“基因过表达”的原理步骤和应用是什么?
基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。
基因过表达的步骤是:
1,构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter,不同系统中采用的promoter完全不同。
2,将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌,酵母和哺乳动物细胞中,构建的外源质粒直接导入细胞即可,这个过程称为转化或转染。对于昆虫表达系统,构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基因组才能用于转染。
基因过表达的应用:大肠杆菌表达系统,酵母表达系统,昆虫表达系统,哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统(无细胞体系)。
现在人们常说的生物技术实际上就是现代生物技术。现代生物技术包括基因工程、蛋白质工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等五大工程技术。其中基因工 程技术是现代生物技术的核心技术。基因工程的核心技术是DNA的重组技术,也就是基因克隆技术。既然基因工程这么重要,那么什么是基因工程呢?
基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞内,而能持续稳定地 繁殖。根据这个概念,人们可以从一个生物的基因中提取有用的基因片断,植入到另外一个生物体内,从而使该生物获得某些新的遗传性状。从而获得所需要的新的 生物的变种.运用基因工程可以加快生物的变异,并使生物的变异朝着有益于人类的方向发展.而且,基因工程是处在分子水平上的操作,因而可以跨越不同的物种 进行操作.大大改善了传统的只能同类生物杂交并且不能控制变异方向的方法.
例如,传统的水稻培养方法是让很多不同的水稻杂交,然后将种子都培养成水稻,再 从中选择优良的品种.但是这种方法不仅工作量大,而且效果也不是很好.根据DNA重组原理,有些隐性性状大约只有1/4的概率能表达出来.这样就做了大量 的无用功.但是利用基因工程,我们只需要从不同的水稻中提取所需要表达出来的性状的核苷酸组合,将其移植到另外的水稻上,就可以表达出来.这样做,大大节 省了工程的周期,也提高了基因性状表现的精确度.另外,不同种的生物一般是不能交配的.例如鱼和牛,就不能进行交配而生出下一代.但是利用基因工程,我们 可以把鱼的某些基因移植到牛的受精卵上,或者把牛的基因移植到鱼的受精卵上,加以培养,就可以产生既有牛的性状又有鱼的性状的新的物种.虽然基因工程有这 么多的好处,但是也不是说可以滥用的.因为每种生物经过适者生存的自然选择,都能适应所处的生存环境.如果移植了外来的基因,可能会打破其体内的细胞的平 衡,从而导致细胞的快速衰老甚至死亡.可见,基因工程要正确处理好细胞的相容性。
那么,基因工程都有那些应用呢?
一:在生产领域,人们可以利用基因技术,生产转基因食品.例如,科学家可以把某种肉猪体内控制肉的生长的基因植入鸡体内,从而让鸡也获得快速增肥 的能力.但是,转基因因为有高科技含量, 怕吃了转基因食品中的外源基因后会改变人的遗传性状,比如吃了转基因猪肉会变得好动,喝了转基因牛奶后易患恋乳症等等。华中农业大学的张启发院士认为:“ 转基因技术为作物改良提供了新手段,同时也带来了潜在的风险。基因技术本身能够进行精确的分析和评估,从而有效地规避风险。对转基因技术的风险评估应以传 统技术为参照。科学规范的管理可为转基因技术的利用提供安全保障。生命科学基础知识的科普和公众教育十分重 要。
二:军事上的应用.生物武器已经使用了很长的时间.细菌,毒气都令人为之色变.但是,现在传说中的基因武器却更加令人胆寒.基因武器只对具有某种 基因的人(例如某一种族)有杀伤力,而对其他种族的人毫无影响.这种武器的使用无疑会使遭受基因武器袭击的种族面临灭顶之灾。
