酵母核糖核酸的分离和鉴定。实验原理
1.磷酸 磷酸与钼酸铵试剂作用生成黄色磷钼酸，磷钼酸中的钼在有还原剂存
在时被还原成蓝色的钼蓝。据此呈色反应即可鉴定磷酸的存在。
2.嘌呤碱 根据嘌呤碱能与硝酸银产生乳白色的絮状嘌呤银化合物而鉴定。
3.戊糖 核糖经浓盐酸或浓硫酸作用生成糠醛，后者能与3，5二羟甲苯缩合而形成绿色化合物。脱氧核糖在浓酸中生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，与二苯胺作用生成蓝色物 。
定磷试剂： 按顺序A：B：C：蒸馏水＝1：1：1：2（V/V）混匀，现配。 A、17% H2SO4： 将17ml浓硫酸缓缓加入83ml水中。 B、2.5%（NH4）6Mo7O24：2.5g（NH4）4Mo2O7溶于100ml蒸馏水中。 C、10%Vc：10g Vc溶于100ml蒸馏水中，用棕色瓶贮存。颜色呈淡黄色时可以使用，如呈深黄或棕色则失效。
、RNA组分的鉴定（试管内反应）： ① 嘌呤碱：
水解液1ml+过量浓氨水+1ml AgNO3溶液→观察溶液变化。 ② 核糖：
水解液1ml+ FeCl3-浓HCl 2 ml+苔黑酚溶液0.2ml，水浴加热→观察溶液颜色。 ③ 磷酸：
水解液1ml+定磷试剂1ml，水浴加热→观察溶液颜
1. 总是要戴着手套。
2. 总是要用不含RNA酶的样品管、移液器枪头、塑料容器和溶液。
3. 总是要把RNA储藏液分装到不含RNA酶的容器中，这样你才不会污染到储藏液。
4. 在处理RNA时，或者保持样品管置于冰盒，或者置于超过50°C的水浴中。
一定要几乎所有容器用DEPC水处理，电泳检测槽也不例外。
一、 实验目的
1、掌握酵母RNA提取的方法。
2、了解核酸的组成。
3、掌握鉴定核酸组分的方法和操作。
二、 实验原理
酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%。RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到RNA制品。但是用碱液提取的RNA有不同的降解。RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分，加入硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在(见实验内容)
三、 实验步骤
1、 用托盘天平称1g干酵母于研钵中，加入少许石英砂，再加入2ml 0.04mol/LNaOH溶液，在研钵中充分研磨至少5min。
2、 再加4ml 0.04mol/LNaOH溶液于匀浆液中，混匀后，将匀浆液转移到大试管中，再用4ml 0.04mol/LNaOH溶液洗涤研钵，洗涤液并入匀浆液中。
3、 将大试管小心在沸水浴中加热30min，冷却后倒入离心管中，与另一组同学的离心管在托盘天平上平衡，然后两组的离心管对称地放入离心机中，2000r/min下离心15min。
4、 吸取10ml酸性乙醇溶液于小烧杯中，将离心管上清液小心倒入小烧杯中，边倒入边搅拌，直到RNA沉淀完全。
5、 将小烧杯中的液体倒入2个干净的离心管，平衡、离心（2000r/min）3min。
6、 弃去两离心管上清液，各离心管中加入95%乙醇2.5ml，振荡、混匀、平衡、离心（2000r/min）3min。
7、 弃去两离心管上清液，各离心管加入3ml 1.5mol/L硫酸，混匀、倒入同一个大试管中，贴上标签，放在试管架上，备用。
8、 将水解液在沸水浴中加热至少10min，使沉淀RNA充分水解。
9、 取一支试管A，加入1ml 0.1mol/L硝酸银溶液，再逐滴加入浓氨水至沉淀消失，然后加入1ml水解液放置片刻，观察有无白色嘌呤碱的银化合物沉淀。
10、 另取一支试管B，加入水解液1ml，三氯化铁浓盐酸溶液2ml和地衣酚乙醇溶液0.2ml（约4滴），混匀，用试管夹夹好后放到沸水浴中3~5min，注意观察溶液是否变成绿色，说明核糖的存在。
11、 再取一支试管C，加入水解液1ml和定磷试剂1ml，混匀，在沸水浴中加热，注意观察溶液颜色的变化，溶液变蓝，说明磷酸存在。
