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作者&投稿:休李 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)是Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株,并在建株细胞涂片中用电镜观察到疱疹病毒颗粒,故名。

一、生物学性状

EB病毒的形态与其他疱疹病毒相似,园形、直径180nm,基本结构含核样物、衣壳和囊膜三部分。

核样物为直径45nm的致密物,主要含双股线性DNA,其长度随不同毒株而异平均为17.5×104bp分子量108。衣壳为20面体立体对称,由162个壳微粒组成。囊膜由感染细胞的核膜组成,其上有病毒编码的膜糖蛋白,有识别淋巴细胞上的EB病毒受体,及与细胞融合等功能。

此外在囊膜与衣壳之间还有一层蛋白被膜。

EB病毒仅能在B淋巴细胞中增殖,可使其转化,能长期传代。被病毒感染的细胞具有EBV的基因组,并可产生各种抗原,已确定的有:EBV核抗原(EBNA),早期抗原(EA),膜抗原(MA),衣壳抗原(VCA),淋巴细胞识别膜抗原(LYDMA)。除LYDMA外,鼻咽癌患者EBNA、MA、VCA、EA均产生相应的lgG和LgA抗体,研究这些抗原及其抗体,对阐明EBV与鼻咽癌关系及早期诊断均有重要意义。EB病毒长期潜伏在淋巴细胞内,以环状DNA形式游离在胞浆中,并整合天染色体内。

二、致病性

EB病毒在人群中广泛感染,根据血清学调查,我国3~5岁儿童EB病毒VCA-lgG抗体阳性率达90%以上,幼儿感染后多数无明显症状,或引起轻症咽炎和上呼吸道感染。青年期发生原发感染,约有50%出现传染性单核细胞增多症。主要通过唾液传播,也可经输血传染。EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖,然后感染B淋巴细胞,这些细胞大量进入血液循环而造成全身性感染。并可长期潜伏在人体淋巴组织中,当机体免疫功能低下时,潜伏的EB病毒活化形成得复发感染。

由EBV感染引起或与EBV感染有关疾病主要有三种:

(一)传染性单核细胞增多症

是一种急性淋巴组织增生性疾病。多见于青春期初次感染EBV后发病。临床表现多样,但有三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大。随着疾病的发展,病毒可播散至其他淋巴结。肝脾脏大、肝功能异常,外周血单核细胞增多,并出现异型淋巴细胞。偶而可累及中枢神经系统(如脑炎)。此外,某些先天性免疫缺陷的患儿中可呈现致死性传染性单核白细胞增多症。

(二)非洲儿童淋巴瘤(即Burkitt淋巴瘤)

多见于5~12岁儿童,发生于中非新几内亚和美洲温热带地区呈地方性流行。好发部位为颜面、腭部。所有病人血清含HBV抗体,其中80%以上滴度高于正常人。在肿瘤组织中发现EBV基因组,故认为EBV与此病关系密切。

(三)鼻咽癌我国南方(广东广西)及东南亚是鼻咽癌高发区,多发生于40岁以上中老年人。HBV与鼻咽癌关系密切,表现(1)在所有病例的癌组织中有EBV基因组存在和表达(2)病人血清中有高效价EBV抗原(主要HCV和EA)的lgG和lgA抗体。(3)一病例中仅有单一病毒株,提示病毒在肿瘤起始阶段已进入癌细胞。

三、免疫性

人体感染EBV后能诱生抗EBNA抗体,抗EA抗体,抗VCA抗体及抗MA抗体。已证明抗MA抗原的抗体能中和EBV。上述体液免疫系统能阻止外源性病毒感染,却不能消灭病毒的潜伏感染。一般认为细胞免疫(如T淋巴细胞的细胞毒反应)对病毒活化的“监视”和清除转化的B淋细胞起关键作用。

四、微生物学诊断

EBV分离培养困难,一般用血清学方法辅助诊断。在有条件实验室可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物。

(一)EBV特异性抗体的检测用免疫酶染色法或免疫荧光技术检出血清中EBVlgG抗体,可诊断为EBV近期感染。在鼻咽癌血清中可测出VCA-lgG抗体达90%左右,病情好转;抗体效价不降,因此对鼻咽癌诊断及预后判断有价值。尤其我国学者大规模人群调查,发现抗EA-lgA效价上升,极大地增加了得鼻咽癌的危险性,为该癌肿的早期诊断,提供了重要手段。

(二)嗜异性抗体凝集试验主要用于传染性单核白细胞增多症的辅助诊断,患者于发病早期血清可出现lgM型抗体,能凝集绵羊红细胞,抗体效价超过1:100有诊断意义,但只有60~80%病例呈阳性,且少数正常人和血清病病人也含有此抗体,不过正常人和血清病人的抗体经豚鼠肾组织细胞吸收试验,可变为阴性。

五、防治原则

目前有二种疫苗问世,其中之一为我国用基因工程方法构建的同时表达EBVgp320和HBsAg的痘苗疫苗,重点使用在鼻咽癌高发区。另一为提纯病毒gp320膜蛋白疫苗,正在英国大学生患者中作小规模接种,以期观察该疫苗是否能降低传染性单核细胞增多症的发病率。

无环鸟苷(AC)和丙氧鸟苷(DHPG)可抑EBV复制,均有一定疗效。


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一、细胞培养的设施(参观细胞培养实验室)

1.无菌实验室(图1)

