高效液相色谱半制备时对进样的浓度有要求吗

作者&投稿:大狐董 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高效液相色谱进样的最高浓度是多少~

没有确切的浓度,因为最高浓度根据许多因素共同决定的,并非绝对。
液相色谱进样最高浓度与以下因素有关:
1,检测器检测能力。紫外,蒸发光,示差,荧光等检测器的检测能力各不相同。其中,紫外检测器的灵敏度,光源的能量,流通池的通透性和洁净程度等均会决定紫外检测器的检测能力。
2,物质的响应值。不同物质在同一检测器下被检测出来的信号大小各有不同,同样是1mg/ml的浓度,A物质与B物质的响应值可能会相差出2倍、10倍甚至100倍之多。
3,紫外检测波长。相同物质在不同紫外波长下的响应值是不同的,这与物质在该波长下的吸收值有关。
4,色谱柱承载能力。有时物质浓度过高超过色谱柱承载范围,会导致该物质形成“平头峰”或峰分叉、出现肩峰、对称性差等分离问题。
5,通过方法学验证。实际应用到正规检验方法中的最高浓度实际上是应该通过一系列的方法学验证来证明该浓度的合理性和可行性。方法学验证中,最高浓度主要需要通过线性试验,回收率试验,重复性试验,专属性试验,系统适用性试验。

分析型液相色谱仪和制备型液相色谱仪本质上并没有什么不同,主要是样品中组份的量不同,流动相流量不同,分析型液相色谱仪主要目的是分析样品组份,样品量少,使用流动相流量小,一般使用柱径4.6mm的分析型色谱柱,色谱柱填料更小,一般用5um粒径或者更小的填料,因此对样品组份的分离效果更好;分析型液相常用1ml/min,更高的流量会使压力更高,可能超出流路的耐压上限。
而制备型液相色谱仪的主要目的是获得样品中的纯化组份,虽然原理和分析型一样,但想要得到理想的纯化样品量,就需要分离更多的样品量,需要更大的流动相流量,所以常规的分析型液相色谱柱容量不够,需要使用更大的色谱柱,同时由于液相色谱仪的耐压有限,制备型色谱柱不能用粒径太小的填料,一般使用10um以上的填料,10mm以上的色谱柱柱径。当然如果大流量制备,甚至需要使用更大流量的高压恒流泵,更大的流路管路。
因此,如果相将分析型高效液相色谱仪(最大流量一般为10 ml/min)改为半制备,只需要改使用合适的制备型的液相色谱柱,使用更大的进样阀或者定量环。但所谓半制备液相,能分离的样品量非常有限;另外,你还需要根据样品的出峰时间,通过切换收集器来收集不同组份。

样品浓度最高点的要求主要看色谱柱的承受能力。过高的样品浓度会对柱子产生一定的负荷,一来柱子会有所损伤,二来分离效果也会受到影响。当然要考虑物质的溶解性,与流动相接触瞬间是否有可能析出等问题。
最低点主要还是看实验者对样品的要求。什么样的浓度都是在固定时间出峰,在该位置收集溶液即为你所要求的物质。但是在得到溶液后如何能够提取并纯化,在适当的收率的情况下是否能得到你所期望的物质量。

在制备角度来看,还是应该在不影响分离的情况下将样品浓度尽量提高,同时要考虑色谱柱的承受能力和分离效果及纯度等问题。


谁知道梁恒的介绍及作品
西安交通大学生命科学与技术学院 梁恒男, 1963年7月生. 1978-81年在西安市卫生学校读护士专业的初中专, 积累了基本医学和药学知识;81-83年在西安市长安区斗门医院手术室做护士工作; 83-90年在西北大学化学系仪器分析专业完成学士和硕士阶段的学习, 从事了人绒毛膜促性腺激素的高效液相色谱半制备分离...

