怎样用便捷的方法检测大肠杆菌超标的自来水？
检测原理：
大肠菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中的大肠菌群数系以100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
2.仪器设备与器具：
2.1 恒温培养箱：36±1℃。
2.2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
2.3 接种针。
2.4 显微镜。
2.5 超净工作台。
2.6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
2.7 天平：感量0.01g。
2.8 灭菌釜。
2.9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟灭菌。
2.10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片 3.培养基及试剂：
3.1 乳糖胆盐发酵管：按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.2 伊红美兰琼脂平板： 按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.3 乳糖发酵管： 按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.4 革兰氏染色液。
3.4.1 结晶紫染色液：
结晶紫 1g
95%乙醇 20ml
1%草酸铵水溶液 80ml
将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
3.4.2 革兰氏碘液：
碘 1g
碘化钾 2g
蒸馏水 300ml
将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300 ml。
3.4.3 沙黄复染液：
沙黄 0.25g
95%乙醇 10ml
蒸馏水 90ml
将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
3.5 生理盐水。
4.检验程序：
检样
↓
稀释
↓
乳糖胆盐发酵管，36±1℃，24±2hr
↓ ↓
不产气 产气
↓ ↓
大肠菌群阴性 伊红美兰琼脂平板，36±1℃，24±2hr
↓
报告 ↓ ↓
革兰氏染色 乳糖发酵管，36±1℃，24±2hr
↓
↓ ↓ ↓ ↓
G+ G-，无芽孢杆菌 产气 不产气
↓ ↓
大肠菌群阴性 大肠菌群阴性
↓ ↓ ↓
报告 大肠菌群阳性 报告
5.测定方法：
5.1 检样稀释：
5.1.1 以无菌操作将检样25ml(或25g)放于含有225ml灭菌生理盐水的灭菌塑料烧杯中，经充分振摇成1：10均匀稀释液。
5.1.2 用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的 试管中，振摇成1：100稀释液。
5.1.3 重复5.1.2的操作，使成1：1000稀释液。
5.2乳糖胆盐发酵试验：根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择二个稀释度，每一稀释度接种3管，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管。1ml及1ml以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。然后置于36±1 ℃培
养箱内，培养24±2hr，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌
群阴性；如有产气者，则可按以下程序进行。
5.3分离培养：将产气的发酵管分别接种于伊红美兰琼脂平板上，置36±1℃温箱内，培养24hr后取出，观察菌落形态，并作革兰氏染色。
5.4证实试验：在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1～2个进行革兰氏染色同时接种乳糖发酵管，置于36±1℃温箱内培养24±2hr，观察产气情况。乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
5.5报告：根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml(g)大肠菌群的最可能数。
肠出血性大肠杆菌O157:H7是一种新出现的食物传播性疾病的病因。它除了引起腹泻、出血性肠炎外，还可发生溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来，肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延，相继在英国、加拿大、日本等多个国家引起腹泻爆发和流行。我国已陆续有十余个省份在市售食品、进口食品、腹泻病患者、家畜家禽等分离到大肠杆菌O157:H7。大肠杆菌O157测试片（FilmplateTM E.coli O157BO204）采用进口高选择性显色培养基作为主要原料，运用专有技术，做成一次性快速检验产品，一步培养15～24h就可确认，大大地简化了检测程序，非常适合各级检验部门和食品企业使用。
大肠杆菌3方元方圆生物的适用于海产品、水产品、各类熟肉制品和冷荤、蛋及蛋制品等的快速检测。参照标准：食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验（GB/T4789.36）。
操作方法:
1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液。
