提取RNA时氯化钠的最适浓度是多少

作者&投稿:镡郎 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
提取RNA时氯化钠的最适浓度是多少?~

用0.14mol/L的稀氯化钠溶液溶解,用1~2mol/L的浓氯化钠溶液提纯析出RNA



在1~2mol/L的浓氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很大,RNA核蛋白的溶解度很小;而在0.14mol/L的稀氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很小,RNA核蛋白的溶解度很大.因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将DNA核蛋白和RNA核蛋白从样品中分别抽提出来.

所以你只要将提取DNA中过程里的两次氯化钠溶液对调就行了

你说的实验应该是RT-qPCR,这个实验的主要目的就是检测RNA的含量的,所以一开始其实是很难给出一个具体的值的。
通常建议根据所用的逆转录酶每个反应的RNA的量的大致需求,先完成逆转录反应,例如,下面就列出了某一种逆转录酶要求的模板范围。逆转录酶越好,这个范围就会越宽,主要是可以用的RNA量就可以更少。
total RNA——1 pg - 5 μg
poly(A) RNA —— 0.1 pg - 500 ng
specific RNA —— 0.01 pg - 500 ng
等到将RNA都逆转录为cDNA后,再进行qPCR的实验。这时候可以将cDNA稀释几个梯度,以获得理想的Cq值。

用0.14mol/L的稀氯化钠溶液溶解,用1~2mol/L的浓氯化钠溶液提纯析出RNA。

在1~2mol/L的浓氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很大,RNA核蛋白的溶解度很小;而在0.14mol/L的稀氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很小,RNA核蛋白的溶解度很大。

因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将DNA核蛋白和RNA核蛋白从样品中分别抽提出来。所以只要将提取DNA中过程里的两次氯化钠溶液对调就行了。

医用

氯化钠对于地球上的生命非常重要。大部分生物组织中含有多种盐类。血液中的钠离子浓度直接关系到体液的安全水平的调节。由信号转换导致的神经冲动的传导也是由钠离子调节的。

含氯化钠0.9%的水称为生理盐水,因为它与血浆有相同的渗透压。生理盐水是主要的体液替代物,广泛用于治疗及预防脱水,也用于静脉注射治疗及预防血量减少性休克。

以上内容参考:百度百科-氯化钠



rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系。  纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有2.0以上,260/230值1.2以上基本合格。  RT-PCR:最重要的是RNA是否有明显降解,这个需要跑电泳看。一般来说28S应该比18S亮1.5-2.0倍,说明提取得不错。  反转录·聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)是将RNA的反转录(reversetranscription)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。  提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板经行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。


验证DNA和RNA的发布实验时的各个步骤应该注意什么?为什么要那样做...
取材:滴一滴质量分数为百分之零点零九的氯化钠溶液在干净的载玻片上。 取材前要漱口 因为杂质会影响实验数据 水解时要注意把烘干的整个细胞放入装有30ml的质量分数为百分之八的盐酸小烧杯中 然后将小烧杯放入装有30摄氏度温水的大烧杯中 为的是加快细胞水解 冲洗载玻片用的是蒸馏水的缓水流冲洗10...

胁迫的拟南芥还能提取rna吗
胁迫的拟南芥还能提取rna。方法如下:首先配制提取液Ⅰ、提取液Ⅱ及7.5M醋酸铵,按照如下方法配制。提取液Ⅰ(100mL):2%SDS,68mM柠檬酸钠,132mM柠檬酸,1mMEDTA。提取液Ⅱ(50mL):4M氯化钠,16mM柠檬酸钠,32mM柠檬酸。1、取30~50mg的材料,在液氮中研磨成粉,迅速转移到离心管中。2、加入300...

RNA与DNA的鉴定需要水浴加热吗
SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离.EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA.物质的量浓度为0.15 mol\/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA.Tris\/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态.(Tris为三羟甲基氨基甲烷)RNA的鉴定 取RNA沉淀约O.2 g...

鸡血中提取核糖体的过程
RNA的提取,通常是用0.14mol\/L氯化钠溶液将组织做匀浆并反复提取细胞质中的核糖核蛋白,而留下含有DNA的细胞核物质,然后用10%醋酸调至pH4.2沉淀,离心弃去上清液,先用0.5mol\/L氯化钠溶液,后用水洗涤沉淀,将核糖核蛋白后溶解于0.5mol\/L碳酸氢钠溶液中,离心,取上清液,调pH至4.2,沉淀以0...

高中生物中实验试剂一共有哪些,其对应的实验是什么,实验中有哪些要注意...
18.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。19、0.3g\/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。20、0.1g\/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血 21、氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol\/L、0.015...

