高效液相色谱对照品稳定性试验两个浓度出峰时间不一样可以用吗

作者&投稿:彭烁 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高效液相色谱外标法测含量时,对照品岀峰时间和样品不一致是什么原因?~

保证使用的分析方法(流动相、样品处理等)全部一致的情况下,如果保留时间不一致的可能因素有以下几点:
1、自动进样器存在问题,如果是手动也可能触发时间存在问题,也就是系统中存在延时错误;
2、最大的可能是色谱柱的问题,更换色谱柱试试;
3、流路中有阻塞的地方,或者有漏液的地方,压力恒定的话这个可能性不大。
具体情况没有具体的描述,只能从这几方面考虑,也可能是别的原因。

时间窗口一般设定5%,一般单组分条件不变最多2%以内,多组分就应该在1%以内才定性准确。

对照品稳定性试验是什么试验?如果说的是对照品溶液稳定性试验,是不需要设置不同浓度的。

相同浓度在0、2、4、6、8、12、24小时分别进样查看偏差就可以。

再说出峰时间不一致的问题,保留时间的一致性问题一直没有定论,具体保留时间相差在百分之多少以内或者零点几分钟以内,这些说法都没有准确的出处。你所说的不一样是相差很多,已经可以判断为两个物质了,还是仅仅相差0.5分钟以内而妄自判断为“不一样”。

所以说,这个保留时间的偏差是否可以接受是因方法、因仪器而定的。一般来说连续进样保留时间可以控制在RSD在0.5%以内,方法重现RSD也不应超过2%,但不是绝对的。
比如一个液相方法,有机相比例对出峰时间影响非常大,而某对照物质在60分钟以后才会出峰,此时该峰的保留时间重现一般来说是非常差的,有可能换系统后保留时间可以相差3-5分钟,但这是可以接受的。反过来说,在3~5分钟内,有两个甚至更多的峰出现,此时峰保留时间差值应该非常小以保证专属性。
再比如,你用普通高效液相做样品,可能保留时间相差1分钟都是可以接受的,但是如果你做超高效液相色谱,可能1分钟就有3个峰出现,这时相差1分钟就是不能接受的。


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你好!你说的是不是校正因子?如果是外标法,f=对照品浓度\/峰面积;如果是内标法,f=(对照品浓度*内标峰面积)\/(对照品峰面积*内标浓度)

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钟竹可由: 7分钟的峰可能是样品分解或者生产杂质,放久了更严重,峰越来越大.

高明区17321588711: 做液相色谱时,对照品有两个峰,怀疑是柱子残留,换了2根柱子,进空白溶剂也还是有峰
钟竹可由: 可能是进样器残留, 如果是手动进样,多清洗一下进样针和进样阀; 如果是自动进样器,可以多设置一下洗针次数或更换洗针液,也可能是进样器的抽样针出了问题,问一下仪器供应商的工程师,应该可以解决的.

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钟竹可由: 你所说的结果如果是峰面积的话,那要看系统有没有变化,如果系统关闭过再重新开启并再次测试,峰面积可能会变化,如果连续进样两次,那么结果应该是一样的,不然的话要考虑仪器系统故障或者样品极不稳定.如果你说的是含量计算结果,那么如果不考虑操作误差和方法误差的话,结果应该是一致的,至少标准偏差应该不超过1%.这个偏差的评估比较复杂,要视很多因素而定,但超过5%甚至10%的话就不太正常了.

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高明区17321588711: 求助:关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 -
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钟竹可由: 内标和样品哪个先出峰是由成分的极性决定的,以反相色谱法来看,如果内标物的极性大于主成分的极性时,那么内标物先出峰,反之内标物后出峰.

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钟竹可由: 你的做法不够准确. 下面我说说我的看法分离度是在一张色谱图中(也就是一次进样过程中)考察分离物质在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标,也就是系统是否适用的指标之一.把两个物质分别进样,再以此来计算分离度,我觉得你对分离度的概念理解得还不够深,这样的话就忽略了这两种物质的相互作用,不能准确的判断这个色谱系统能否将这两种物质分开.另外,系统适应性试验还包括拖尾因子、理论塔板数两项.仅仅只做一项分离度是不够的.

高明区17321588711: 高效液相色谱方法的稳定性怎么测 -
钟竹可由: 你指的是方法学研究里面的溶液稳定性试验,还是整套试验中的稳定性研究?前者就是测试你的待测样品在溶液状态下是否稳定.比如有关物质,配成样品后,在0小时、2小时、4小时、6小时、...

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