多克隆抗体是怎么产生免疫的?

作者&投稿:季祝 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
多克隆抗体的免疫动物~

供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体,多采用大动物;如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物;如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体;如果难以获得的抗原,且抗体的需要量少,则可以采用纯系小鼠制备;一般实验室采用的抗体,多用兔和羊制备。免疫用的动物最好选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体。由于对免疫应答的个别差异,免疫时应同时选用数只动物进行免疫。 抗原是多种多样的,而且千差万别。就其化学成分而言,有蛋白质抗原、类脂抗原、多糖类抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,有完全抗原和不完全抗原。为了获得较好的抗血清,最好是选用蛋白质抗原,如要制备用于筛选细菌表达的 cDNA 文库或免疫印迹的抗血清,最好选用可降解的蛋白质抗原。不同的抗原,其免疫原性的强弱均不相同,这种免疫原性的强弱取决于抗原的分子量、化学活性基团、立体结构、物理形状和弥散速度等。抗原的免疫剂量是依照给予动物的种类、免疫周期以及所要求的抗体特性等不同而不同。剂量过低,不能引起足够强的免疫刺激,免疫剂量过多,有可能引起免疫耐受。在一定的范围内,抗体的效价是随注射剂量的增加而增高。蛋白质抗原的免疫剂量比多糖类抗原宽。一般而言,小鼠的首次免疫剂量为 50μg~400μg/次, 大鼠为100μg~1 000μg/次, 兔为 200μg~1 000μg/2次。加强剂量为首次剂量的 1/5~2/5。免疫剂量与注射途径有关,一般而言,静脉注射剂量大于皮下注射,而皮下注射又比掌内和跖内皮下注射剂量大,也可采用淋巴结内注射法。加佐剂比不加佐剂的注射剂量要小,对家兔而言,采用弗氏完全佐剂,则需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐剂则注射剂量应大10 倍以上。如要制备高度特异性的抗血清,可选用低剂量抗原短程免疫法。如需要获得高效价的抗血清,宜采用大剂量长程免疫法。免疫周期长者,可少量多次。免疫周期短者,应大量少次。 两次注射的间隔时间应长短适宜,太短起不到再次反应的效果太长则失去了前一次激发的敏感作用。一般间隔时间应为 5~7 天,加佐剂者应为 2 周左右。 注射的 Ig 纯度高,则一般不易引起过敏反应,如注射血清,即使是少量,在再次免疫时,极易引起过敏反应,所以一定要采取措施。

抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言,抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体 ,由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体 。

抗原有两个基本特性,即抗原性和免疫原性。有抗原性的物质不一定有免疫原性,所以由此引出半抗原和完全全抗原,半抗原必须经过经过一定的改造(偶联蛋白载体BSA,OVA或者HSA等大分子物质)方能成为完全。一般而言完全抗原分子量越大(大于10KDa),结构越复杂引起免疫反应的能力也就越强。
抗体就是能与特异性抗原结合的免疫球蛋白,抗体一般分为多克隆抗体和单克隆抗体,多克隆抗体能与抗原的多个表位结合。本篇主要讲述兔来源的多克隆抗体的生产步骤

多抗一般制备流程:完全抗原的准备→兔子的免疫→ 效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。

多克隆抗体是由抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。

抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。




简述单克隆抗体的制备过程及原理。
融合成功的杂交瘤细胞经筛选和克隆化建株,可获得能够产生某种特异性抗体的杂交瘤细胞。

简述单克隆抗体制备的原理。
(1)淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说,即一个克隆产生一种抗体。(2)将免疫B细胞与骨髓瘤细胞杂交,产生杂交瘤细胞,保持双方亲代细胞产生抗体与无限繁殖的特性。(3)利用代谢缺陷补救机制筛选出杂交瘤细胞,经有限稀释法,并进行克隆化,然后大量培养增殖,制备所需的各种单克隆抗体。

多克隆抗体是怎么合成的?
多克隆抗体是由抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗...

