高效液相色谱法的计算方法是怎样的？

高效液相色谱法的计算公式~

这个也太笼统了。。。含量计算？有关物质计算？？
给你个大原则，HPLC的方法学不是做了线性吗，就根据这个来就行。
C对/A对=C样/A样
C是浓度，A是峰面积，像含量计算，有按平均装量计算的，有按无水物计算的，公式稍微有点差别，自己可以导出来

高效液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂（ 硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高；
高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。

楼主，您好。 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。　　1.对仪器的一般要求　　所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定.常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料，用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。　　在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符合紫外分光光度法（附录ⅣＡ）项下对溶剂的要求。　　正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变， http://www.rmhot.com/plist_1/plist_1_14_0_1.html　　以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。一般色谱图约于20分钟内记录完毕。　　2.系统适用性试验　　按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子.　　(1)色谱柱的理论板数(n)　　在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t<[R]>（以分钟或长度计，下同，但应取相同单位）和半高峰宽（W<[h/2]>），按n＝5.54(t<[R]>／W<[h/2]>)<2>计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等），使理论板数达到要求。　　(2)分离度　　定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度（R）的计算公式为：2(t<[R2]>－t<[R1]>)R＝──W<[1]>＋W<[2]>式中t<[R2]>为相邻两峰中后一峰的保留时间；t<[R1]>为相邻两峰中前一峰的保留时间；W<[1]>及W<[2]>为此相邻两峰的峰宽。除另外有规定外，分离度应大于1.5。　　(3)拖尾因子为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定，或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。拖尾因子计算公式为：W<[0.05h]>T＝──────2d<[1]>式中W<[0.05h]>为0.05峰高处的峰宽；d<[1]>为峰极大至峰前沿之间的距离。除另有规定外，T应在0.95～1.05间。也可按各品种校正因子测定项下，配制相当于80％、100％和120％的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成三种不同浓度的溶液，分别注样3次，计算平均校正因子，其相对标准偏差应不大于2.0％。　　3.测定法定量测定时，可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时，须采用峰面积法。(1)面积归一化法测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定，除另有规定外，可为该品种项下主成分保留时间的倍数。　　(2)主成分自身对照法　　当杂质峰面积与成分峰面积相差悬殊时，采用主成分自身对照法。在测定前，先按各品种项下规定的杂质限度，将供试品稀释成一定浓度的溶液作为对照溶液，进样，调节检测器的灵敏度或进样量，使对照溶液中的主成分色谱峰面积满足准确测量要求。然后取供试品溶液，进样，记录时间，除另有规定外，应为主成分保留时间的倍数。根据测得的供试品溶液的各杂质峰面积及其总和并和对照溶液主成分的峰面积比较，计算杂质限度。　　(3)内标法测定供试品中杂质的总量限度　　采用不加校正因子的峰面积法。取供试品，按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图；再配制含有内标物质的供试品溶液，在同样的条件下注样，记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外，应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数，色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30％以上，否则应调整注样量或检测器灵敏度。　　(4)内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量　　按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液，取一定量注入仪器，记录色谱图，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子：A<[s]>／m<[s]>校正因子（f）＝─A<[r]>／m<[r]>式中A<[s]>为内标物质的峰面积或峰高；A<[r]>为对照品的峰面积或峰高；m<[s]>为加入内标物质的量；m<[r]>为加入对照品的量。　　再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品（或其杂质）峰和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量：A<[x]>含量（m<[x]>）＝f×──A<[s]>／m<[s]>式中A<[x]>为供试品（或其杂质）峰面积或峰高；m<[x]>为供试品（或其杂质）的量；f、A<[s]>和m<[s]>的意义同上。　　当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液使用同一份内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称（量）取。　　(5)外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量，按各品种项下的规定，精密称(量)取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量：A<[x]>含量（m<[x]>）＝m<[r]>×──A<[r]>式中各符号意义同上由于微量注射器不易精确控制进样量，当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量时，以定量环进样为好。

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蓟县19524679391： 高效液相色谱法的计算公式 - ？
柯阁复方：[答案] 测定方法定量测定时,可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法.但用归一法或内标法测定杂质总量时,须采用峰面积法.面积归一化法测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正...

蓟县19524679391： 高效液相色谱怎么分析分析色谱图和数据,计算含量,有色谱条件 - ？
柯阁复方：[答案] 计算含量的方法很多: 面积归一化法,外标法,内标法 常用的: 面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质. 杂质(%)=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%(这个...

蓟县19524679391： 高效液相色谱如何计算含量 - ？
柯阁复方： 先计算供试品溶液浓度:20.96*4.909/3.411=30.16 微克每毫升计算样品百分含量:30.16*10*50/25/1.0156/1000000*100%=0.05939%由于你没有提供平均片重,还不能计算每片的含量公式...

蓟县19524679391： 高效液相色谱怎么计算和制作标准混合物 - ？
柯阁复方： * 用外标1、确定析条件(流相比例色谱柱类型PH值柱温等)用照标准品进行析保存析图利用色谱工作站校校曲线(校);2、用同条件析未知品根据峰间确定品(与标准品相同物质峰间应该相同)照标准品校曲线计算未知品含量

蓟县19524679391： 高效液相色谱的原理及分析方法 - ？
柯阁复方： 分析色谱图 手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定),打开定量环将液相针里的液体匀速...

蓟县19524679391： 高效液相色谱法测定中精密度与回收率怎么计算 - ？
柯阁复方： 密度系指在规定的测定条件下,用一个均匀样品,经多次取样测定所得各个结果之间的接近程度.精密度一般用偏差或相对标准表示. 用标准偏差或相对标准差表示时,取样测定次数应有统计学意义,至少用6次结果进行评价 相同条件下,由一...

蓟县19524679391： 高效液相色谱回收率如何计算 ？
柯阁复方： 加标回收样品加标回收:相同的样品取两份,其中一份加入定量的待测成分标准物,对于它的计算方法,给定了一个理论公式:加标回收率=(加标试样测定值-试样测)/测定值.色谱:色谱(英语:Chromatography)是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用.色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果.色谱法起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科——色谱学.

蓟县19524679391： 高效液相色谱如何计算含量供试品处理方法的确定取本品29片,精密称定,研细,混匀,取约1克,精密称定,置具塞锥形瓶中,加浓氨试液2毫升,振摇使... - ？
柯阁复方：[答案] 先计算供试品溶液浓度:20.96*4.909/3.411=30.16 微克每毫升 计算样品百分含量:30.16*10*50/25/1.0156/1000000*100%=0.05939% 由于你没有提供平均片重,还不能计算每片的含量 公式就不用写了,搞清楚计算原理,怎么算都行.

蓟县19524679391： 高效液相色谱法的计算公式 - ？
柯阁复方： [编辑本段]测定方法定量测定时,可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法.但用归一法或内标法测定杂质总量时,须采用峰面积法. 面积归一化法测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因...