求翻译 有高分追加~
benzene homologues could be identified in the first place.采用半程的高效液相色谱法去检验由塑料氢化得到的油,这是为了检验他们的成分。除了预期的脂肪、芳烃和hetero,混合物也在加氢状态下的聚乙烯和聚氯乙烯的废物材料被制造了出来(图4)。对被高效液相色谱法分离出来的个人分析部分,让我们可以去区...

实验室成立于哪一年?
实验中心总面积2026平方米,拥有包括气相色谱、高效液相色谱、半制备液相色谱、原子吸收分光光度计、原子荧光光度计、质构仪、真空冷冻干燥机、分子蒸馏设备、喷雾干燥、超高压杀菌、超临界二氧化碳萃取、气调贮藏实验设备等在内的现代化仪器设备,中心现有设备829余台套,总价值近1004万元。实验中心承担了5...

2.高效液相色谱采用5~10µm粒度的固定相有何优点缺点,如何克服_百度...
粒径越小,柱效越高,但压力也高,另外也容易堵塞。根据需要选用,无所谓克服。再有,现在10µm的已经很少用于分析,半制备用得多些。

液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类 ①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm,柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;⑥生产制备柱内径可达几十...

高效液相色谱,除了可以用来鉴定物质成分之外,是否还可以用来小量地分离...
1、可以的 2、液相色谱仪本身不鉴定物质成分,只是根据出峰时间来推断相关物质的成分,液相色谱仪只是一种定量工具;3、既然有分离功能,自然就可以分离物质,只是分析型液相流量小,分离物质的能力较小,一般在实验室可以通过多次小量的进行分离实验。普通液相流量可以到10ML左右,我们有些客户是通过适当...

手性HPLC在局麻药丙胺卡因的应用
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什么是制备液相?
其实制备液相,就是分析液相的简单放大,简单是这么说的,但是制备液相的目的是分离提纯纯物质,整套设备有泵,检测器和上位机,自动馏分收集器等一些配件

安捷伦LC1200液相色谱仪基本系统
安捷伦LC1200液相色谱系统提供了一套全面而高效的液相色谱解决方案,包括二元和四元液相系统,以及单元液相色谱和纯化系统。HPLC-Chip\/MS和纳流液相色谱系统确保了高分离度和快速分析,特别适合方法开发和研究。四元泵的灵活性显著,可以快速在不同溶剂方法间切换,支持二元、三元和四元梯度,是市场上最具...

西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室
代谢分析分为气相色谱室和液相色谱室,气相色谱室仪器配置包括:气相色谱仪和三重四级杆气质联用仪,用以低极性、挥发性代谢物的定性定量分析。液相色谱室仪器配置包括:超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱联用仪侧重于代谢物的定性分析、三重四级杆液质联用仪侧重于痕量代谢物的定量分析、半制备高效液相色...

宜丰县13451298819: 高效液相色谱半制备时对进样的浓度有要求吗 -
滕复人免: 样品浓度最高点的要求主要看色谱柱的承受能力.过高的样品浓度会对柱子产生一定的负荷,一来柱子会有所损伤,二来分离效果也会受到影响.当然要考虑物质的溶解性,与流动相接触瞬间是否有可能析出等问题. 最低点主要还是看实验者对样品的要求.什么样的浓度都是在固定时间出峰,在该位置收集溶液即为你所要求的物质.但是在得到溶液后如何能够提取并纯化,在适当的收率的情况下是否能得到你所期望的物质量.在制备角度来看,还是应该在不影响分离的情况下将样品浓度尽量提高,同时要考虑色谱柱的承受能力和分离效果及纯度等问题.

宜丰县13451298819: 高效液相色谱可不可以大规模分离样品? -
滕复人免: 可以,但要考虑样品的极性大小选择适当的色谱柱和其它色谱条件,通常分析型HPLC进样一次可得到1mg样品;半制备型的HPLC视进样量而定,一般一次可得到不少于100mg的样品.选定合适的色谱条件是关键.

