为什么用OD260/OD280评定核酸纯度

有人能详细帮我解释一下RNA的OD260/280和OD230/260的意思吗~

OD260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。
纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下OD260 / OD280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
OD230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。
【DNA纯度判断根据】：DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断，符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6-1.8之间，低于此范围表明蛋白质含量超标，高于此范围表明样品中含有RNA。
【光密度概念】：OD是optical density（光密度）的缩写， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。吸光度（absorbance）是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数，影响它的因素有溶剂、浓度、温度等。
【吸光度概念】：吸光度用A表示，A＝abc，其中a为吸光系数，单位L/(g•cm),b为液层厚度（通常为比色皿的厚度），单位cm ，c为溶液浓度，单位g/L 影响吸光度的因数是b和c。a是与溶质有关的一个常量，温度通过影响c，而影响A。 一般来说OD260代表核酸的吸光度,OD280代表蛋白质的吸光度,OD230代表其他杂质(多糖等)的吸光度。
【备注】：A代表吸光值，而OD是光密度值，A260/A280与OD260/OD280的意思是一样的。

一、概念解析首先我们需要明白的是，OD260和OD280，OD230代表了什么意思。
1、OD260代表了核酸的吸光度;
2、OD280代表了蛋白质的吸光度;
3、OD230代表了苯酚类等杂质的吸光度;
二、分析如下:1、由此可见，决定DNA的因素主要是260这个值，而其他的两个值只是用来判断样本中是否有其他杂质，杂质是什么物质这个问题。
至于后面的OD260/OD280,OD260/OD230这两个比值，其实就是在满足以上OD260的情况下才去参考的值，用于区分DNA的纯度问题。
2、除去DNA的本质吸光度问题，其他的暂不具有可参考意义，所以及使即使比值是正常的，但不能说明实质性问题。
三、问题查找1、以上结果首先比对抽提方法，以及使用试剂盒是否符合植物的DNA提取。
2、通过琼脂糖凝胶电泳或者4200或2100质控DNA的基本属性，观察此时值的变化。
3、也可以通过sanger测序简单验证，结果更准确。

核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。

在波长260nm紫外线下，1 OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml；单链DNA或RNA为40μg/ml；寡核苷酸为20μg/ml。可以此来计算核酸样品的浓度。

通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值（A260/A280）可以估计核酸的纯度。纯DNA的比值为1.8，纯RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8，说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。样品中如混有RNA比值上升。

扩展资料

显示DNA的传统方法是富尔根（Feulgen）反应，切片先用稀盐酸处理，DNA经弱酸（1mol/L HCL）水解后，在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。

原理同PAS反应，使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响，故染色具有DNA特异性。准确的温度和盐酸浓度，适宜的水解时间是成功的关键。水解过度或不足均降低染色强度。

核酸可分为脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）和核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）。

核酸不但是一切生物细胞的基本成分，还对生物体的生长、发育、繁殖、遗传及变异等重大生命现象起主宰作用。它在生物科学的地位，可用“没有核酸就没有生命”这句话来概括。

参考资料来源：百度百科-核酸

参考资料来源：百度百科-核酸显示法

参考资料来源：百度百科-OD260/280比值

紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的： 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理，掌握测定方法。原理： 核酸的最大吸收波长为260nm，蛋白质为280nm，在波长260nm时，1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml，单链寡核苷酸的含量为30μg/ml，可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值（OD260/OD280），估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。试剂与仪器： 提取的质粒DNA，紫外分光光度仪。操作步骤：1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。2) 取质粒DNA样品2μl，用水稀释100倍，转入分光光度计的石英比色杯中。3) 在260nm和280nm分别读出样品光密度值。如果样品浓度单位为μg/μl，则样品DNA浓度为OD 值的10倍，即如OD<SUB>260</SUB>=0.1，则样品浓度即为1μg/μl。4) 若OD<SUB>260</SUB>/OD<SUB>280</SUB>大于1.8，说明仍有RNA，可以考虑用RNA酶处理样品，若小于1.8，说明样品中含有蛋白质或酚，应再用酚/氯仿抽提，以乙醇沉淀纯化DNA。

核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。
在波长260nm紫外线下，1 OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml；单链DNA或RNA为40μg/ml；寡核苷酸为20μg/ml。可以此来计算核酸样品的浓度。
通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值（A260/A280）可以估计核酸的纯度。纯DNA的比值为1.8，纯RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8，说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。样品中如混有RNA比值上升。

我们知道 核酸的特征紫外吸收峰在260nm，蛋白质的特征吸收峰在280nm。
一般情况下，在核酸提取过程中，最容易被污染的物质是蛋白质。因此分别测定核酸与蛋白质在其各自特征波长下的吸光度，以其比例系数就可以衡量核酸纯度了。

