骨髓细胞染色常用什么方法，各是用于何种检测。

染色的方法有哪些，比较各种染色方法的检测下限~

染色的方法有哪些，比较各种染色方法的检测下限
细胞染色常用方法主要包括以下几个即：1.简单染色法，常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;2.革兰氏染色法，主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程;3.瑞氏染色法，瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;4.吉姆萨染色法，吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;6.细胞免疫荧光染色法，免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。

对细胞膜染色需要的染料如下：
DiO(细胞膜绿色荧光探针)，呈现绿色荧光。
荧光素双醋酸酯（FDA），绿色荧光。
细胞染色方法：
PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色


是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测. 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色）。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。

annexin-v染色


细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸
(Annexin-V,PS)外翻 ,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。




JC-1染色


JC-1是一种阳离子染料，可以在线粒体内聚集，低浓度时主要以单体(monomer)存在，发射光以绿光(～525nm)为主；而在高浓度时则可以形成多聚体(aggregation)，发射光以红光(-590nm)为主。线粒体本身存在一定的极性
(polarization)，其外膜为负极，内膜为正极。电位差由Ca2+、Na+和H+流调控。当线粒体状态良好时对JC-l摄取量少，因而在线粒体内主要以单体的形式存在绿光强度/红光强度的比值较高。在线粒体发生去极化(depolarization)时，线粒内JC-l的浓度较高，多以多聚体的形式存在，绿光强度/红光强度的比值降低。JC-1染色的绿光强度/红光强度仅取决于线粒体的膜电势(membrane potential)，而与线粒体的形态、体积和密度都无关，因而能更好地反映线粒体的功能状态。由于凋亡发生的早期存在线粒体的去极性，因此，JC-1染色被用于检测凋亡的早期发生。其实验方法如下。
JC-l染色非常简单。首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液(1～5mg/ml)，储存于-20℃，用时以培养液稀释至10ug/ml终浓度。对贴壁细胞可以直接弃去培养液，漂洗细胞后直接加入染色液，10-30min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。线粒体状态好时细胞以绿色为主，当红光信号增强时，红绿相叠，以橙色为主。该染色运用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测，收集红/绿信号强度，计算其强度比。


钙黄绿素-AM(Calcein-AM):


Calcein -AM本身并不是荧光分子，但通过活细胞内的酯酶作用，Calcein -AM能脱去AM基，产生的Calcein能发出强绿色荧光（激发：490 nm，发射：515 nm）。因此Calcein -AM仅对活细胞染色



细胞活力鉴定——台盼蓝染色法


原理：
细胞损伤或死亡时，台盼蓝可穿透变性的细胞膜，与解体的DNA 结合，使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。
用品：
1. 4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。 2. 吸管、血细胞计数板、显微镜
步骤：
1、制备单细胞悬液。并作适当稀释（106 细胞/ml） 2、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。 3、计数：在三分钟内，用计数板分别计数活细胞和死细胞
台盼蓝染色原理
通常认为细胞膜丧失完整性，细胞即可被认为已经死亡。台盼蓝(Trypan Blue)是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。依据此原理，细胞经台盼蓝染色后，可通过显微镜，直接镜下计数或拍照后计数，实现对细胞存活率比较精确的定量分析。
试述台盼蓝染发鉴别死活细胞的原理，试分析染色时间过长本来是活细胞也被染色的原因。死细胞的细胞膜无屏障作用，台盼蓝马上进入细胞而显蓝色。活细胞细胞膜有选择透性，对台盼蓝的透性小，进入细胞慢。若染色时间过长，台盼蓝可能通过胞吞或胞饮作用进入细胞。

骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂配制、试验的时间、温度、最后漂洗的手法复染时间的控制等步骤上,对细胞内外铁染色的方法进行探讨,摸索出了一套较满意的染色方法,现介绍如下。

【作者单位】： 黑龙江省宝泉岭农场医院
【关键词】： 骨髓细胞 铁染色 染色方法 组织化学 试剂配制 玻片处理 氰化钾 贫血分类 普鲁士兰 染色法
【分类号】：R361
【正文快照】：
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法。一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节同题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂

---

黄山区13771129636： 骨髓细胞染色常用什么方法,各是用于何种检测. - ？
函伊口腔： 骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍....

黄山区13771129636： 常用的骨髓涂片染色的方法有哪些? ？
函伊口腔： 瑞氏染色法、POX染色、NAP染色、酸性磷酸酶(ACP)染色、特异性酯酶(SE)染色、PAS染色、铁染色.

黄山区13771129636： 求各种生物学染色法？
函伊口腔： (1)巴氏染色法:本法染色特点是细胞具有多色性颜色,色彩鲜艳多彩.涂片染色的透明性好,胞质颗粒分明,胞核结构清晰,如鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色;角化细胞显粉红色;而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色,适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响.此方法的缺点是染色程序比较复杂. (2)苏木精—伊红(hemotoxylin eosin,HE)染色法:该方法染色透明度好,核与胞质对比鲜明.染色步骤简便,效果稳定.适用于痰液涂片,觖质核呈紫蓝色,胞质淡玫瑰红色,红细胞呈淡朱红色. (3)瑞特—吉姆萨染色法(wrightgiemsaatain);本方法多用于血液,骨髓细胞学检查.胞质内颗粒与核安危质结构显示较清晰.操作简便.

黄山区13771129636： 瑞氏染色步骤? - ？
函伊口腔： 操作步骤:1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上,并让染液覆盖整个标本染色1min;2.再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面(滴加量为A液的2-3倍),以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色3-10min.(染血片时...

黄山区13771129636： 骨髓细胞涂片和骨髓活检 - ？
函伊口腔： 骨髓细胞涂片是判断有核细胞增生程度,骨髓涂片采用铁染色及不同的组化染色等可为缺铁性贫血及各类白血病提供诊断依据.低倍镜下选择细胞分布均匀部位观察骨髓片有核细胞增生情况,根据骨髓片中有核细胞的密度或有核细胞与成熟红细...

黄山区13771129636： 血细胞化学染色方法学评价？
函伊口腔： 血液学-骨髓细胞学、血细胞化学染色检查 项目名称 简写 临床意义 样本要求 方法学 收费 报告周期骨髓细胞 形态学诊断 用于依靠形态学确诊的血液病诊断以及疗效判断 合格骨髓片2张 镜检 100 五至十个工作日出报告过氧化酶 染色 POX 用于白...

黄山区13771129636： 下列染色法特别适用于血细胞涂片染色的是() - 上学吧找答案？
函伊口腔： 免疫细胞化学染色是将血液、骨髓液、浆膜腔积液等等各种体液组织制成的涂片和骨髓等组织的切片经各种单克隆抗体的标定和常用的过氧化物酶或碱性磷酸酶显色后对白血病细胞直接镜检,以确定细胞类型.免疫组织化学染色方法繁多,可根...