宜丰县13451298819: 高效液相色谱的半制备是什么意思啊 -
滕复人免: 利用HPLC制备少量的样品(一般是供进一步分析用),以区别于制备色谱. 操作上当然要用到HPLC,分析型的加样品采集系统.

宜丰县13451298819: 高效液相色谱法对测试样品有什么要求 -
滕复人免: 如果高效液相色谱仪的检测器是紫外检测器的话,首先要保证样品具有紫外吸收,如果没有紫外吸收的话可选择荧光检测器、蒸发光检测器等等,总而言之需要你的样品主成分在检测器上有响应信号. 样品在进行检测前还要配制成一定浓度的溶液(配制溶液的时候需根据样品的溶解度情况选择合适的溶剂,为了减小溶剂峰,通常使用流动相作为溶剂,样品溶液的浓度一般配制成10ug/ml左右的就可以),如果样品溶解很好且没有其他杂质,可直接吸取样品溶液进样,如果样品中还有其他成分,比如测定口服药物制剂中某成分的含量,往往口服药物制剂中有其他辅料,样品溶液在进样前还要进行一下过滤(通常采用0.22um或0.45um的针头式过滤器).

宜丰县13451298819: 高效液相色谱法中采用什么定量时,样品溶液和标准溶液的进样量相同 -
滕复人免: 外标法与进样量有关,均需精密进样;内标法与进样量无关 ,但对照品与样品内必须精密加入相同量得内标溶液,这样内标浓度与样品浓度(对照品)比值是固定的,故内标法与进样量无关,多看看色谱方面书就知道了!

宜丰县13451298819: 用高效液相色谱线性关系范围用浓度表示还是用进样量表示 -
滕复人免: 肯定是用浓度表示.浓度与物质在色谱的响应信号在一定区间内是成正比的. 例如:检测器用紫外分光检测器的话.由朗伯—比尔定律得知,被测物质的紫外吸收在一定的浓度范围内与物质的浓度及液层的厚度有线性关系.被测物质的紫外吸收反应在色谱上,就是色谱图了.进样量与色谱响应信号没有直接关系,如果是同一样品,进样量与响应信号有线性关系,但是只进一个样品,除了用来做色谱仪验证外,没有什么意义

宜丰县13451298819: 请教高效液相色谱仪的样品的要求 -
滕复人免: 首先确定样品成分,获取该成分的纯品(对照品),将对照品溶液配制成与样品成分浓度相当的浓度(比如样品浓度是10mg/ml左右,对照品溶液就配制成10mg/ml).对照品溶液和供试品溶液分别进样,进行色谱分析,获得对照品成分峰面积与供试品溶液峰面积.此时已知对照溶液峰面积,对照溶液浓度,供试品溶液峰面积,求供试品溶液浓度,因为成分在液相中响应值不变,故对照品溶液浓度/对照品溶液峰面积=F(即响应因子)=供试品溶液浓度/供试品溶液峰面积,求得供试品溶液浓度. 如果想算含量,含量=[(浓度X稀释倍数)/供试品称样量]X100%

宜丰县13451298819: 什么是制备性高效液相色谱 -
滕复人免: 高效液相色谱一般是分析型的,某些型号可以兼顾半制备工作.普通的色谱柱是分析型柱子,柱容量小,满足不了制备要求.制备色谱以分离纯化为目的,柱容量大. 不知道你说的是不是半制备的高效液相.

宜丰县13451298819: 高效液相色谱法的计算公式 -
滕复人免: [编辑本段]测定方法定量测定时,可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法.但用归一法或内标法测定杂质总量时,须采用峰面积法. 面积归一化法测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因...

宜丰县13451298819: 高效液相色谱仪器怎么操作啊?简单吗? -
滕复人免: 一.开机程序1.打开氮气总阀,拧紧分压阀.2.打开稳压电源和色谱仪开关.3.启动计算机,运行软件,调用预先编辑好的控制方法,下载到色谱仪.4.待柱箱温度达到控制方法设定的初始值后,测量柱流量:在皂膜流量计里加入几滴检漏液...

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