无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域。亦可把净化工作台置于

操作室中,这样更为安全。此室最好能与外界隔离,不能穿行或受其他因素干扰。

操作室的大小依需要而定,一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。更衣间

放在外,主要供更换衣帽、鞋子等之用。缓冲间位于更衣间与操作间之间,也可

同时和几个操作间相通。操作间放在内间,主要供无菌操作和细胞培养,房间应

不受日光直射,大小适当,高度适宜(2.5m)。

2.净化工作台

净化工作台也称超净工作台,其种类繁多,主要有三大类:第一类是侧流式;

第二类为直流式;第三类为外流式,或称为水平层流式。它们的基本工作原理大

同小异:内设鼓风机,驱动空气通过高效滤器过滤净化后,让净化空气徐徐通过

台面空间,使操作区构成无菌环境。

3.恒温培养箱于细胞培养的培养箱分变通电热恒温培养箱和C02 培养箱。

4.其他设备:电热干燥箱、冰箱、显微镜、水纯化装置、细胞冷冻储存器、清毒

器、抽滤装置等。

电热干燥箱:主要用于烘干消毒玻璃器皿,也可用于干热消毒。在用于

干热消毒时,温度一般要求达到160℃(灭菌)或180℃(去除热原),消毒时间须

在2h 以上。细胞培养实验室常用的干燥箱为鼓风式电热干燥箱(规格为5605 mm

×500 mm×500mm),虽然升温较慢,但温度均匀,效果较好。鼓风与升温同时开

始,待温度达100℃后再打开,以避免玻璃器皿突然遇冷而炸裂损坏。金属解剖

器械、塑料制品、橡胶制品等不能放在干燥箱内灭菌。

冰箱(图6、图7、图8):一般用双门冰箱,既有4℃左右的冷藏区,又有0℃

以下的冷冻区。如条件许可,应有一台低温(-20℃)冷藏冰柜和一台超低温冰箱(<-70℃)。前者主要用于储存培养液、生理盐水、Hanks 液、试剂等培养用的物品和短期保存的组织标本,后者用于保存需较长时间存放的制剂,如酶、血清和组织标本或细胞等。冰箱应保持清洁和通风,以防止污染。禁止存放有毒、易燃、易挥发物品。

显微镜:应有一台普通显微镜和一台倒置显微镜。前者用

于细胞计数和一般观察,后者用于观察细胞的生长情况和有无污染。若条件许可,

应配置照相系统和荧光显微镜。

水纯化装置:这也是细胞培养不可缺少的设备。因为体外培养细胞对水

的要求较高,无论是细胞培养液还是配试剂等都应使用两次以上蒸馏的双蒸水

(新鲜三蒸水)。

细胞冷冻储存器:主要是液氮容器,容积大小根据实验室需求选购。

离心机:一般应配有普通离心机,最好应配置高速冷冻离心机。普通离心机转速在4000r/min 以下,台式的就可满足要求。用于制备细胞悬液、漂洗、分离细胞。




网桥是什么啊?哪位好心的能给个详细点的解释啊?
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各位好心人,帮忙找一段细节描写(描写什么都可以)
④场面细节描写:《药》中的一段描写:“老栓也向那边看,却只见一堆人的后背;都伸得很长,仿佛许多鸭,被无形的手捏住了的,向上提着。静了一会,似乎有点声音,使人动摇起来,轰的一声,都向后退,一直散到老栓立着的地方,几乎将他挤倒了。”这段文字写的是革命者夏瑜被杀的情景,而那些无聊的人们都伸长了颈项...

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首先你要把信封整好,格式跟咱平时写信相反,收信人姓名、地址要写在信封的右下角,寄信人姓名、地址要写在信封的左上角或信封背面。 但是记得要用英文写,这是拜仁的英文地址:FC Bayern München Autographs P.O. Box 90 04 51 D - 81504 München 而信封要用专门的航空信封,因为你是要寄往外...

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完全派遣的话就是要包招聘的,你需要有招聘团队,而且还得比较给力,招不到人白瞎。转移派遣是现在人力资源行业里面竞争非常大的一个业务,人力资源公司只要提供一下劳动合同,帮忙买下社保,然后发下公司,员工出现纠纷协助解决一下就可以了,技术含量不高。做这行最主要的是靠人脉,如果之前做过HR,有...

哪位好心人帮我解下命盘啊..详细点的喔
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哪位好心人能帮我分析下学习英语的方法!谢谢
一、“心到”。在课堂上应聚精会神,一刻也不能懈怠,大脑要始终处于积极状态,思维要活跃、思路要开阔,心随老师走,听懂每一句话,抓住每一个环节,理解每一个知识点,多联想、多思考,做到心领神会。 二、“手到”。学英语,一定要做课堂笔记。因为人的记忆力是有限的,人不可能都过目不忘,记忆本身就是不断与...

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"装"即指"做作",言谈举止不够坦诚。在过去,"装"一般贬义。现如今,"装","做作"有时候还蛮可爱的。女孩子有时候会故意"装",当然男生偶尔也会,在同性或异性眼里都蛮可爱的。 不过,如果过头了就会惹人厌,特别是同性之间,对"装"比较苛刻,要把握好度。"装","做作"都没...

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玉树藏族自治州19397509082: 哪位好心人能告诉我中冶京城(湘潭)重工设备有限公司怎么样?小弟被?
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玉树藏族自治州19397509082: 2.只给你托盘天枰,一个空瓶.水.测出牛奶的密度(写出实验步骤、用数学表达式写出牛奶的密度哪位好心人 速度回答好吗 被急用啊 (准确答案优先) -
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