BCA法蛋白质定量,简便灵敏

作者&投稿:不纨 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
~ 揭示BCA法蛋白定量的奇迹:灵敏、快速且不失准确性

在生物科学研究的诸多领域,BCA(Bicinchoninic Acid)法因其卓越的灵敏度和便捷性而独树一帜。这是一种基于双缩脲反应的蛋白质浓度测定神器,其原理是蛋白质在碱性条件下将Cu2+还原成Cu+,形成一种特征性的紫蓝色复合物,其吸光值在562nm处飙升,直接反映了蛋白质浓度的增减。

简便操作,高效测定

BCA蛋白浓度测定法的魅力在于其操作简便性。不论是比色皿法还是微孔板法,Abbkine提供的试剂盒都为用户带来了极大的便利。比色皿法虽然需要100μL的蛋白样品,但1:20(v/v)的工作液比例确保了干扰物质影响降至最低。微孔板法则更加轻巧,只需10-25μL的样品,操作起来如行云流水。

然而,尽管1:8(v/v)的比例对某些干扰物质有所限制,Abbkine的BCA蛋白定量试剂盒#KTD3001系列以其卓越性能,依然提供三种规格供选择,满足不同实验需求。

卓越性能,精准定量

BCA法的亮点在于其强大的性能特点。首先,它的灵敏度极高,最小可检测到0.2μg蛋白质,即使在10μg/mL的浓度下也能精准锁定。其次,它以惊人的速度超越了传统Lowry法,检测时间缩短4倍,让实验时间得以优化。线性范围广泛,从20-2000μg/mL,确保了数据的准确性。

然而,使用BCA法时需谨记,颜色的变化会随时间增长,且反应速度受温度影响。因此,保持恒定的定时和温度至关重要,以确保每一次测定的精确度。

维护试剂,确保结果

BCA试剂A和B的保存需格外注意,若发现沉淀或细菌污染,务必在37ºC温育并搅拌溶解,以免影响实验结果。规范的操作流程,精确的上样量,以及每次测定前制作标准曲线,都是保证BCA法蛋白定量结果稳定的关键步骤。

最后,为了实验安全,务必穿着实验服,戴上一次性手套,确保操作过程无菌无污染,这既是对自己负责,也是对实验结果的尊重。


甲胎蛋白AFP偏高?
怀孕的时候甲胎蛋白升高是很正常的,甲胎蛋白虽然是原发性肝癌的重要标志物,那是因为甲胎蛋白应该在胚胎期出现,在胎儿出生后以后甲胎蛋白的水平就会下降到正常的水平,如果出生后的人甲胎蛋白测值较高,那就说明有问题了。孕检其中包括检测甲胎蛋白和游离绒毛膜促性腺激素这两项指标来结合你的孕期,...

甲胎蛋白21,医院给出的范围是0--10,请问严重吗
因此,肿瘤标志物可在肿瘤病人的组织、体液和排泄物中检出,作为检测诊断肿瘤的标志。肿瘤标志物包括:肿瘤抗原,肿瘤相关糖链抗原,肿瘤酶学标志,癌基因,抑癌基因及其产物。目前,应用肿瘤诊断主要有甲胎球蛋白(a-FP),癌胚抗原(CEA),组织多肽抗原(TPA),糖链抗原(CA-125,CA19-9)等。甲胎...

如何提取血清总蛋白
用裂解液(9 mol\/L 尿素、4% CHAPS、 65 mmol\/L DTT和cocktail酶抑制剂)进行复溶,并采用考马斯亮蓝法进行蛋白质定量。1.4.2 等电聚焦 自-20 ℃取出的胶条,室温下平衡10 min,以500 μg上样量在每份样本中加入上样缓冲液(8 mol\/L尿素、2% CHAPS、1% Bio-lyte和1% TBP)以及标准蛋白...

食物中的热量和脂肪含量是用什么仪器测定出来的
我们建立了气-液联用色谱测定脂肪酸,该法很好地解决了以往气相色谱在脂肪酸分析中存在的不能准确定量的问题,并确立了脂肪酸系数,根据该系数可实现食品中饱和脂肪与不饱和脂肪含量的准确定量(见附件6)。(3) 总能量的检测方法建立了弹式量热法测定食品的热量,该法通过减去每克蛋白质一定的热量值后,可校正不完全...

动物营养与饲料学考研考试科目有哪些?
初试科目:思想政治理论,英语,化学或高等数学,动物生理学或动物生物化学。复试科目:动物营养学与饲料学或者家畜环境卫生与畜牧学。推荐参考书目:1,《基础生物化学》(第二版),郭蔼光主编, 高等教育出版社,2009年版 2,《生物化学实验》,萄琳,单志主编,西南交通大学出版社,2009年版 ...

什么是皮革加工的蛋白质饲料添加剂叫什么
近年来国内已有少量利用加工成蛋白粉饲料商品。3.水解鞣皮屑粉的加工工艺 这一工艺又称为“灰碱法”。在制革工业中需要使用铬酸盐 和食盐、硫化钠等无机盐,因此,在加工饲料用皮革蛋白粉时,首先需将皮革下脚料用水浸 泡、清洗约 10h,除去无机盐,再加入 Ca(OH)2,在一定温度、压力和时间下,进行...