注意事项：离心一定要平衡对称放入离心机中，离心机达到设置转速时才能离开。
四、 实验结果
第6步中离心管底部有不少的RNA沉淀。
试管A：出现白色浑浊现象。有嘌呤碱存在。
试管B：加热后，出现鲜绿色，且随着加热时间延长，颜色越来越深。有核糖存在。
试管C：加热后，出现蓝色，且随着加热时间延长，颜色越来越深。有磷酸存在。
说明RNA的组分中有嘌呤碱、核糖、磷酸。
分析：
本实验选用酵母，是因为酵母中RNA含量较多，且价格便宜。RNA可溶于碱性溶液，所以本实验用0.04mol/LNaOH溶液来提取。RNA不溶于乙醇，可用酸性乙醇使RNA从溶液中沉淀出来，再用乙醇洗涤沉淀，可得到RNA粗制品。
研磨和NaOH使酵母细胞破裂，RNA主要存在于细胞质中，所以RNA被释放出来，同时，NaOH使蛋白质变性。
加入酸性乙醇，一方面可以中和NaOH，另一方面，使RNA从溶液中沉淀下来。
RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分，加入硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。
（1）、强酸使核酸分子的有机磷消化为无机磷，使之与钼酸铵结合成磷钼酸铵（黄色沉淀）
PO43- + 3NH4+ + 12MoO42- + 24H+ ===(NH4)3PO4.12MoO3.6H2O + 6H2O
当有还原剂（如维生素C）存在时，Mo6+被还原成Mo4+，再与试剂中的其它MoO42-结合成Mo（MoO4）2，呈蓝色，称钼蓝。所以试管C中会出现蓝色。
（2）、RNA与硫酸共热，生成的核糖进而脱水转化为糠醛，三氯化铁作为催化剂，可与地衣酚反应，生成绿色化合物，所以试管B中出现绿色。（OR苔黑酚）
（3）、嘌呤碱可与硝酸银反应产生白色的飘零银化合物沉淀。所以试管A中出现浑浊现象。
（4）、不检测嘧啶碱，是因为与嘌呤碱相比，它难以被水解下来，同时它难检测且现象不明显。
扩展资料：
酵母核酸提取原理
提取和制备RNA 的首要问题是选RNA 含量高的材料。微生物是工业上大量生产核酸的原料，其中RNA 的提制以酵母最为理想，因为酵母核酸中主要是RNA（2.67～10.0%），DNA 很少（0.03～0.516%），而且菌体容易收集，RNA 也易于分离。
RNA 提制过程首先要使RNA 从细胞中释放，并使它和蛋白质分离，然后将菌体除去。再根据核酸在等电点时溶解度最小的性质，将pH 调至2.0～2.5，使RNA 沉淀，进行离心收集。然后运用RNA 不溶于有机溶剂乙醇的特性，以乙醇洗涤RNA 沉淀。
提取RNA 的方法很多，在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。浓盐法是在加热的条件下，利用高浓度的盐改变细胞膜的透性，使RNA 释放出来，此法易掌握，产品颜色较好。
使用浓盐法提出RNA 时应注意掌握温度，避免在20～70℃之间停留时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶作用的温度范围，会使RNA 因降解而降低提取率。在90～100℃条件下加热可使蛋白质变性，破坏磷酸二酯酶和磷酸单酯酶，有利于RNA 的提取。
参考资料：百度百科—酵母核酸
一、 实验目的
1、掌握酵母RNA提取的方法。
2、了解核酸的组成。
3、掌握鉴定核酸组分的方法和操作。
二、 实验原理
酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%。RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到RNA制品。但是用碱液提取的RNA有不同的降解。RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分，加入硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在(见实验内容)
三、 实验步骤
1、 用托盘天平称1g干酵母于研钵中，加入少许石英砂，再加入2ml 0.04mol/LNaOH溶液，在研钵中充分研磨至少5min。
