凯氏定氮法测定蛋白质含量
凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理是将蛋白质中的氮元素转化为氨,然后用硫酸进行吸收,再用标准酸滴定计算出蛋白质的含量。
1、样品处理:将样品研碎或匀浆,然后加入硫酸和催化剂(如硫酸铜和硫酸钾),在消化炉中加热消化,使蛋白质分解为氨基酸。
2、氨的转化:将消化液转移至定氮瓶中,加入过量的氢氧化钠溶液,使氨转化为氨气。
3、氨的吸收:将定氮瓶中的溶液用硫酸进行吸收,使氨转化为硫酸铵。
4、滴定计算:将吸收液用标准酸进行滴定,计算出氮的含量,再乘以蛋白质换算系数(一般为6.25),即可得到蛋白质的含量。
凯氏定氮法的注意事项:
1、样品处理要彻底:样品应充分研碎或匀浆,以保证蛋白质分解完全。同时,在加入硫酸和催化剂后,要保证样品混合均匀,避免局部过热或过酸导致氨基酸的破坏和损失。
2、控制消化温度和时间:消化过程中应注意控制温度和时间,一般建议在420℃左右的温度下消化1-2小时。温度过高或过低,或者消化时间不足,都可能导致氨基酸的破坏和损失,影响测定结果的准确性。
3、保证氢氧化钠溶液过量:在氨的转化步骤中,应加入过量的氢氧化钠溶液,以保证氨完全转化为氨气。如果氢氧化钠溶液不足,可能导致部分氨无法转化为氨气,进而影响测定结果的准确性。
4、控制硫酸吸收的温度和酸度:在氨的吸收步骤中,应将定氮瓶中的溶液用硫酸进行吸收,使氨转化为硫酸铵。在此过程中,应注意控制温度和酸度,以保证氨的完全吸收。温度过高或过低,或者硫酸浓度过高或过低,都可能影响氨的吸收效果。
5、准确滴定计算:在滴定计算步骤中,应将吸收液用标准酸进行滴定,计算出氮的含量。在此过程中,应注意控制滴定速度和终点判断,以保证结果的准确性。滴定速度过快或过慢,或者终点判断不准确,都可能影响测定结果的准确性。
检测食品中蛋白质含量的原理和方法是什么?
基于食品中蛋白质含量与食品中氮含量的比例关系换算的。如乳中蛋白质与氮含量的比值为6.38,大豆中蛋白质与氮含量的比值为5.71,普通食品中蛋白质与氮含量的比值为6.25。因此是通过测定食品中氮含量后再根据换算系数得到食品中蛋白质含量。二、蛋白质的检测方法:1、凯氏定氮法:样品在高温浓硫酸的...
怎么测定蛋白质的含量?
①凯氏定氮法 原理:蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。②双缩脲法 原理:尿素在180℃下脱氨生成双缩脲,在碱性溶液中双缩脲可与...
凯氏定氮法测定食品中蛋白质的操作要点及注意事项、常见问题解答汇总...
总结:凯氏定氮法是食品中蛋白质测定的金标准,但其精确性依赖于每个步骤的严谨执行。记住,每一步都关乎蛋白质的真相,每个细节都可能影响最终的数字。让我们以科学的态度,把握这把测量食物蛋白质的钥匙,揭示营养的奥秘。更多实用技巧和实操指南,请关注我们的实验室服务号,持续为您带来专业支持。
蛋白质的测定中,最常用的分析方法是( ),它是将蛋白质消化,测定其总含氮...
凯氏定氮法的局限性 1、对样品的前处理要求较高 在进行凯氏定氮法测定之前,需要对样品进行前处理,如酶解、酸水解等,以释放出其中的氮元素。然而,这些前处理步骤对样品的要求较高,如果处理不当,可能会影响测定结果的准确性。2、对某些特殊蛋白质的测定效果不佳 凯氏定氮法对于某些特殊蛋白质的...
凯氏定氮法原理是什么?
凯氏定氮法原理是:蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与浓硫酸和催化剂一同加热硝化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,并换算成蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量。凯氏定氮法的注意事项:...
凯氏定氮法进行蛋白质分析的主要步骤?
体积),g(ml); F:氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉与肉制品为6.25,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为 5.30。
凯氏定氮法测定蛋白质含量时,蒸馏时间
含氮量是蛋白质区别于其他有机化合物的重要标志,在检验食品中蛋白质时,通常是先检定出食品中的总氮量,然后乘以蛋白质换算系数,以此得到蛋白质含量,凯氏定氮法由Kieldahl于1883年首先提出,至今仍被作为标准检验方法,凯氏定氮法测定蛋白质分为样品消化、蒸馏、吸收和滴定过程。
凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗?
可以。凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,...
如何计算蛋白质含量?
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法,即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,...
凯氏定氮法测定蛋白质时为什么要用混合指示剂
凯氏定氮法测定蛋白质时要用混合指示剂的原因是,1.催化作用:加速有机物的氧化分解。2. 消化完全的指示剂:使液体呈现蓝绿色澄清透明状态。3. 蒸馏时碱性反应的指示剂:
兀有珍赛克:[答案] (1)从测量步骤可知样品处理目的是把蛋白质中氮元素转化为NH4+;氨水不稳定,温度高分解成氨气挥发,温度高可使反应中生成的氨气全部进入吸收液, 故答案为:将奶粉中氮元素全部转变为NH4+;使反应中生成的氨气全部进入吸收液; (2)...
沙河市15826562371: 蛋白质含量测定药典规定必须用什么方法 - ?
兀有珍赛克: 使用凯氏定氮的方法检测蛋白质含量. 凯氏定氮法 凯氏定氮法蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍【GB/T 5009.5—1985】 食品中蛋白质的测定方法本标准适用于各类食品中蛋白质的测定. 1 原理 蛋白质是含氮的有机化合物....
沙河市15826562371: 凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗? - ?
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沙河市15826562371: 凯氏定氮法是蛋白质经典测定法,其原理是通过测出样品中氮的含量而求出蛋白质的含量.氮在蛋白质中的平均含量为16%;奶粉中蛋白质含量的国家标准为:... - ?
兀有珍赛克:[答案] (1)国家标准为每奶粉中含蛋白质不少于18.5g,氮在蛋白质中平均含量16%,则合格奶粉中氮的含量为 18.5g*16% 100g*100%=2.96%; 现测定一袋该类奶粉中氮的含量为2%,2%<2.96%,故该奶粉不符合国家标准. (2)盐酸中溶质的质量为:21.4g...
沙河市15826562371: 凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的原理和基本操作方法是什么?如题. - ?
兀有珍赛克:[答案] 原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量.、试剂与材料:浓硫酸...
沙河市15826562371: 国产凯式定氮仪如何测定蛋白质含量? - ?
兀有珍赛克: 现在很多产品都已经是国产化,凯式定氮仪原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的...
沙河市15826562371: 测蛋白质的含量 - ?
兀有珍赛克: 蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一.目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法. 另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即...
沙河市15826562371: 凯氏定氮法计算公式 ?
兀有珍赛克: 凯氏定氮法计算公式:X=[(V1-V2)*N*0.014/(m*10)]*F*100%.式中,X表示样品中蛋白质的百分含量,V1表示样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,V2表示试剂空白消耗硫...