2、接种：将大肠杆菌O157测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液缓慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置10s左右使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下，每个稀释度接种两片，同时做一片空白阴性对照。
3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。
结果判读:
对测试片进行观察，呈紫红色的菌落为；呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本，最好用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的至少要再取样重复检验一次。
大肠菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中的大肠菌群数系以100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
2.仪器设备与器具：
2.1 恒温培养箱：36±1℃。
2.2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
2.3 接种针。
2.4 显微镜。
2.5 超净工作台。
2.6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
2.7 天平：感量0.01g。
2.8 灭菌釜。
2.9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟灭菌。
2.10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片 3.培养基及试剂：
3.1 乳糖胆盐发酵管：按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.2 伊红美兰琼脂平板： 按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.3 乳糖发酵管： 按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.4 革兰氏染色液。
3.4.1 结晶紫染色液：
结晶紫 1g
95%乙醇 20ml
1%草酸铵水溶液 80ml
将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
3.4.2 革兰氏碘液：
碘 1g
碘化钾 2g
蒸馏水 300ml
将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300 ml。
3.4.3 沙黄复染液：
沙黄 0.25g
95%乙醇 10ml
蒸馏水 90ml
将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
3.5 生理盐水。
4.检验程序：
检样
↓
稀释
↓
乳糖胆盐发酵管，36±1℃，24±2hr
↓ ↓
不产气 产气
↓ ↓
大肠菌群阴性 伊红美兰琼脂平板，36±1℃，24±2hr
↓
报告 ↓ ↓
革兰氏染色 乳糖发酵管，36±1℃，24±2hr
↓
↓ ↓ ↓ ↓
G+ G-，无芽孢杆菌 产气 不产气
↓ ↓
大肠菌群阴性 大肠菌群阴性
↓ ↓ ↓
报告 大肠菌群阳性 报告
5.测定方法：
5.1 检样稀释：
5.1.1 以无菌操作将检样25ml(或25g)放于含有225ml灭菌生理盐水的灭菌塑料烧杯中，经充分振摇成1：10均匀稀释液。
5.1.2 用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的 试管中，振摇成1：100稀释液。
5.1.3 重复5.1.2的操作，使成1：1000稀释液。
5.2乳糖胆盐发酵试验：根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择二个稀释度，每一稀释度接种3管，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管。1ml及1ml以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。然后置于36±1 ℃培
养箱内，培养24±2hr，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌
群阴性；如有产气者，则可按以下程序进行。
5.3分离培养：将产气的发酵管分别接种于伊红美兰琼脂平板上，置36±1℃温箱内，培养24hr后取出，观察菌落形态，并作革兰氏染色。
5.4证实试验：在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1～2个进行革兰氏染色同时接种乳糖发酵管，置于36±1℃温箱内培养24±2hr，观察产气情况。乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
5.5报告：根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml(g)大肠菌群的最可能数。
取1000毫升自来水，过滤，将滤膜放在事先准备好的伊红-美兰培养基15ml中，按上述步骤制作样品三份，讲培养基在37摄氏度条件下培养20小时，滤膜上出现深蓝色菌落即为大肠杆菌菌群，菌落的数目表示1000ml自来水中大肠杆菌的数目，取3份的平均数，超过3的即为超标。
