请问细胞培养到多大密度就可以接种到六孔板上了？
从培养瓶往板子上种细胞有时的确是需要一些经验和技巧的，因为不同的细胞在瓶子里长的数量是不一样的，我种的是平滑肌细胞，铺的很开，个头又大，这样下来一瓶的细胞量就比较少了。我一般是一个25cm2的培养瓶种四个孔，种好之后放两天后再接着处理，其实我觉得在六孔板接种细胞方面还是可以有据可依的。不怕麻烦可依把细胞拿来计数，然后每个孔接种不同数量的细胞，然后观察细胞的生长情况，这样就可以得到自己的细胞比较准确的资料了。
不过在接种板子的时候细胞生长容易出现一个现象，就是中间的长的密，周围的长的疏，出现这个问题以我在园子上看到的帖子和自己的经历来看，主要是把细胞接种到板子上后再加培养基进行稀释的结果，无论你怎么在板子里面混匀效果都不是很好。到目前我找到的最好的办法就是先在瓶子里稀释好以后直接接种到板子上。
我觉得在细胞接种六孔板这个问题上最重要和最难把握是细胞的接种密度和对细胞生长程度的把握，即如何判断细胞长到什么程度拿去实验效果最好，希望有经验的战友多谈谈这方面的经验。最好能有自己的个案，比如说做流式等这些实验的时候对细胞接种是如何把握的。
以前铺6孔板和24孔板，经常不匀，通常就是战友们所说的中间多，周围少的情况。经过长时间的摸索，终于基本解决了这个难题，基本操作：用前用1mlPBS或培养液将6孔或24孔板润湿，之后将稀释好的细胞混悬液接种于板上，6孔板每孔2ml即可，24孔最好1ml，0.5的效果不如1ml。因为是预先混好的，接种好后不用摇动，直接放入孵箱即可。
关键是先润湿板，减少板与溶液间的界面张力，使细胞在没来得及沉下时，细胞悬液已经在板中铺匀，尤其是较易贴壁的细胞，如HepG2；再就是预先混合细胞，在小的板孔中很难将相对集中的细胞均匀混悬好，实践证明所以还是预混好点。
加药的话，我一般是铺板24小时或48小时后预处理细胞12小时或24小时，再加药刺激18到24小时，算下来要三四天的周期，以上是实验室的传统，当然也会根据文献，细胞种类不同而改变。
我这是条很非常十分特别极其宝贵自己摸索绝对有效的经验：针对12孔板和6孔板，沿着孔一周边缘均匀接种，切记：不要接种孔中心区，若种出来中心区还稀的话，则下次可向中心区打两三滴细胞悬液。还有就是，千万不要像有些介绍说的前后啊或者左右啊或者上下啊晃晃板子什么的，一晃就全到中心区了。
这可是我以前做了两年细胞尝试了坛子里多种方法都不理想之后摸索出来的秘制精华
讨论贴里搬过来的，供参考希望能帮到你
一个，会抑制其他的生长的
生长速度非常快的癌细胞，48孔板长满即可接种到6孔板了，其他生长速度较慢的有限细胞系，则要24孔板或12孔板长满才能接种到6孔板。这个要看具体的实验要求了 一般10五次方或者六次方就可以了。
不可以培养
动物细胞工程的一些问题。 将动物细胞培养多代后,用于核移植的供体...
因为十代以内细胞的细胞核能保持正常的二倍体核型 ，当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变 。
细胞培养为什么选择24、48和72小时?
细胞培养周期为什么选择24小时，48小时和72小时？因为这就是一个细胞的生产周期，可以最大限度的看出细胞是否有分类啊。
如何观察细胞?
当我们从培养箱中拿出细胞培养瓶时:1.注意看培养基的颜色 。多数培养基中都有酸碱指示剂，偏酸性显现黄色，偏碱性则呈紫色。如果培养基的pH值变化很大则考虑培养基是否被污染、或细胞生长过密、或细胞死亡过多、或是培养箱中CO2浓度调节出现了问题。2.看培养基浓度。 培养基变浑浊时说明培养基被污染...
细胞原代培养到90%汇片所需时间?
细胞生长速度一般与培养基有关系，与细胞的种类也有关系，一般而言，细胞长到80%需要2~3天，要根据你的细胞种类，生长环境，生长所需要的因子等有关系。具体需要您进行实时查看的。
动物细胞工程的一些问题。 将动物细胞培养多代后,用于核移植的供体...