三: 环境保护上,也可以应用基因武器.我们可以针对一些破坏生态平衡的动植物,研制出专门的基因药物,既能高效的杀死它们,又不会对其他生物造成影响.还能节 省成本.例如一直危害我国淡水区域的水葫芦,如果有一种基因产品能够高校杀灭的话,那每年就可以节省几十亿了。科学是一把双刃剑.基因工程也不例外.我们要发挥基因工程中能造福人类的部分,抑止它的害处.。
四,医疗方面,随着人类对基因研究的不断深入,发现许多疾病是由于基因结构与功能发生改变所引起的。科学家将不仅能发现有缺陷的基因,而且还能掌握如何进行对基 因诊断、修复、治疗和预防,这是生物技术发展的前沿。这项成果将给人类的健康和生活带来不可估量的利益。所谓基因治疗是指用基因工程的技术方法,将正常的基因转如病患者的细胞中,以取代病变基因,从而表达所缺乏的产物,或者通过关闭或降低异常表达的基因等途 径,达到治疗某些遗传病的目的。目前,已发现的遗传病有6500多种,其中由单基因缺陷引起的就有约3000多种。因此,遗传病是基因治疗的主要对象 。第一例基因治疗是美国在1990年进行的。当时,两个4岁和9岁的小女孩由于体内腺苷脱氨酶缺乏而患了严重的联合免疫缺陷症。科学家对她们进行了基因治疗 并取得了成功。这一开创性的工作标志着基因治疗已经从实验研究过渡到临床实验。1991年,我国首例B型血友病的基因治疗临床实验也获得了成功。
基因治疗的最新进展是即将用基因枪技术于基因治疗。其方法是将特定的DNA用改进的基因枪技术导入小鼠的肌肉、肝脏、脾、肠道和皮肤获得成功的表 达。这一成功预示着人们未来可能利用基因枪传送药物到人体内的特定部位,以取代传统的接种疫苗,并用基因枪技术来治疗遗传病。
目前,科学家们正在研究的是胎儿基因疗法。如果现在的实验疗效得到进一步确证的话,就有可能将胎儿基因疗法扩大到其它遗传病,以防止出生患遗传病症的新生儿,从而从根本上提高后代的健康水平。
五,基因工程药物研究,基因工程药物,是重组DNA的表达产物。广义的说,凡是在药物生产过程中涉及用基因工程的,都可以成为基因工程药物。在这方面的研究具有十分诱人的前景。
基因工程药物研究的开发重点是从蛋白质类药物,如胰岛素、人生长激素、促红细胞生成素等的分子蛋白质,转移到寻找较小分子蛋白质药物。这是因为蛋 白质的分子一般都比较大,不容易穿过细胞膜,因而影响其药理作用的发挥,而小分子药物在这方面就具有明显的优越性。另一方面对疾病的治疗思路也开阔了,从 单纯的用药发展到用基因工程技术或基因本身作为治疗手段。
现在,还有一个需要引起大家注意的问题,就是许多过去被征服的传染病,由于细菌产生了耐药性,又卷土重来。其中最值得引起注意的是结核病。据世界 卫生组织报道,现已出现全球肺结核病危机。本来即将被消灭的结核病又死灰复燃,而且出现了多种耐药结核病。据统计,全世界现有17.22亿人感染了结核病 菌,每年有900万新结核病人,约300万人死于结核病,相当于每10秒钟就有一人死于结核病。科学家还指出,在今后的一段时间里, 会有数以百计的感染细菌性疾病的人将无药可治,同时病毒性疾病日益曾多,防不胜防。不过与此同时,科学家们也探索了对付的办法,他们在人体、昆虫和植物种 子中找到一些小分子的抗微生物多肽,它们的分子量小于4000,仅有30多个氨基酸,具有强烈的广普杀伤病原微生物的活力,对细菌、病菌、真菌等病原微生 物能产生较强的杀伤作用,有可能成为新一代的“超级抗生素”。除了用它来开发新的抗生素外,这类小分子多肽还可以在农业上用于培育抗病作物的新品种。
六,加快农作物新品种的培育,科学家们在利用基因工程技术改良农作物方面已取得重大进展,一场新的绿色革命近在眼前。这场新的绿色革命的一个显著特点就是生物技术、农业、食品和医药行业将融合到一起。
本世纪五、六十年代,由于杂交品种推广、化肥使用量增加以及灌溉面积的扩大,农作物产量成倍提高,这就是大家所说的“绿色革命”。但一些研究人员认为,这些方法目前已很难再使农作物产量有进一步的大幅度提高。
基因技术的突破使科学家们得以用传统育种专家难以想象的方式改良农作物。例如,基因技术可以使农作物自己释放出杀虫剂,可以使农作物种植在旱地或 盐碱地上,或者生产出营养更丰富的食品。科学家们还在开发可以生产出能够防病的疫苗和食品的农作物。 基因技术也使开发农作物新品种的时间大为缩短。利用传统的育种方法,需要七、八年时间才能培育出一个新的植物品种,基因工程技术使研究人员可以将任何一种 基因注入到一种植物中,从而培育出一种全新的农作物品种,时间则缩短一半。
