蛋白质提取方法比较
方法多着，
要比较哪几种？
specific affinity binding当然最有效率
ion exchange，分离效果居中，损失较少
Size-exclusion chromatography，可loading量有限，体积又大增，得重新浓缩，回收的损失很大
1.机械破碎法（匀浆）
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利用机械力将细胞破碎。常用的设备：高速组织捣碎机，匀浆器，研钵等。
不同组织的特性来选择不同的方法，动物的胰肝脑一般较柔软，用普通匀浆器研磨即可，而肌及心肌组织较韧，需预先搅碎成匀浆。
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利用震荡频率为15-25KHz的超声波在细胞液中产生的空化效应和机械效应将细胞膜破碎的方法，多用于细胞裂解。
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注意事项：（1）为了避免在溶液中产生泡沫，要将超声探头完全置于液面以下，并不接触的前提下尽可能靠近容器底部。（2）应该使用塑料试管，避免使用玻璃试管。（3）超声剂量应由样品量和菌体来决定，攻率可以在200-600w。过强的超声波可导致多聚物降解和蛋白失活。如果超声出现沉淀说明超声功率太大。（4）一般超声5-10s，反复多次。（4）将试管置于冰水中以避免蛋白质变性和失活。
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将细胞在-20度以下或液氮条件下冰冻，室温溶解，反复多次。
特点：成本低，操作简便，过程缓慢，但不适用于对温度比较敏感的蛋白质。
END
自溶法：利用自身的酶将细胞破使细胞内物质释放出来。该法比较稳定，且蛋白不易分解。自溶过程中PH会有显著的变化。
酶融法：利用生物酶使细胞成分溶于溶剂中。
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表面活性剂处理：通过破坏细胞膜磷脂双分子层将胞内物质释放出来。
2.超声破碎法
3.反复冻融法
4.表面活性剂裂解及酶解法
1、超速离心法
此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内，达到彼此分离的目的。
2、选择性沉淀法
其原理多根据各蛋白质理化特性的差异，采用各种沉淀剂或改变某些条件促使蛋白质抗原成分沉淀，从而达到纯化的目的。常用的方法是盐析沉淀法。
3、凝胶层析法
凝胶层析是利用分子筛作用对蛋白质进行分离。凝胶是具有三维空间多孔网状结构的物质，经过适当的溶液平衡后，装入层析柱。
4、离子交换层析法
离子交换层析的原理是利用一些带离子基团的纤维素或凝胶，吸附交换带相反电荷的蛋白质抗原。由于各种蛋白质的等电点不同，所带的电荷量不同，与纤维素(或凝胶)结合的能力有差别。
5、亲和层析
亲和层析是利用生物大分子的生物特异性，即生物大分子间所具有专一亲和力而设计的层析技术。例如抗原和抗体、酶和酶抑制剂(或配体)、酶蛋白和辅酶、激素和受体、IgG和葡萄球菌蛋白A(SPA)等物质间具有一种特殊的亲和力。
...糖蛋白,脂蛋白异同点,及这些蛋白的分离方法和分离原...
这种方法的优点是萃取过程中蛋白质因位于反胶团的内部而受到反胶团的保护。程世贤等[17]就利用反胶团萃取法提取了大豆中的蛋白质。3.根据电荷不同进行分离纯化 根据蛋白质的电荷即酸碱性质不同分离蛋白质的方法有电泳和离子交换层析两类。 在外电场的作用下,带电颗粒(如不处于等电点状态的蛋白质分子)将向着与...
脑白质缺血是什么原因引起的
针对这种情况下，患者主要要改善脑部的血液循环治疗，平时可以口服一些银杏叶片、银杏叶提取物片，或者是血塞通、蛭蛇通络、复方地龙胶囊这一类的药物，改善脑血液循环，同时也要积极的控制脑动脉粥样硬化的危险因素，控制血压、血脂、血糖、血同型半胱氨酸。患者从生活方式上也要进行调整，一定要戒烟，避免...
脑白质脱髓鞘病变的临床症状
脱髓鞘脑病主要以损害大脑白质及脊髓的白质(神经白质变性)植物神经导致的植物神经功能紊乱,部分患者早期发病并不明显,随着忽视和发生症状后才去就诊做磁共震而确诊,治疗不当本病复发和迟发神经再度损害导致病情加重,发病严重时可侵犯脊髓前角细胞和脑干神经核以及大脑运动皮质锥体细胞导致神经功能损害危机生命。早期的...
男女之间的思维差异都有哪些?
不是他不同意你的观点，也不是他漠不关心——这只是你的大脑运作方式的显着差异！3. 女性比男性更容易重温记忆 你有没有注意到你是多么倾向于沉思很久以前你的嫂子对你的不公平评论，即使那个问题已经解决了并且已经尘埃落定？而当新的怨恨情绪让你想向你的丈夫发泄时，他似乎不在乎？由于流向女性大脑...