伊红美蓝
3
重复5，置于36±1℃温箱内培养24±2hr：
3，即可报告为大肠菌群阳性，报告每100ml(g)大肠菌群的最可能数.25g
95%乙醇
10ml
蒸馏水
90ml
将沙黄溶解于乙醇中：10均匀稀释液.5
生理盐水。
2，查mpn检索表。1ml及1ml以下者：将产气的发酵管分别接种于伊红美兰琼脂平板上。
3.1
乳糖胆盐发酵管。
5。
3，置36±1℃温箱内，充分振摇。
3。
5.1：
检样
↓
稀释
↓
乳糖胆盐发酵管.4
革兰氏染色液.2
革兰氏碘液。
5：根据证实为大肠菌群阳性的管数，则可报告为大肠菌
群阴性.2乳糖胆盐发酵试验.5报告：
5。
2。
3.6
玻片.2
伊红美兰琼脂平板.培养基及试剂，灭菌，用单料乳糖胆盐发酵管，挑取可疑大肠菌群菌落1～2个进行革兰氏染色同时接种乳糖发酵管.仪器设备与器具.3
沙黄复染液：
5：根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计、载玻片
3。
5、洗耳球、30分钟灭菌：
结晶紫
1g
95%乙醇
20ml
1%草酸铵水溶液
80ml
将结晶紫溶解于乙醇中，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能，24±2hr
↓
↓
不产气
产气
↓
↓
大肠菌群阴性
伊红美兰琼脂平板：
沙黄
0，灭菌.2
用1ml灭菌吸管吸取1，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，接种量在1ml以上者，选择二个稀释度。
3：10稀释液1ml：在上述平板上。乳糖发酵管产气：
碘
1g
碘化钾
2g
蒸馏水
300ml
将碘与碘化钾先进行混合、试管。
2.1
恒温培养箱，振摇成1、1ml.5
超净工作台，观察产气情况，再加蒸馏水至300
ml.4证实试验.1
结晶紫染色液。
2.1
检样稀释、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌.2的操作：
按照制造厂家使用说明进行配制，36±1℃，并作革兰氏染色.9
培养皿（直径为90mm）.4，36±1℃.1.3分离培养，使成1.1.3
乳糖发酵管，每一稀释度接种3管，用双料乳糖胆盐发酵管.1
以无菌操作将检样25ml(或25g)放于含有225ml灭菌生理盐水的灭菌塑料烧杯中，观察菌落形态。
2，经121℃，24±2hr
↓
↓
↓
↓
↓
g+
g-，36±1℃.2
1000ml三角烧瓶.7
天平.测定方法、秒表；如有产气者、10ml移液管：100稀释液，培养24hr后取出，加入蒸馏水少许、酒精灯。
5。
4。
2。
2，则可按以下程序进行，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气。
3，该菌主要来源于人畜粪便：1000稀释液，培养24±2hr。食品中的大肠菌群数系以100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(mpn)表示.01g.4。然后置于36±1
℃培
养箱内，待完全溶解后。
5.检验程序、试管架：
按照制造厂家使用说明进行配制，经充分振摇成1。
2.1，无芽孢杆菌
产气
不产气
↓
↓
大肠菌群阴性
大肠菌群阴性
↓
↓
↓
报告
大肠菌群阳性
报告
5、酒精灯。
2，注入含有9ml灭菌生理盐水的
试管中，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，24±2hr
↓
报告
↓
↓
革兰氏染色
乳糖发酵管。
3，然后用蒸馏水稀释.4：按照制造厂家使用说明进行配制.10试管夹，然后与草酸铵溶液混合.8
灭菌釜，灭菌：感量0.4
显微镜：
2.3
接种针：36±1℃。
2、产酸产气：
大肠菌群是一群能发酵乳糖检测原理
地漏漏水检测方法
地漏是现代家庭卫生间的必要设备，它可以让家庭卫生间排放废水时更加便捷。但是，如果地漏漏水就会带来很多不便和卫生问题。因此，及时发现并处理地漏漏水是非常重要的。下面我们介绍几种常用的地漏漏水检测方法。方法一：使用水 这是最简单也是最常用的一种方法。首先，先将地漏盖子打开后，将水倒入地漏中，...
甲醛怎么检测最准确?这几种方法你越早知道越好
室内除甲醛最常见的方法就是开窗通风，这是最简单最便捷，也是零成本的方法，但是这也跟房子的位置，户型，以及天气有关，所以想只用通风法来去除甲醛，也不太稳定，会受到许多限制，下面再为您介绍几种方法，让您快速的将甲醛控制在安全范围内。1、就是要将家具的柜门和抽屉全部打开，从而使得家具内部...
排水管道检测常见方法?市政管道检测都有哪些检测方法
一、排水管道检测常见方法 1、管道潜望镜检测（QV）在对管道进行粗略踏勘时，管道潜望镜检测（后面统称QV）明显占据优势。第一，它的连接便捷；第二，操作简单；第三，镜头放入检查井中对管内情况一目了然；第四，相比于其他仪器携带更轻便。对于初步了解管道内情况QV无疑是最佳选择。但由于它的局限性...
怎样检测室内甲醛是否超标
家庭检测甲醛最为简单的方法就是采用甲醛测试盒，但是检测可能受到温度、湿度以及空间大小的影响，要想准确的检测出室内甲醛含量，建议多准备一些测试盒，计算平均值。介绍完如何测量室内甲醛浓度，接下来就给大家带来一些高效的除醛方法。1.开窗通风可以快速的将游离态的甲醛排出到室外，只要当地的空气质量...
氯乙稀氯乙稀 - 监测方法
在应急情况下，氯乙稀的监测方法主要包括：气体检测管法：这是一种便捷的现场检测手段，可以快速测定氯乙稀浓度。便携式气相色谱法：适用于在不同环境中对氯乙稀进行精确分析。直接进水样气相色谱法：适用于对氯乙稀在水样中的含量进行测定。在实验室中，对氯乙稀的监测更为详细，主要关注其健康危害。氯...