虽然第一批基因工程农作物品种5年前才开始上市,但今年美国种植的玉米、大豆和棉花中的一半将使用利用基因工程培育的种子。据估计,今后5年内, 美国基因工程农产品和食品的市场规模将从今年的40亿美元扩大到200亿美元,20年后达到750亿美元。有的专家预计,“到下世纪初,很可能美国的每一 种食品中都含有一点基因工程的成分。
尽管还有不少人、特别是欧洲国家消费者对转基因农产品心存疑虑,但是专家们指出,利用基因工程改良农作物已势在必行。这首先是由于全球人口的压力 不断增加。专家们估计,今后40年内,全球的人口将比目前增加一半,为此,粮食产量需增加75%。另外,人口的老龄化对医疗系统的压力不断增加,开发可以 增强人体健康的食品十分必要。
加快农作物新品种的培育也是第三世界发展中国家发展生物技术的一个共同目标,我国的农业生物技术的研究与应用已经广泛开展,并已取得显著效益。
七,分子进化工程的研究,分子进化工程是继蛋白质工程之后的第三代基因工程。它通过在试管里对以核酸为主的多分子体系施以选择的压力,模拟自然中生物进化历程,以达到创造新基因、新蛋白质的目的。
这需要三个步骤,即扩增、突变、和选择。扩增是使所提取的遗传信息DNA片段分子获得大量的拷贝;突变是在基因水平上施加压力,使DNA片段上的 碱基发生变异,这种变异为选择和进化提供原料;选择是在表型水平上通过适者生存,不适者淘汰的方式固定变异。这三个过程紧密相连缺一不 可。
现在,科学家已应用此方法,通过试管里的定向进化,获得了能抑制凝血酶活性的DNA分子,这类DNA具有抗凝血作用,它有可能代替溶解血栓的蛋白质药物,来治疗心肌梗塞、脑血栓等疾病。
参考资料
天涯社区.天涯社区[引用时间2017-12-30]
过表达,即表达过度,当基因表达(转录)的严格控制被打乱时,基因可能不恰当被“关闭”,或以高速度进行转录。高速转录导致大量mRNA产生,大量蛋白质(protein)产物出现。
在RNA聚合酶的催化下,以DNA为模板合成mRNA的过程称为转录。在双链DNA中,作为转录模板的链称为模板链或反义链;而不作为转录模板的链称为编码链或有义链,编码链与模板链互补,它与转录产物的差异仅在于DNA中的胸腺嘧啶(T)变为RNA中的尿嘧啶(U)。
扩展资料
基因表达包括以下依次发生的事件:
(1)DNA分子作为一个模板合成相关的单链分子,称为核糖核酸(RNA)。和DNA一样,RNA包括位于糖-磷酸骨架上的碱基。新合成的RNA分子中的碱基序列由DNA模板上的碱基序列决定,由此,编码的信息从DNA分子转到RNA分子中,这个过程称为转录。
(2)RNA分子加工,并且被转运到称为核糖体的蛋白质复合体,蛋白质复合体是蛋白质合成开始的地方。
(3)蛋白质合成,氨基酸序列由RNA分子指定,这个过程称为翻译。在这个过程的最后,DNA分子中编码的信息已通过RNA分子转移到蛋白质生产机器,并且被用来生产蛋白质。
参考资料来源:百度百科-表达过度
参考资料来源:百度百科-基因表达
基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。
基因过表达的步骤是:
1,构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter,不同系统中采用的promoter完全不同
2,将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌,酵母和哺乳动物细胞中,构建的外源质粒直接导入细胞即可,这个过程称为转化或转染。对于昆虫表达系统,构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基因组才能用于转染。
基因过表达的应用:大肠杆菌表达系统,酵母表达系统,昆虫表达系统,哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统(无细胞体系)。
扩展资料:
基因过表达在医疗方面得应用:
科学家将不仅能发现有缺陷的基因,而且还能掌握如何进行对基 因诊断、修复、治疗和预防,这是生物技术发展的前沿。这项成果将给人类的健康和生活带来不可估量的利益。
