用显微镜观察细菌的步骤？

用显微镜观察细菌,操作上应有哪些关键步骤~

观察细菌，基本上都是染色后再进行观察。也就是制片的过程要注意。 观察步骤就是使用100X油镜进行观察的步骤。注意聚光镜光阑与镜头数值孔径的匹配，和光强控制基本就行了。

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一、用脏手上的细菌制装片：

1、收集手上细菌，用少量无菌水（可用冷开水代替）冲洗脏手，让洗手的水流到培养皿中。这些脏水就是细菌培养液。

2、制取细菌装片，取甲、乙两块洁净的载玻片，分别在两玻片的中央各滴一小滴细菌培养液；然后在甲片上盖好盖玻片后直接用600倍的显微镜观察。

（用稍偏暗的视野，调节到位可以看到多种细菌和其它微生物。很容易看到活动的微生物，这样对儿童更有吸引力和教育意义。）如果你想进一步放大并会操作，选定观察的物象后，可把此物象移到视野正中央，再转换更高倍数的镜头观察即可。

3、在乙片的细菌培养液滴上滴一小滴龙胆紫染色液，用牙签将细菌培养液和龙胆紫液搅匀、并将液滴推开，再用酒精灯加热液滴（约5秒钟）后让它自然晾干（约5分钟）。

再用600倍的显微镜直接观察，既可以看到染成深蓝色的多种细菌和其它微生物。不过此时看到的微生物都已死亡、并被固定，因此看不到它们的活动状态。

二、制取洗手后的对照装片。

1、洗手－－－－－将手用香皂洗干净，用洁净的干毛巾揩干手；

2、收集细菌培养液－－－－－－－用少量无菌水冲洗双手，让洗手液流入洁净的培养皿中；

3、制细菌装片－－－－－制片过程与以上装片过程相同，参照制片即可。

扩展资料：

细菌的基本形态与大小

（1）球菌：

球菌是外形呈圆球形或椭圆形的细菌，直径0．5～1微米，有以下几种类型：

①单球菌：单独存在，如尿素小球菌；②双球菌：如肺炎双球菌；

③链球菌：如乳酸链球菌；④四联球菌：形成的4个细胞排列在一起，成田字，如四联球菌；

⑤八叠球菌：如尿素生孢八叠球菌；⑥葡萄球菌：如金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）。

（2）杆菌：

外形为杆状的细菌称杆菌，常有长宽接近的短杆或球杆状菌，如甲烷短杆菌属（Methano—brevibacter）；

长宽相差较大的棒杆状或长杆状菌，如枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）、梭状杆菌（Bacteriumfusiformis）；

分枝状或叉状菌，如双歧杆菌属（Bifidobacterium）；竹节状（两端平截），如炭疽芽孢杆菌（Bacillusanthracis）等。

按杆菌细胞的排列方式不同则有成对的双杆菌、呈链状的链杆菌，另外，常有栅状、“八”字状以及由鞘衣包裹在一起的丝状等多种。典型的杆菌有大肠杆菌、枯草杆菌、链杆菌、变形杆菌［2］。

（3）螺旋状：

螺旋状的细菌称螺旋菌，一般长5～50微米，宽0．5～5微米，根据菌体的弯曲可分为：

①弧菌（Vibrio）：螺旋不足一环者呈香蕉状或逗点状，如霍乱弧菌（Vibriocholerae）；②螺菌（Spirillum）：满2～6环的小型、坚硬的螺旋状细菌，如小螺菌（Spirillumminor）；

③螺旋体（Spirochaeta）：旋转周数多（通常超过6环）、体长而柔软的螺旋状细菌，如梅毒螺旋体（TreponemaPallidum）。

参考资料来源：百度百科-细菌

用显微镜观察细菌步骤如下：先在载玻片上滴加一滴生理盐水.把菌落用接种环挑起后,涂于生理盐水中央直径1CM左右要混匀——把载玻片放在酒精灯上加热烘干———滴加草酸铵结晶紫60秒——水洗——革兰氏碘液60S——95％酒精脱色30S——水洗——番红2分钟——干燥镜检。

　　最终目的是要在显微镜中看见清晰的细菌形状，所以在染色后脱色和水洗最重要，如脱色和水洗不净就会造成细菌和没洗净的颜色混在一起分不清。

　　革兰式染色及其原理:上面的就为革兰氏染色步骤，主要针对的是细菌的检验，因为它们极小。其他的如酵母菌等形状很大不用染色。细菌之所以能被染色主要是和它的结构有关，而且有些能被染成蓝色，有些能染成红色，以此来分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌. 对于生物显微镜革兰氏阳性菌它们的细胞结构中脂类含量少，当用结晶紫染色后再用酒精脱色时，将脂类溶解抽提出来，使肽聚糖孔径变小通透性降低，结晶紫不易被抽提出来所以能保持蓝色。对于革兰氏阴性菌它们的肽聚糖少而脂类多，所以酒精很容易把结晶紫染料提取出来，再经过第二次用番红复染时便染上了红色。

　　关于测定细菌的大小：细菌可以用测微尺测定。它包括目微尺和镜台微尺，目微尺无刻度镜台微尺有刻度。使用时先把镜台微尺放在镜台上用目微尺找到镜台微尺后使用换算把目微尺刻度进行标定，然后就可心测量细菌的大小了。


