。

三、其它仪器器材的使用与保养

除显微镜、体视显微镜以外，寄生虫学实习课用的器材、仪器尚有许多，在此我们不一一赘述，每次实习课辅导教师将向我们介绍，这里仅将这些仪器、器材分类别略作一些使用原理的介绍。

（一）玻璃仪器、器材：使用时轻拿轻放，防止破碎，用毕应清洗干净、凉干、烘干以防生霉。

（二）金属仪器、器材：勿接触或少接触酸性、碱性物品，用毕应洗刷、擦净、凉干、烘干以防腐蚀生锈.

放置显微镜:右手托镜架,左手握镜臂,把显微镜放在偏左方,离桌边约7cm

镜检时身体要正对实习台，采取端正的姿态，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

镜检时载物台不可倾斜，因为当在五套载物台倾斜时，液体或油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影响检查结果。
利用自然光源镜检时，最好用朝北的光源，不宜采用直射阳光；利用人工光源时，宜用日光灯的光源。

对光:眼睛对准目镜观察,转动反光镜,反光镜应对准光源,直到眼睛看到一团清晰的白色视野为止

看标本时,应把标本放在载物台上,用玻片夹夹住,应慢慢转动粗准焦螺旋,直到物镜离标本约2 cm,眼睛对准目镜观察,观察时,反方向转动粗准焦螺旋,看到清晰的图象后,再转动细准焦螺旋,使图象更清晰
镜检时载物台不可倾斜，因为当在五套载物台倾斜时，液体或油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影响检查结果

说明书上更详细。

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