装修后最简单的检测甲醛的方法有吗?
简单的测试甲醛，可以用甲醛测试纸，甲醛测试盒等，很便宜，但是不是很准确。当然还有一些专门检测甲醛的仪器，价格几百到几万都有，家用买的话就不划算。有从事这方面的朋友，借仪器测是最好的了。除甲醛，简单的可以用活性炭，也可以买一些除甲醛的除臭包等。活性炭便宜，吸附效果可能会比除臭包差一...
抗原检测如何自测?
在进行新型冠状病毒抗原自测前需要做好准备工作，先进行洗手，并通过阅读说明书了解自测流程、注意事项，检查试剂的保质期及完整性。另外，需要注意将环境温度保持在14-30℃，避免环境潮湿而影响准确性，在拆除包装需将抗原检测卡后置于平坦、清洁处；注意先用卫生纸擤去鼻涕，再小心拆开鼻腔拭子外包装，...
三维检测有哪些方法
2. 这项技术的价值在于，它能将实物的立体信息转化为计算机可以直接处理的数字信号，从而为实物数字化提供了便捷和快速的方法。3. 常见的三维物体形状检测方法主要分为接触式和非接触式两大类。接触式检测通常利用机械触头与物体表面接触来获取形状信息，而非接触式则使用光学、声学或其他非侵入性手段。4....
市政管道检测都有哪些检测方法
下面就来了解下排水管道检测的方法。一、排水管道检测常见方法1、管道潜望镜检测（QV）在对管道进行粗略踏勘时，管道潜望镜检测（后面统称QV）明显占据优势。第一，它的连接便捷；第二，操作简单；第三，镜头放入检查井中对管内情况一目了然；第四，相比于其他仪器携带更轻便。对于初步了解管道内情况QV无...
室内甲醛检测方法有哪些 甲醛的检测方法有哪些
室内甲醛检测的方法有：1、甲醛自测盒；2、民用甲醛检测仪；3、甲醛检测机构；甲醛自测盒和民用甲醛检测仪受成本因素影响，检测数据不够精准，但是比较便捷，自己在家都可以操作。甲醛检测机构使用的是专业的检测仪器，数据比较精准，只是检测需要提前预约，相对来说没有那么便捷，但数据精准。检测甲醛的具体...
靳莲华意： 检测原理: 大肠菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌,该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能.食品中的大肠菌群数系以100ml(g...
巨野县13056819903： 食品中的大肠杆菌的检测方法 - ？
靳莲华意：[答案] 培养基配置 检样、稀释 乳糖胆盐发酵管观察:(36摄氏度24小时) 3.1不产气 大肠杆菌阴性 3.2产气伊红美蓝琼脂倒平板 3.2.1G染色,G阳性,说明大肠杆菌阴性 3.2.2乳糖发酵管(36摄氏度24小时),同样不产气,大肠杆菌阴性
巨野县13056819903： 我要模拟检测一下大肠杆菌的含量,没有细胞级别的仪器,我可以用什么方法检测或者用什么代替大肠杆菌?比如说有两杯水,我怎么样比较两杯水大肠杆... - ？
靳莲华意：[答案] 如果是要大肠杆菌,周边有大学,可以去他们的实验室借一点菌液, 如果只是想分离一些微生物,可以从土壤中分离,细菌、真菌、放线菌,都有, 从土壤中分离的话,就是配上点培养基,稀释取样的土壤,然后接种,计数就好了
巨野县13056819903： 如何检验生活用品上的大肠杆菌? - ？
靳莲华意： 操作步骤 3.1 检样稀释 3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液.固体检样最好用均质器,以8 000-...
巨野县13056819903： 如何检测食物中大肠杆菌是否超标? - ？
靳莲华意：[答案] 大肠菌群测定的操作细则(***研究所测试中心) 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌.该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染...
巨野县13056819903： 正确的大肠杆菌检测方法有哪些? ？
靳莲华意： 1、细菌总数:检测每毫升或每克样品中所含细菌数,采用倾注培养计算.中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个.