2、 再加4ml 0.04mol/LNaOH溶液于匀浆液中，混匀后，将匀浆液转移到大试管中，再用4ml 0.04mol/LNaOH溶液洗涤研钵，洗涤液并入匀浆液中。
3、 将大试管小心在沸水浴中加热30min，冷却后倒入离心管中，与另一组同学的离心管在托盘天平上平衡，然后两组的离心管对称地放入离心机中，2000r/min下离心15min。
4、 吸取10ml酸性乙醇溶液于小烧杯中，将离心管上清液小心倒入小烧杯中，边倒入边搅拌，直到RNA沉淀完全。
5、 将小烧杯中的液体倒入2个干净的离心管，平衡、离心（2000r/min）3min。
6、 弃去两离心管上清液，各离心管中加入95%乙醇2.5ml，振荡、混匀、平衡、离心（2000r/min）3min。
7、 弃去两离心管上清液，各离心管加入3ml 1.5mol/L硫酸，混匀、倒入同一个大试管中，贴上标签，放在试管架上，备用。
8、 将水解液在沸水浴中加热至少10min，使沉淀RNA充分水解。
9、 取一支试管A，加入1ml 0.1mol/L硝酸银溶液，再逐滴加入浓氨水至沉淀消失，然后加入1ml水解液放置片刻，观察有无白色嘌呤碱的银化合物沉淀。
10、 另取一支试管B，加入水解液1ml，三氯化铁浓盐酸溶液2ml和地衣酚乙醇溶液0.2ml（约4滴），混匀，用试管夹夹好后放到沸水浴中3~5min，注意观察溶液是否变成绿色，说明核糖的存在。
11、 再取一支试管C，加入水解液1ml和定磷试剂1ml，混匀，在沸水浴中加热，注意观察溶液颜色的变化，溶液变蓝，说明磷酸存在。
注意事项：离心一定要平衡对称放入离心机中，离心机达到设置转速时才能离开。
四、 实验结果
第6步中离心管底部有不少的RNA沉淀。
试管A：出现白色浑浊现象。有嘌呤碱存在。
试管B：加热后，出现鲜绿色，且随着加热时间延长，颜色越来越深。有核糖存在。
试管C：加热后，出现蓝色，且随着加热时间延长，颜色越来越深。有磷酸存在。
说明RNA的组分中有嘌呤碱、核糖、磷酸。
分析：
本实验选用酵母，是因为酵母中RNA含量较多，且价格便宜。RNA可溶于碱性溶液，所以本实验用0.04mol/LNaOH溶液来提取。RNA不溶于乙醇，可用酸性乙醇使RNA从溶液中沉淀出来，再用乙醇洗涤沉淀，可得到RNA粗制品。
研磨和NaOH使酵母细胞破裂，RNA主要存在于细胞质中，所以RNA被释放出来，同时，NaOH使蛋白质变性。
加入酸性乙醇，一方面可以中和NaOH，另一方面，使RNA从溶液中沉淀下来。
RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分，加入硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。
（1）、强酸使核酸分子的有机磷消化为无机磷，使之与钼酸铵结合成磷钼酸铵（黄色沉淀）
PO43- + 3NH4+ + 12MoO42- + 24H+ ===(NH4)3PO4.12MoO3.6H2O + 6H2O
当有还原剂（如维生素C）存在时，Mo6+被还原成Mo4+，再与试剂中的其它MoO42-结合成Mo（MoO4）2，呈蓝色，称钼蓝。所以试管C中会出现蓝色。
（2）、RNA与硫酸共热，生成的核糖进而脱水转化为糠醛，三氯化铁作为催化剂，可与地衣酚反应，生成绿色化合物，所以试管B中出现绿色。（OR苔黑酚）
（3）、嘌呤碱可与硝酸银反应产生白色的飘零银化合物沉淀。所以试管A中出现浑浊现象。
（4）、不检测嘧啶碱，是因为与嘌呤碱相比，它难以被水解下来，同时它难检测且现象不明显。
酵母核酸中RNA含量较多，DNA 则较少。RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA的粗制品。
核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱、磷酸，加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可测出其组成成分。
细胞分裂素对植物细胞有丝分裂有促进作用吗?