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(一)油镜头的辨认:
各接物镜的扩大率可由其外形辨认，镜头长度越大，镜片直径越小，扩大倍数大;反之，扩大倍数小。油镜头长度大于低、高倍镜，镜头下缘通常刻有一圈黑线或白线，并刻有100×、1.25或oil等字样。
(二)油镜的运用法:
1、运用显微镜油镜时，有必要将显微镜规矩直立桌上，不得将镜臂曲折，使载物台歪斜，避免香柏油流溢，影响调查，污染台面。
2、对光:选用天然光为光源时，宜用平面反光镜;若用人工灯火时，则用凹面镜。
首要翻开光圈，转变反光镜，使光线集中于集光器。可根据需求，上下挪动集光器和缩放光圈，以取得最佳光度。
通常用低倍镜或高倍镜调查物象或用油镜查看不染色标本时，需降低集光器并适当地削减光圈，使光度削弱;若用油镜查看染色标本时，光度宜强。应将显微镜亮度开关调至最亮，光圈彻底翻开，集光器上升至与载物台相平。
3、调焦距:
A、将标本片放载物台上，用标本推进器固定，将欲检有些移至接物镜下。先用低倍镜找出标本的方位，然后进步镜筒，在标本的待检部位滴镜油一滴，再换油镜调查。
B、转变粗调节器使载物台缓缓上升(或使镜筒逐渐降低)，直至油镜头浸没至油中。此刻眼睛应从旁边面调查，避免压碎标本片和损坏镜头。
C、然后双眼移至接目镜，一面从接目镜调查，一面反方向缓慢地转变粗调节器(降低载物台，或上升镜筒)，当呈现含糊物象时，换用细调节器，转变至物象明晰停止
D、调查结束，应先进步镜筒，并将油镜头扭向一侧，再取下标本片。油镜头运用后，应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。若镜油粘稠干结于镜头上，可用擦镜纸蘸少量二甲苯擦洗镜头，并随即用干的镜纸擦去残存的二甲苯，避免二甲苯进入，溶解用以粘固透镜的胶质物，形成镜片移位或掉落。
(三)油镜的运用原理:
油镜的透镜很小，光线经过玻片与油镜头之间的空气时，因介质密度不一样，发作折射或全反射，使射入透镜的光线削减，物象闪现不清。若在油镜与载玻片之间参加和玻璃折射率(n=1.52)附近的香柏油(n=1.515)，则使进入透镜的光线增多，视界亮度增强，使物象亮堂明晰。
(四)显微镜的保护:
1、显微镜是精密仪器，运用时要注重保护，切勿随意拆开和磕碰。
2、强酸、强碱、氯仿、酒精、乙醚等都能去漆或损坏机件，均需注重不使触摸显微镜。
3、细调节器是显微镜最精密、最软弱的机械有些，每旋转一周使镜筒上升或降低0.1毫米，只能往复反转，即向一个方向转变数周遇阻力时，应反方向转变。
4、不用时将接物镜转成八字形，载物台降至低点，降低集光器，关上光圈，套上保护罩，双手平托送回。
显微镜运用过程中，如发现问题应及时向教师陈述并进行挂号，以便检修。

在玻片上滴加一小滴水，挑去菌落放于水中后均匀涂布，在小火上反复过几次，烤干，加结晶紫染液染色，后用酒精脱色，再加伊红染色，干燥后加香柏油于玻片上，用油镜调焦观察

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冷勇桂林：[答案] 用显微镜观察细菌步骤如下:先在载玻片上滴加一滴生理盐水.把菌落用接种环挑起后,涂于生理盐水中央直径1CM左右要混匀——把载玻片放在酒精灯上加热烘干———滴加草酸铵结晶紫60秒——水洗——革兰氏碘液60S——95%...

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冷勇桂林：[答案] 虽然各种类型的显微镜能够观察到细菌的各种形态结构,但一般实验室常用的是普通光学显微镜.由于细菌体积小且透明,在活体细胞内又含有大量的水分,因此,对光线的吸收和反射与水溶液相差不大.当把细菌悬浮在水滴内,放在显微镜下观察时...

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冷勇桂林：[答案] 1.将细菌染色 2.将染色后的细菌至于载玻片上,盖上盖玻片,至于显微镜下,在低倍镜中找到细菌,并将其移到视野中央(此时看到的只是一块一块的,并非单个细菌,要想看到单个细菌形态需要增加放大倍数) 3.再换用高倍镜观察,用细准焦螺旋...

洛江区15791057572： 怎样用显微镜观察培养皿中的菌落?怎样用显微镜观察培养皿中的菌落?好像在显微镜的焦距之前,物镜就被培养皿的玻璃挡住了. - ？
冷勇桂林：[答案] 培养皿中的细菌群落的直径一般在1-3mm左右,不需要用显微镜,直接观察就行.若直要观察,就将显微镜的观察台放的比平常低一点,把培养皿的上盖打开,将下盖放到载物台上,调节观察.致病菌不宜如此!

洛江区15791057572： 光学显微镜如何制片 观察细菌？
冷勇桂林： 1、洗干净载片,擦干; 2、滴上一滴细菌培养液,风干; 3、在酒精灯上迅速过几下固定细菌; 4、染色几分钟,然后用酒精脱色; 5、盖上盖玻片,在显微镜下面观察.

洛江区15791057572： 如何用显微镜观察手上的细菌?我不可能把手直接放到显微镜下,不过我想统计一下手上有多少细菌, - ？
冷勇桂林：[答案] 先用无菌的水将手上的细菌洗到水中,在根据手的表面积与所用水量算出残留细菌与洗到水中的细菌的比例.最后取确定数量小体积的水用显微镜观察计数,根据体积比可确定水中的细菌数量,最后再根据手上残留细菌与洗到水中的细菌的比例可推算...