脑白质疏松怎么治疗
脑白质疏松是指轻度脑部缺血，还没有达到脑梗塞的程度，会有头晕、不适的症状或者没有明显症状。治疗方面主要是活血化瘀、改善脑部循环、营养大脑神经，如果感觉症状严重可以住院进行输液治疗，疗程是10天左右，可以应用的药物主要有长春西汀注射液、丹红注射液、银杏叶提取物等。如果症状比较轻或者没有症状...
有关法医毒物学
采用有机溶剂提取法分离的毒物。如巴比妥催眠药、生物碱、吗啡等. (3)金属毒。采用破坏有机物的方法分离的毒物。如砷、汞、钡、铬、锌等. (4)阴离子毒物。采用透析法或离子交换法分离的毒物。如强酸、强碱、亚硝酸盐等. (5)其他毒物。其他须根据其化学性质采用特殊方法分离的毒物。如箭毒碱、一氧化碳、...
基因组DNA制备过程中提取缓冲液有哪些成分,作用是什么
NaCl,Tris-HCl（PH=8）,EDTA（PH=8）,SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度.EDTA主要是二价金属离子的螯合剂,使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA；SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!
安利蛋白粉和蛋白质有什么区别
一、原料不同 1、安利纽崔莱蛋白粉：以大豆分离蛋白、卵磷脂、小麦蛋白、豌豆蛋白、二氧化硅为主要原料制成。2、纽崔莱蛋白质粉：以源自先进工艺的大豆分离蛋白为主要原料。二、特点不同 1、安利纽崔莱蛋白粉：不添加糖分、人造香料、合成色素或防腐剂。2、纽崔莱蛋白质粉：易溶解，不含糖，不含人工香料。
左侧额叶点状白质脱髓鞘严重吗
左侧额叶点状的白质脱髓鞘在临床上并不严重，一般都是在做头部磁共振脑功能成像的检查时候，能够有一定的显示。这种情况的发生主要是与大脑的组织慢性的缺血、缺氧引起的，在临床上并不会导致患者有明显的症状，所以治疗上也不用太紧张，建议患者可以口服改善脑血液循环的药物改善症状，比如口服银杏叶提取物...
双侧额顶叶脑白质脱髓鞘怎么治疗
双侧额顶叶脑白质出现脱髓鞘样的改变，患者的治疗主要是要预防脑动脉硬化，减少脑动脉硬化的程度。建议患者平时口服银杏叶类的制剂，比如银杏叶片、银杏叶提取物片，还有银杏酮酯滴丸这一类的药物，改善脑部的血液循环，减少动脉硬化的程度。要针对患者的基础疾病进行治疗，一定要严格的控制血压、血脂、血糖、...
伏龚度米：[答案] (一)水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解.提取的温度要视有效成份性质而定.一方面,多数蛋白质的溶解...
峰峰矿区19521795316： 蛋白质如何提取 - ？
伏龚度米：[答案] 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶. (一)水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是...
峰峰矿区19521795316： 蛋白质提取方法的比较? - ？
伏龚度米： 方法多着,要比较哪几种?specific affinity binding当然最有效率 ion exchange,分离效果居中,损失较少 Size-exclusion chromatography,可loading量有限,体积又大增,得重新浓缩,回收的损失很大
峰峰矿区19521795316： 蛋白质的分离纯化技术有哪些?尽量全面一点, - ？
伏龚度米：[答案] 蛋白质的分离纯化方法很多,主要有: (一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法 1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度...
峰峰矿区19521795316： 常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种 - ？
伏龚度米： 常用的蛋白质分离纯化方法主要有 柱层析,根据蛋白的不同性质有不同类型的层析柱 盐析,主要根据蛋白质的亲疏水性 电泳,主要是根据蛋白质的电荷数以及分子量 等电点沉淀,主要是根据蛋白质的等电点 等等
峰峰矿区19521795316： 蛋白质分离提纯方法 - ？
伏龚度米： 蛋白质分离提纯的一般原则 1. 前处理 把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来,保持原来的天然状态,并不丢 失生物活性.常用的方法:匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等. 超声波破碎法:当声波达到一定频率时,使液...
峰峰矿区19521795316： 比较DNA提取与蛋白质提取的异同 - ？
伏龚度米： 展开全部1.原材料不同.DNA提取不能用成熟哺乳动物的红细胞,但蛋白质提取可以用这类细胞.2.原理不同.DNA提取利用DNA和杂质在不同浓度的氯化钠中的溶解度不同提取DNA,蛋白质提取利用不同蛋白质的相对分子质量的不同来分离不同的蛋白质.3.试剂不同.DNA提取用到了氯化钠,酒精等,蛋白质提取用到了甲苯,缓冲液等.3过程不同.DNA提取反复用到了溶解,过滤等过程,蛋白质提取需要离心,透析等.
峰峰矿区19521795316： 从混合溶液中提取蛋白质的方法 ？
伏龚度米： 蛋白质(包括酶)的提取大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分...
峰峰矿区19521795316： 目前常用的植物蛋白提取方法有哪些? - ？
伏龚度米：[答案] 一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上.2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时).3、用离心机离心8000r...
峰峰矿区19521795316： 目前常用的植物蛋白提取方法有哪些? - ？
伏龚度米： 您好. 一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上.2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时).3、用离心机离心8000...