单克隆抗体是什么
1、单克隆抗体的概念单克隆抗体,英文名为MonoclonalAntibody(mAb),是指由单一克隆B细胞株所产生的能够特异性结合单一抗原的抗体。与传统的多克隆抗体相比,单克隆抗体的优点在于其结构单一性和特异性强。研究者可以选择性地制备针对某一特定生物分子的单克隆抗体,进而精确监测、分离这些分子,以及开发新...

单克隆抗体的制备步骤
1、免疫动物的选择:免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。2、细胞融合:采用二氧化碳气体处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备...

单克隆抗体的制备原理是什么
1、要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长;2、实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞;3、杂种骨髓瘤细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的...

单克隆抗体的制备原理是什么
单克隆抗体技术原理如下:由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交...

单克隆抗体是怎么制备的?
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备...

制备单克隆抗体的过程
(二)骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。 选择骨髓瘤细胞的条件:①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原一致;②骨髓瘤细胞必须...

简述单克隆抗体的发展历程、原理及应用是?
1975年,英国的科学家Kohler和Milstein合作将已适应于体外培养的小鼠骨髓瘤细胞与绵羊红细胞免疫小鼠脾细胞(B淋巴细胞)进行融合,发现形成的杂交细胞既能在体外无限增殖,又能持续的分泌特异性的抗体,通过克隆化的培养可获得纯的细胞可以产生单克隆抗体。因此在1984年获得了诺贝尔医学和生理学奖。在单克隆...

东平县13271798501: 多克隆抗体是怎么产生免疫的? -
兆昆刚尼索: 多克隆抗体是由抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体.抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体.由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体.

东平县13271798501: 单克隆和多克隆 -
兆昆刚尼索: 单克隆抗体的基本概念:抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的.每一个B淋巴细胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因.动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细...

东平县13271798501: 多克隆抗体的制作步骤用疫苗制备抗体,剂量怎么算 -
兆昆刚尼索: 一、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:1、制备抗原.2、选择实验动物.3、动物免疫.4、试取血进行测试,看看是否成功免疫.5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清.6、纯化出抗体.7、鉴定抗体.包括纯度以及特异性...

东平县13271798501: 多克隆抗体血清的制备原理及流程 -
兆昆刚尼索: 脂联素作为抗原免疫动物,刺激动物机体的B淋巴细胞,产生相应的抗体,采血分离血清,就是所谓的抗血清也就是多克隆抗体. 如果要制备高免血清,你的多免疫几次,4-5次,第一次免疫加福氏完全佐剂,后几次加福氏不完全佐剂,最后一次加强免疫直接免疫不用加佐剂.每次间隔两周,最后一次免疫3天后采血分离血清.

东平县13271798501: 名词解释:多克隆抗血清. 要专业的解释,谢谢 -
兆昆刚尼索: 抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody).由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体 抗血清(antiserum)是一种含有多克隆抗体的血清.通过注射抗血清可以传递被动免疫(passive immunity)治疗许多疾病.

东平县13271798501: 抗体是活细胞还是细胞产物 -
兆昆刚尼索: 抗体是细胞产物.1、抗体是浆细胞(效应B细胞)的一种分泌物,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面,能鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质.2、抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白...

东平县13271798501: 多克隆的抗体和单克隆的抗体的区别? -
兆昆刚尼索: 区别有很多呀,定义、制备的过程、应用的范围都是不同的.定义:由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体.而由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合...

东平县13271798501: 针对某种抗原的抗体能诱导机体产生抗体吗 -
兆昆刚尼索: 一种生物的抗体可以作为抗原诱导另一种生物产生抗体,但不能在自体诱导产生抗抗体.

东平县13271798501: 多克隆抗体的纯化方法都有哪些 -
兆昆刚尼索: 纯化抗体的方法较多,建议用蛋白A 或蛋白G 微球纯化法作为最常用的方法.这种方法效率高,能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体,而且随着商品化的蛋白A,和蛋白G 基质的出现,能将任何来源的抗体纯化.抗体的纯化也可采用传统的色谱...

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