间接抗球蛋白试验的原理是什么?
间接抗球蛋白试验的原理是不完全抗体多是IgG抗 体,该抗体能与相应抗原结合,由于只能与 一方红细胞抗原的决定簇结合,而不能同时与双方红细胞抗原的决定簇连接,在一般条件下不出现可见反应。抗人球蛋白抗体作为第二抗体达到桥梁的作用,链接与红细胞抗原结合的特异性抗体,使红细胞凝集。抗人球蛋白试验...

饲料中的DM% CP% CEE% CF% NDF% ADF% ADL% CA%等分别是什么意思...
1、DM%:表示饲料中干物质的百分比含量。DM是Dry matter(干物质)的缩写。2、CP%:表示饲料中粗蛋白的百分比含量。CP是crude protein(粗蛋白)的缩写。3、CEE%:表示饲料中粗脂肪的百分比含量。4、CF%:表示饲料中粗纤维的百分比含量。CF是Crude fiber(粗纤维)的缩写。5、NDF%:表示饲料中中洗涤...

宝宝吃了含有三聚氢胺的奶粉会出现哪些症状
因此添加过三聚氰胺的奶粉就很难检测出其蛋白质不合格了这就是三聚氰胺的假蛋白。编辑本段七、合成工艺 三聚氰胺最早被三聚氰胺李比希于1834年合成,早期合成使用双氰胺法:由电石(CaC2)制备氰胺化钙(CaCN2),氰胺化钙水解后二聚生成双氰胺(dicyandiamide),再加热分解制备三聚氰胺。目前因为电石的...

胶原蛋白和钙的区别?
1、定义不同 胶原蛋白是生物高分子,动物结缔组织中的主要成分,也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白。钙是一种金属元素,符号Ca。钙是生物必需的元素。对人体而言,无论肌肉、神经、体液和骨骼中,都有用钙离子结合的蛋白质。2、特性不同 胶原蛋白具有良好的生物相容性、可生物降解性以及...

莆田市17633892779: 请问BCA法测蛋白浓度的灵敏度如何?能检测到多低的浓度范围哪?
鄢琦宜力: BCA蛋白浓度检测是一个实验,是根据吸光值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下,蛋白将Cu2 还原为Cu , Cu 与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度. 常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响.实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒.

莆田市17633892779: bca试剂盒测蛋白浓度 -
鄢琦宜力: Bicinchoninic acid (BCA )法是在世界上常用的蛋白浓度检验方法之一BCA法基础上改进而成.其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu 2+ 络合并将Cu 2+ 还原成Cu + .两分子BCA与一个Cu + 螯合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度.组成与储存:组分名称 规格 保存 BCA Reagent 100ml 2-8℃ Cu Reagent 3.0ml 2-8℃ BSA标准液5 mg/ml 1ml -20ºC冻存 可进行500T微板(microplate)测定或50T2ml比色杯测定.

莆田市17633892779: BCA蛋白定量和 Bradford法蛋白定量有哪些区别 -
鄢琦宜力: 一、原理不同 BCA蛋白定量:碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,吸光强度与蛋白浓度成正比.测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度. Bradford法蛋白定量:在一定...

莆田市17633892779: BCA蛋白定量法的原理BCA定量原理是什么,定量完后曲线怎么制作 -
鄢琦宜力:[答案] 原理简介 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成.众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价

莆田市17633892779: BCA蛋白检测方法的原理是什么? -
鄢琦宜力: 原理简介 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成.众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA ...

莆田市17633892779: BCA蛋白浓度检测的实验操作 -
鄢琦宜力: 绘制标准2113曲线: 取96孔酶标板,按下表5261加入试剂. 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 标准蛋4102白溶液(μl)蒸馏水1653(μl) BCA试剂(μl) 蛋白质浓度(mg/ml) 0 20 200 0 1 19 200 0.025 2 18 200 0.05 4 16 200 0.1 8 12 200 0.2 12 8 200 0.3 ...

莆田市17633892779: 蛋白定量,有哪位用过碧云天的BCA试剂盒 -
鄢琦宜力: 用杭州昊鑫生物独家代理的艾德莱BCA蛋白定量试剂盒比较好 1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典Lowry法快4倍而且更加方便. 2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl . 3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80. 4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系. 5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量.

莆田市17633892779: 蛋白质含量的测定都有哪几种方法,适用情况以及优缺点 -
鄢琦宜力: ①凯氏定氮法 原理:蛋白质平均含氮量为16%.当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量. ②双缩脲...

莆田市17633892779: 蛋白质浓度测定方法有哪些?
鄢琦宜力: 目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法.另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法); 还有近来广为应用的蛋白定量方法——BCA法.其中Bradford法和Lowry法灵敏度较高,比紫外吸收法灵敏10~20倍,比Biuret法灵敏100倍以上.定氮法虽然比较复杂,但较准确,往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质.

莆田市17633892779: 如何检测蛋白质含量 -
鄢琦宜力: BCA蛋白定量~先绘制标准曲线~

本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网