1948年美国斯科格和中国崔澄在烟草组织培养中发现腺嘌呤能诱导烟草髓组织分化出芽。1955年米勒等以酵母脱氧核糖核酸的降解物和鲱精子的脱氧核糖核酸中分离纯化得到促进细胞分裂的物质，定名为激动素（KT），其化学结构为6-呋喃甲基腺嘌呤，又称糠基腺嘌呤。1963年莱瑟姆从受精11~16天的玉米嫩籽中分离出第...
脱氧核糖核酸简介
脱氧核糖核酸(英语:Deoxyribonucleic acid,缩写为DNA)又称去氧核糖核酸,是一种分子,可组成遗传指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令,是建构细胞内其他的化合物,如蛋白质与RNA所需。带有遗传讯息的DNA片段称为基因,其他的DNA序列,有些直接以自...
高二生物选择性必修二知识点总结
6、遗传信息的携带者是核酸,它在生物体的遗传变异和蛋白质合成中具有极其重要作用,核酸包括两大类:一类是脱氧核糖核酸,简称DNA;一类是核糖核酸,简称RNA,核酸基本组成单位核苷酸。 7、蛋白质功能: ①结构蛋白,如肌肉、羽毛、头发、蛛丝 ②催化作用,如绝大多数酶 ③运输载体,如血红蛋白 ④传递信息,如胰岛素 ⑤免疫...
DNA复制和染色体复制是一回事吗
不是一回事。染色体复制除了包括DNA复制外还包括蛋白质的合成。DNA复制（DNA replication）是指以亲代DNA链为模板，以dATP、dGTP、dCTP和dTTP为原料，在DNA聚合酶的催化下合成子代DNA的过程。DNA复制主要包括引发、延伸、终止三个阶段。染色体复制发生在有丝分裂和减数第一次分离的间期。指细胞核内的染色体...
核仁、核仁组织者与核仁染色体之间的关系
细胞分裂时，核仁消失，分裂结束后，两个子细胞分别产生新的核仁。核仁是一种动态结构，随细胞周期的变化而变化，即形成——消失——形成,这种变化称为核仁周期。在细胞周期中，核仁进行分离和重新聚合的过程。当细胞进入有丝分裂时，核仁首先变形和变小；其后染色质凝集和停止核糖核酸（rna）合成，包含有...
核酸中各基本组成单位之间的连接方式是
核酸中各基本组成单位之间的连接方式是磷酸二酯键。核酸是脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的总称，是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。核酸由许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。最早由米歇尔于1868年在脓细胞中发现和分离出来。核酸...
有丝分裂后期有没有同源染色体
所以你题目所说的那个形态大小相似、但是只有一个DNA分子【V形的】的两个染色体不是同源染色体，是完全相同的染色体。2.有丝后期是指每条染色体的两条姐妹染色单体分开并移向两极的时期。在后期被分开的染色体称为子染色体。子染色体到达两极时后期结束。染色单体的分开常从着丝点处开始，然后两个染色单体...
急! 高中生物 人教版 关于基因工程、细胞工程
基因工程是20世纪70年代以后兴起的一门新技术,其主要原理是应用人工方法把生物的遗传物质,通常是脱氧核糖核酸(DNA)分离出来,在体外进行切割、拼接和重组。然后将重组了的DNA导入某种宿主细胞或个体,从而改变他们的遗传品性。有时还能使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达,抑或基因产物(多肽或蛋白质)。这种...
谁能帮我整理一下生物有丝分裂、减数分裂、无丝分裂的过程
1.细胞间期,进行和DNA的复制,数目分别变为一般细胞的两倍。 2.减一前期同源染色体联会.形成四分体。 3.减一中期.同源染色体着丝点对称排列在赤道板上(或同源染色体排列在赤道板两端)。 4.减一后期,同源染色体分离,非同源染色体自由组合,移向细胞两极。 5.减一末期细胞一分为二,形成次级精母细胞或形成极体和次级...
dna分子 准确复制 原因
半保留复制 半保留复制（semiconservative replication）：一种双链脱氧核糖核酸（DNA）的复制模型，其中亲代双链分离后，每条单链均作为新链合成的模板。因此，复制完成时将有两个子代DNA分子，每个分子的核苷酸序列均与亲代分子相同，这是1953年沃森（J.D.Watson）和克里克（F.H.C.Crick）在DNA双螺旋...