以保持细胞正常的二倍体核型
细胞培养一般分为哪两种情况
可以理解，在任何时候，细胞从一个瓶子接种到另一个瓶子时总会丢失一部分，因此，在客观上细胞必定有所稀释。传代代数这一概念常常容易同“增殖代数”相混淆。细胞“一代”一词仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间。如某一细胞系为第153代，即指该细胞系已传代153次。它与细胞“增殖代数”（细胞...
一个瓶子中的细胞,如果可以培养到50代,怎么分原代培养的和传代培养
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行...
体外卵细胞培养 卵细胞培养到什么时期
体外卵细胞培养 卵细胞培养到什么时期 : 减数第二次分裂中期
细胞污染问题
我的细胞在高倍镜下观察有很多会动的小虫,但是培养基不变浑浊,也不影响细胞生长,低倍镜下看不到小虫,但是发现培养基中有很多小东西,这是什么污染啊?400倍才能看到动,不是贴壁动... 我的细胞在高倍镜下观察有很多会动的小虫,但是培养基不变浑浊,也不影响细胞生长,低倍镜下看不到小虫,但是发现培养基中有...
还有我记得我们老师说动物细胞培养到个体才能说动物细胞核有全能性...
干细胞培育出器官就是说明动物细胞也具有细胞全能性，但是因为其全能性受抑制所以不能培育成完整个体，与植物细胞不同。但是胚胎干细胞的全能性未受抑制，可以完全表达出来，可以培育成完整个体。
解侍罗盖： 生长速度非常快的癌细胞,48孔板长满即可接种到6孔板了,其他生长速度较慢的有限细胞系,则要24孔板或12孔板长满才能接种到6孔板.
梅河口市18746691565： 细胞之接种密度为何? - ？
解侍罗盖： 依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可.细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因.
梅河口市18746691565： 悬浮细胞做MTT时接种密度多少为宜呢 - ？
解侍罗盖： 如果细胞生长良好25000-30000就可以,你的接种密度不算太高 我养的悬浮细胞在密度为40000的时候,测出的OD值太高
梅河口市18746691565： 原代细胞培养常见问题有哪些 - ？
解侍罗盖： 原代细胞培养常见问题的原因及其解决的办法: 1. 培养液pH值变化太快 可能原因 (1)CO2张力不对 (2)培养瓶盖拧得太紧 (3)NaHCO3缓冲系统缓冲力不足 (4)培养液中盐浓度不正确 (5)细菌、酵母或真菌污染 建议解决方法 (1)按...
梅河口市18746691565： 测生长曲线,96孔细胞培养板每孔加多少细胞合适 - ？
解侍罗盖：[答案] 不同的细胞生长速度也不一样,为了在测定期间细胞不致于长满全孔,最好以较少量的细胞接种.建议先做个预试验,以不同密度梯度的细胞数量接种细胞板孔,看多大接种密度细胞会在测定期内长满细胞板孔,选择比此密度稍低的接种量就可以了....
梅河口市18746691565： 细胞之接种密度为何? - ？
解侍罗盖：[答案] 博凌科为生物科技-为你依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可.细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因.
梅河口市18746691565： 为什么检查细胞渗透性的试剂是一定浓度的 - ？
解侍罗盖： 为什么检查细胞渗透性的试剂是一定浓度的 支原体检测试剂盒操作步骤:贴壁细胞:1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中,接种密度为1-2*104.同时,接种正常无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照.2.5天后,先吸去培养液,再加入1...
梅河口市18746691565： 为什么接种原代细胞到培养皿密度不同 - ？
解侍罗盖： 细胞很微小,接种进去,都是随机的,我们看不见.有可能两个细胞黏在一起,也有可能分离的很开.就好像撒一撮芝麻在培养基那么大的地方上,我们不能知道它会怎么落.
梅河口市18746691565： 单细胞培养的方法有哪些?各有什么特点? - ？
解侍罗盖： 1.转瓶培养 这个比较老的工艺,在逐步淘汰,不过投资少,技术含量低,人员经少量培训就可以操作. 2.悬浮培养 非贴壁依赖性细胞的一种培养方式.细胞悬浮于培养基中生长或维持.某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养....
梅河口市18746691565： OPTI - MEM进行贴壁细胞培养的实验方法是什么? - ？
解侍罗盖： 无血清培养基可以提供细胞贴壁需要的一些基质,本文总结了利用无血清培养基OPTI-MEM进行贴壁细胞的脂质体转染试验材料,步骤、个人经验以及问题分析. 贴壁细胞的脂质体转染 一、实验材料 1、宿主细胞CHO(贴壁细胞) 2、脂质体...
