求考马斯亮蓝结合法测PRO浓度实验方案
1、考马斯亮蓝法一般用来测定 蛋白质，不用其测定血中血红蛋白。
2、测定血中血红蛋白一般采用氰化高铁血红蛋白法，是ICSH的推荐方法，其他如SDS法等临床采用较少。
考马斯亮蓝法可以测蛋白质bp大小吗
考马斯亮蓝法可以测蛋白质bp大小。根据查询相关公开显示考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色，最大光吸收在465nm，当它与蛋白质结合后变为蓝色，最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内。
考马斯亮蓝测蛋白质计算公式
考马斯亮蓝测蛋白质计算公式：nh2ch2cooh+3h2so4—2co2+3so2+4h2o+nh3，考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立的1种测定微量蛋白质的方法。考马斯亮蓝所含疏水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力，通过疏水作用与蛋白质相结合，形成的蓝色蛋白质一染料复合物，在595nm处有最大吸光度，...
测定蛋白质含量的方法
3、紫外分光光度法 在紫外分光光度法中，蛋白质中的肽键在280nm处有强烈的吸收。通过测定溶液在280nm处的吸光度，可以确定蛋白质的含量。此法的优点是灵敏度和准确度都很高，可以用于微量蛋白质的测定。4、考马斯亮蓝法 考马斯亮蓝法是一种基于染料结合法的蛋白质测定方法。此法利用的是考马斯亮蓝...
可溶性蛋白质含量的测定
故可用于蛋白质的定量测定。考马斯亮蓝G-250于蛋白质结合反应十分迅速，2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1h内保持稳定。此法灵敏度高，易于操作，干扰物质少，是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含童很高时线性偏低，且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。
bradford法测定蛋白质含量的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构，缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
bradford法测蛋白浓度怎么测?
测定：另取两支干净的试管（做一重复），加入合适浓度的待测样品，使其测定值在标准曲线的范围内，测定方法同上，由样品液的吸光度查标准曲线即可求出含量。注意事项：1、 如果要求严格，最好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收，因为这段时间内颜色是最稳定的。2、 若选择在旋涡混合器上混合，注意...
考马斯亮蓝法测定牛血清蛋白的标准曲线?
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、 标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、 蛋白质含量测定方法 1、 凯氏定氮法 2、 双缩脲法 3、 Folin-酚试剂法 4、 紫外吸收法 5、...
考马斯亮蓝测定固体物质蛋白质含量
其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量的实验失败
原因如下:考马斯亮蓝法测定样品中的蛋白质含量,仪器是752N型紫外可见分光光度计,采用牛血清白蛋白(sigma)做标准曲线,问题就出在标准曲线上,考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度是生物化学中的经典实验,是利用蛋白质和染料结合的原理。
为什么用Folin酚法和考马斯亮蓝法测蛋白质含量,结果会有很大差异_百度...
测定蛋白质含量，有多种方法，其中考马斯亮蓝法和Folin酚法是灵敏度最高的两种方法，各有优缺点：考马斯亮蓝法干扰物质少，颜色稳定， 颜色深浅随不同蛋白质变化，标准曲线有轻微的非线性；Folin酚法操作要严格计时，颜色深浅随不同蛋白质变化，标准曲线不是严格的直线形式，且专一性差。因此，各方法并...
岳咱补中： 取若干干净试管加入4ml染液及差量牛血清蛋白标液,用盐水补齐.混匀,室温静置3min,于波长595nm处测吸光度,作标准曲线.另取试管,加入样液1.0ml及染液4.0ml,混匀静置,于波长595nm处测吸光度,查标准曲线即可.
平南县18696177038： 如何计算考马斯亮蓝样品蛋白质含量的浓度 - ？
岳咱补中： 考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是较常用的方法,误差可尽量减到最小,需注意:测定OD值前,将分光光度计提前预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐离子不会影响实验结果,但去污剂,如TRITON X-100,SDS等,会严重干扰实验结果.
平南县18696177038： 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度存在的误差? - ？
岳咱补中： 是的,考马斯亮蓝测定蛋白质浓度的方法是选用已知浓度的蛋白进行梯度稀释后,测定OD595,而实际上考马斯亮蓝和蛋白质的结合程度与蛋白质分子上的碱性集团数量有关,因此不同的蛋白质和考马斯亮蓝的结合能力还是有一定差异的,测定蛋白质浓度最好的方法是Lowry法
平南县18696177038： 利用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度时,需要做哪些空白对照 - ？
岳咱补中： 首先,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量时,准确度是由一定范围的,浓度超出范围肯定不准.另外,你在8ug/ml时的收率74%是否稀释测定?最后,高浓度和低浓度回收效率也是有一定范围的,低了高了都不好,最佳回收效率也是在适当浓度下,...
平南县18696177038： 考马斯亮蓝测定固体物质蛋白质含量 - ？
岳咱补中： 实验十四 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 一、 目的学习和掌握考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量的原理和方法.二、原理考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250...
平南县18696177038： 急!请问:考马斯亮蓝比色法测蛋白含量 是怎样的过程.换算公式呢?谢谢! - ？
岳咱补中： 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收.其光吸...
平南县18696177038： 考马斯亮蓝测定蛋白质浓度 - ？
岳咱补中： 蛋白质本身的吸光度应该是在280nm 和考蓝反应后才会在595nm处有吸收,这个吸收值和浓度肯定是线性的关系感觉你这个蛋白浓度算的很奇怪,既然知道蛋白总量50微克,为什么还要加考蓝呢,直接除以溶液体积就可以了啊.考蓝一般是和已知浓度的标准蛋白(比如BSA)用来测未知浓度蛋白的. 需要通过标准蛋白做一条标准曲线,再把未知浓度蛋白的吸收值代入标准曲线算出浓度.
平南县18696177038： 考马斯亮蓝法测定蛋白质的公式是什么??? - ？
岳咱补中： 公式是根据测量结果自己算出来的: 考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5],考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力,通过疏水作用与蛋白质相结合,形成的蓝色蛋白质一染料...
平南县18696177038： 如何测定蛋白浓度 - ？
岳咱补中： 常用紫外分光光度法测定蛋白质含量. 以下引用: 6种方法测定蛋白质含量 一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法 样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液...
平南县18696177038： 考马斯亮蓝法测蛋白质时为什么浓度越高而吸光度越低 - ？
岳咱补中： 透明质酸中的蛋白质指的是一种蛋白聚糖中的蛋白质吗,是否应该考虑除去其中的糖胺聚糖,将蛋白质纯化,因为考马斯亮蓝需要与蛋白质结合才能显色,样品中的糖胺聚糖可能有影响,或者是样品污染 考马斯亮蓝溶液应为酸性,并且变成蓝绿色是就不能再使用了 实验时一定要最后加入蛋白质溶液, 另外,样品中的Tris、乙酸、2-巯基乙醇、EDTA等物质对实验结果有少量颜色干扰,可以在做标准曲线时可以用缓冲液代替蒸馏水,就可以将干扰扣除, 但是大量的去污剂如SDS对颜色的影响太大不容易去除,只能想办法从样品中去除去污剂,
