考马斯亮蓝法测蛋白质含量是多少?
考马斯亮蓝法测蛋白质含量是0～1 000μg/mL。
考马斯亮蓝一定范围内与蛋白质浓度成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。
测定含量：
该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果，如TritonX-100、SDS、NP-40等。常用于细胞骨架的检验。
浓染液：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50mL 95%乙醇，加入100mL 85%的磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000mL，此染液放4℃至少6个月保持稳定。
样本准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗体，可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗体作为标准蛋白。通常在20μg—150μg/100μL之间绘制标准曲线。
溶解：将待测样本溶于100~1缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(最好用PBS)。
稀释：按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。
作用：每个样本加5mL稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min。
计算：根据标准曲线计算待测样本的浓度。
考马斯亮蓝法的优缺点
根据查询智慧城市网，嘉峪检测网得知，考马斯亮蓝法是一种常用的测定蛋白质浓度的方法，它的优点是：1、灵敏度高，可以检测到微量的蛋白质，最低检测量可达1微克。2、操作简单，只需加入一种试剂，反应时间短，颜色稳定。3、干扰物质少，许多对其他方法有干扰的物质，如糖、缓冲液、还原剂和络合剂等...
bradford法测定蛋白质含量的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
采用Bradford法，即考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。原理是考马斯亮蓝在电离状态下呈现棕红色，最大吸光量为488nm。当与蛋白质结合时，它变成蓝色，并且蛋白质与色素结合时在波长595nm处吸收光最大。其吸光值与蛋白质含量成正比，可用于蛋白质的定量测定。蛋白与考马斯亮蓝在2min左右达到平衡，反应非常...
考马斯亮蓝测定蛋白质含量时应注意什么?
在试剂加入后的5-20min内测定光吸收，因为在这段时间内颜色是最稳定的。测定中蛋白-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上，测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。利用考马斯亮蓝法分析蛋白必须要掌握好分光光度计的正确使用，重复测定吸光度时，比色杯一定要冲洗干净，制作蛋白标准曲线的时候，蛋白...
蛋白质含量测定考马斯亮蓝
蛋白质含量测定考马斯亮蓝实验如下：实验原理：考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马...
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方法有什么优点?
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方法的优点是：1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；2.其结合物在室温下1h内保持稳定。3.该法试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1,...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线
一、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 (一)、试剂：1、考马斯亮蓝试剂：考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W\/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W\/V)乙醇，8.5%(W\/V)H3PO4。2、标准蛋白质溶液：...
测定蛋白质含量的方法
测定蛋白质含量的方法有：碱性染料法、双缩脲法、紫外分光光度法、考马斯亮蓝法。1、碱性染料法 此法利用的是带苯环的氨基酸在碱性溶液中以偶氮染料显色，然后测定溶液中的吸光度，再与标准曲线对比，从而确定蛋白质的含量。2、双缩脲法 双缩脲法是一种用于测定蛋白质含量的经典方法。在碱性条件下，...
考马斯亮蓝法可以测蛋白质bp大小吗
考马斯亮蓝法可以测蛋白质bp大小。根据查询相关公开显示考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色，最大光吸收在465nm，当它与蛋白质结合后变为蓝色，最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内。
bradford法测定蛋白质含量的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构，缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
紫外分光光度法和考马斯亮蓝法得出的待测蛋白质含量呈现怎样的差异...
适用范围差异：紫外分光光度法适用于大多数蛋白质的测定，特别适用于测定含有共轭双键氨基酸残基丰富的蛋白质，如胶原蛋白、角蛋白等。而考马斯亮蓝法则更适用于快速测定微量蛋白质，尤其在样品中干扰物质较多时，如生物体液、组织等复杂样品。综上所述，紫外分光光度法和考马斯亮蓝法得出的待测蛋白质含量...
单榕积雪： 总量至少50ng,100ng以上比较好.
怀集县15858471376： 考马斯亮蓝测定蛋白质浓度 - ？
单榕积雪： 蛋白质本身的吸光度应该是在280nm 和考蓝反应后才会在595nm处有吸收,这个吸收值和浓度肯定是线性的关系感觉你这个蛋白浓度算的很奇怪,既然知道蛋白总量50微克,为什么还要加考蓝呢,直接除以溶液体积就可以了啊.考蓝一般是和已知浓度的标准蛋白(比如BSA)用来测未知浓度蛋白的. 需要通过标准蛋白做一条标准曲线,再把未知浓度蛋白的吸收值代入标准曲线算出浓度.
怀集县15858471376： 如何计算考马斯亮蓝样品蛋白质含量的浓度 - ？
单榕积雪： 考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是较常用的方法,误差可尽量减到最小,需注意:测定OD值前,将分光光度计提前预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐离子不会影响实验结果,但去污剂,如TRITON X-100,SDS等,会严重干扰实验结果.
怀集县15858471376： 考马斯亮兰R250液体,怎么配置测蛋白质浓度.考马斯量蓝R250是液体的怎么配? - ？
单榕积雪：[答案] R250不能用来测蛋白质浓度的,G250用来测蛋白质浓度 100mg考马斯亮蓝G-250溶于50 ml 95%乙醇,加入100 ml磷酸然后补加水至1 L,Whatman1号滤纸过滤.
怀集县15858471376： 考马斯亮蓝法测定蛋白质的公式是什么? - ？
单榕积雪：[答案] 公式是根据测量结果自己算出来的: 考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5],考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力,通过疏水作用与蛋白质相结合,形成的蓝色蛋白质一染料复合...
怀集县15858471376： 考马斯亮蓝G - 250法测定蛋白质含量 - ？
单榕积雪： 测OD值都是需要预先调零的,通常我们测蛋白含量的时候,会用考马斯亮蓝溶液不加蛋白,只加水或者buffer调零,这样的话蛋白质含量是O,OD595 是零. 如果你用其他的溶液调零,蛋白质含量是O,OD595 的读数与你调零时用的溶液相关,没有一个一定的值.
怀集县15858471376： 考马斯亮蓝测定蛋白的标准曲线绘制 - ？
单榕积雪： 1.分光光度计预热下会准些2.是否调0\100,3.用紫外的试试看 楼主可曾换一台分光光度计试试,有些仪器时间长了不准的
怀集县15858471376： 考马斯亮蓝测定固体物质蛋白质含量 - ？
单榕积雪： 实验十四 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 一、 目的学习和掌握考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量的原理和方法.二、原理考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250...