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称多县14761477426： 怎样对基因组DNA质量检测?？
素刻信达： 用凝胶电泳看,有没有质白质和RNA等物质的污染,还可以测OD,用OD260/280来判断, 当OD260/OD280&lt; 1.8,表示蛋白质含量较高 当OD260/OD280&gt; 2.0,表示RNA含量较高 当OD260/OD280=1.8~2.0,表示DNA较纯

称多县14761477426： 如何使用简单的实验方法检测DNA纯度?？
素刻信达： 用紫外分光检测就很简单啊 将待测DNA溶液作适当稀释,选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算DNA浓度. DNA浓度(ng /µL)=OD260*50*稀释倍数 当OD260/OD280&lt; 1.8,表示蛋白质含量较高 当OD260/OD280&gt; 2.0,表示RNA含量较高 当OD260/OD280=1.8~2.0,表示DNA较纯

称多县14761477426： 知道OD260怎么算RNA 提取的RNA总量怎么算?我知道公式OD260*稀释倍数*40µg/ml但稀释倍数是哪个呀?我是用50µl溶的RNA,后取2µl稀释到200µl... - ？
素刻信达：[答案] 一般按照1OD=40µg/ml 计算RNA浓度.你将2µl样品稀释到200µl,稀释倍数就是100倍,所以你提取的RNA浓度=0.154*100*40µg/ml=616µg/ml.因为你RNA的量是50µl,所以你提取的RNA总量=616...

称多县14761477426： javascript:openwindow(look.asp?id1=19774&od2=839',1024768)什么意思? - ？
素刻信达： 在新窗口中打开look.asp这个网页,并传参数od2 值为839',1024768

称多县14761477426：  如图,点A,B为直线y=x上的两点,过A,B两点分别作y轴的平行线交双曲线y= 1 x (x>0)于C,D两点,若2BD=5AC,则OC2 - 4 25 OD2的值为___. - ？
素刻信达：[答案] 延长AC交x轴于E,延长BD交x轴于F. 设A、B的横坐标分别是a,b, ∵点A、B为直线y=x上的两点, ∴A的坐标是(a,a),B的... 4(a2+ 1 a2)- 21 2, 在直角△OCE中,OC2=OE2+CE2=a2+ 1 a2,同理OD2=b2+ 1 b2, ∴OC2- 4 25OD2=(a2+ 1 a2)- 4 25(...

称多县14761477426： 已知AB是圆O的直径,弦CD⊥AB,垂足为H,AH=5,CD=4根号5,点E在圆O上,射线AE与射线CD相交于F,设AE=X,DF=Y - ？
素刻信达： :(1)连接OD,设⊙O的半径OA=OD=r,∵AB是⊙O的直径,弦CD⊥AB,∴DH= DC= *4 =2 ,在Rt△OHD中,∵OD2﹣OH2=DH2,OH2=(A∴r2﹣(5﹣r)2=(2 )2,解得r=∴⊙O的半径为 ;(2)作OG⊥AE,垂足为G,如图,∴AG= AE= x,...

称多县14761477426： 捷安特TCR - 2 和 美利达CF - 903 - ？
素刻信达： 【美利达CF-903】 基本规格: 零售价:7980元 颜色:丽黑(红标);丽黑(绿标) 车架:Scultura comp-E 避震前叉:Road carbon comp 变速系统:Shimano Tiagra控制杆、前变+105后变 套装飞轮:Shimano CS-4600-10 12-28 三齿盘曲柄...

称多县14761477426： 能不能给我发一个计算器,c++的? - ？
素刻信达： 建议: 2.合计(概算价值)=建筑工程(含土建、水、暖)+工艺设备+强电+弱电+其他.即在L7格用常用工具栏上的“自动求和”按钮输入“=SUM(F7:K7)”,再将公式从L8纵向复制到L26.

称多县14761477426： c++友元函数程序改正 - ？
素刻信达： 测试过没有问题,#include#include using namespace std; class point{ private: int h; int l; public: point(int a, int b); ~point(); friend int distance(point &op, point &od); }; point::point(int a = 0, int b = 0){ h = a; l = b; } point::~point(){} int distance(point &...

称多县14761477426： 玛雅文明的资料谁有?？
素刻信达： 我的空间里有转载了一些些··呵呵·不知道对你有没帮助 玛雅文明简介 玛雅文明诞生于公元前3113年,是古代位于墨西哥东南部、瓜地马拉和犹加敦半岛(Yucatan Peninsula)等中南美洲区域的文明.通常玛雅文明被划分为三个时期,前古...