...实验滴加质量分数为0.9%的NaCl溶液的作用是什么。
观察DNA和RNA在细胞中的分布要用口腔上皮细胞做实验,先滴0.9%后Nacl溶液是为了保持细胞的形态,不让其破裂以改DNA与RNA错位。

dna的提取方法
dna的提取方法:浓盐法、SDS法、CTAB法等。一、 浓盐法。1、根据DNA和RNA在电解溶液中的溶解度不同,可将二者分离。2、常用1 mol\/L NaCl抽提,得到的DNP黏液中加入含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使之乳化,再离心,使蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA则位于上层水相中。3、回收水相,用2倍...

生物实验问题
实验中用的是0.9%的氯化钠溶液(生理盐水),作用是保持口腔上皮的正常形态。生理盐水只有一种作用:维持渗透压、保持细胞形态。

提软骨RNA用的高盐溶液能够用DEPC直接处理?
你好,DEPC具有致癌的怀疑,建议小心使用。DEPC实质上是一种不易溶于水的酯类物质,加入到水溶液中需要不断旋转震动混匀。建议先配成1‰的水溶液,摇床过夜后高压灭菌,再用配好的DEPC水去配制高盐溶液(0.8M柠檬酸钠+1.2M 氯化钠),并不是在配好的高盐溶液中加DEPC处理。

高中生物总结
(8)实验中搅拌溶液时,为何总要沿一个方向搅拌? 防止DNA分子受到损伤。 (9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么? 第一次是加蒸馏水,降低氯化钠的浓度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因为DNA不溶于酒精溶液。 (10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?

阜南县17690014292: 提取RNA时氯化钠的最适浓度是多少 -
季临排石: rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千.如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系. 纯度需要用仪器测一下.260/280理论值应该有2.0以上,260/...

阜南县17690014292: 粗提纯DNA中Nacl浓度越高越好吗?提纯的重点是哪些? -
季临排石: 不是, DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氧化钠的浓度的变化而改变的.当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出.提纯的重点是实验的步骤,记住每一步该添加的试剂,清楚其作用.要特别注意的是加蒸馏水的顺序,和加如不同浓度的NaCl

阜南县17690014292: DNA 析出最多时,NACL的浓度是多少 -
季临排石:[答案] 书上说0.14MOL/ L

阜南县17690014292: 溶解RNA时为什么用0.9%NACL水溶液 -
季临排石: DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂. 但是它们的钠盐比游离酸易溶于水,RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L.

阜南县17690014292: DNA能溶于水,那提取时为何要用2mol/L的NaCl溶液溶解. -
季临排石: 2mol/L溶解度最大 便于过滤去除杂质 再稀释至0.14mol/L 提纯 你直接加0.14mol/L是能析出 但杂质会很多!建议你把教科书好好看下 每一步做什么 每一步的目的是什么...

阜南县17690014292: DNA粗提取 实验 有关氯化钠和酒精作用 -
季临排石: 在浓氯化钠(1—2mol·L-1)溶液中,DNP的溶解度很大,RNP的溶解度很小.在稀氯化钠(0.14mol·L-1)溶液中,DNP的溶解度很小,RNP的溶解度很大.DNP在0.95酒精中难溶.依此推测, 可以丢弃的是p(滤液) Q(粘稠物) r (滤液)

阜南县17690014292: ffpe提取dna一般浓度和纯度是多少?
季临排石: rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千.如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也...

阜南县17690014292: trizol提取烟草组织100mg叶片总RNA,最终浓度大概多少?30ul溶解RNA.每次提的OD260/OD280较低, -
季临排石:[答案] 我做过Trizol法提取RNA实验,在这方面之前也有困惑,不过查了很多资料后才知道:Trizol提取的RNA用DEPC处理的水溶解的话,A280/A260比值为1.4、1.5左右比较正常,若用TE溶解的话,其比值≥1.8.不知道你的OD260/OD280较低,是不是因...

阜南县17690014292: 氯化钠0度时每克浓度是多少? -
季临排石: 在零度时,氯化钠的溶解度每100克水溶解35.7克,体积约为100毫升.所以浓度=(35.7/58.5)/(100/1000)=6.10mol/L氯化钠(NaCl),外观是白色晶体状,其来源主要是在海水中,是食盐的主要成分.易溶于水、甘油,微溶于乙醇、液氨;不溶于浓盐酸.在空气中有潮解性.稳定性比较好,其水溶液显中性,工业上用于制造氯气、氢气和烧碱及其他化工产品,矿石冶炼,医疗上用来配置生理盐水,生活上可用于调味品

阜南县17690014292: 试剂盒提取RNA 的浓度是多少?! -
季临排石:[答案] 这个得具体分析 要看你提取的是什么材料,用的是什么试剂盒等等等 细胞的破解效率,蛋白质的变性效率都会影响RNA提取的得率.比如天根的试剂盒的得率就在20-80ug之间 蛋白质、DNA和糖类等均会影响RNA的纯度,而导致影响测定的RNA的浓度

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