廖宣考克： 一、 实验目的1、掌握酵母RNA提取的方法.2、了解核酸的组成.3、掌握鉴定核酸组分的方法和操作.二、 实验原理 酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少于2%.RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,由此即可得到RNA...
佛冈县17718294657： 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定实验中的组分怎么验证? - ？
廖宣考克： 1.磷酸 磷酸与钼酸铵试剂作用生成黄色磷钼酸,磷钼酸中的钼在有还原剂存在时被还原成蓝色的钼蓝.据此呈色反应即可鉴定磷酸的存在. 2.嘌呤碱 根据嘌呤碱能与硝酸银产生乳白色的絮状嘌呤银化合物而鉴定. 3.戊糖 核糖经浓盐...
佛冈县17718294657： 如何鉴定核糖 - ？
廖宣考克： 核糖具有醛糖的通性 有醛基 和葡萄糖一样可以用斐林试剂检验
佛冈县17718294657： 酵母核糖核酸的提取及测定实验中各次冰浴的目的是什么?？
廖宣考克： 因为之前刚刚沸水浴提取.温度很高,为了便于之后的各部分进行,保持核糖核酸的活性,必须快速把温度降下来.否则就会失活、解题.你就提取不到了
佛冈县17718294657： 酿酒酵母菌怎么用实验分离和鉴定 - ？
廖宣考克： 酵母菌能够进行有氧呼吸和无氧呼吸,因此它在有氧和无氧的环境下都能存活,可以利用这一点把它分离出来.再者酵母菌是真核生物,可以用抗生素把它和细菌分离开来.
佛冈县17718294657： 酵母菌核糖核酸的提取实验中 如何提高分离的RNA粗制品的产量 - ？
廖宣考克： 防止RNA被降解. 用好的提取方法,条件允许可以考虑北京华越洋的酵母RNA提取试剂盒.
佛冈县17718294657： ...可用碘液检测结果; ③在鉴定叶片光合作用产生淀粉时,为排除叶片绿色的干扰,可用酒精脱色; ④色素的提取和分离实验中各种色素扩散速度不同是因为... - ？
廖宣考克：[选项] A. 1个 B. 2个 C. 3个 D. 4个
佛冈县17718294657： 肝组织中核酸的提取与鉴定实验结论怎么写 - ？
廖宣考克： 一、肝组织中 DNA 的分离与鉴定【 实验目的】1 .掌握 DNA 分离纯化的原理和方法.2 .熟悉台式离心机 的使用.3. 掌握 DNA 定量技术.【 实验原理】细胞内的核酸多以核蛋白的形式存在,其中脱氧核糖核蛋白主要存在于细胞核 中...
佛冈县17718294657： DNA的鉴定实验过程 - ？
廖宣考克： 一般要通过以下几点来完成: 1、将送检的各种生物学检样,如毛发、血痕、精斑、人体组织或白骨等,把其中所含的DNA 提取出来. 2、选用与探针配对的限制性核酸内切酶,在长链DNA 位置上加以切割,使分子量很大的DNA 长链切短成许...
佛冈县17718294657： 下列实验组合,正确的是() 实验名称 检测试剂 结果或颜色反应A 探究酵母菌的无氧呼吸产物酒精 溴麝香草酚蓝水溶液 由蓝变绿再... - ？
廖宣考克：[答案] A、酵母菌无氧呼吸产生酒精可以用酸性重铬酸钾溶液鉴定,A错误;B、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中,用甲基绿和吡罗红混合染色剂染色,甲基绿能将DNA染成绿色,吡罗红能将RNA染成红色,B错误;C、脂肪能被苏丹Ⅲ...