所谓基因治疗是指用基因工程的技术方法,将正常的基因转如病患者的细胞中,以取代病变基因,从而表达所缺乏的产物,或者通过关闭或降低异常表达的基因等途 径,达到治疗某些遗传病的目的。
基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。
基因过表达的步骤是:
1,构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter,不同系统中采用的promoter完全不同。
2,将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌,酵母和哺乳动物细胞中,构建的外源质粒直接导入细胞即可,这个过程称为转化或转染。对于昆虫表达系统,构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基因组才能用于转染。
基因过表达的应用:大肠杆菌表达系统,酵母表达系统,昆虫表达系统,哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统(无细胞体系)。
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基因表达(gene expression)是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码基因如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)基因的表达产物是功能性RNA。
基因过表达(gene overexpression)是将目的基因编码区序列(CDS)克隆到相应的质粒或病毒载体上,利用载体骨架上构建的调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现目的基因的过表达。此外,还可选择报告基因进行示踪或抗性基因进行筛选。
常用的病毒载体有腺相关病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体和逆转录病毒载体等,广泛应用于体外和体内基因功能研究。
常用4种病毒载体比较
根据实验需求、目的基因和用途不同,选择不同的载体。
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基因过表达是指通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使该基因在
人为控制下可以大量转录和翻译,从而导致基因表达产物超过正常水平。
基因过表达技术在科研和医学领域有着广阔的发展前景,对基因诊断、基因修复、
基因治疗和疾病预防等有积极作用,可通过基因过表达实现治疗某些遗传病的目
的。
基因的过表达的详细原理
1. 基因的选择性表达是一个复杂的过程,涉及细胞核内DNA的转录,产生mRNA分子。2. 转录完成后,mRNA分子穿过核孔,从细胞核迁移到细胞质。3. 在细胞质中,mRNA与核糖体结合,翻译过程开始。核糖体沿着mRNA移动,读取编码信息。4. tRNA分子携带相应的氨基酸,根据mRNA上的编码信息,将氨基酸组装成多肽链。
ldquo基因rdquo过表达的原理步骤和应用有哪些
1、基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。2、基因过表达的步骤是:1,构建克隆。3、将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。4、在载体上一般含有增强基因转录的promoter...
什么是基因的“过表达”?
基因的过表达具体指的是某些基因在特定条件下被激活的程度过高。这意味着这些基因产生的蛋白质或其他功能性分子数量过多。这种情况可能是由于基因突变、外部刺激或环境因素等多种原因引起的。当某些致癌基因过表达时,可能导致细胞异常增殖,从而增加癌症发生的风险。过表达可以是短暂的或长期的,可以是局部的...
植物基因过表达的原理和载体构建
植物基因过表达是通过将目标基因整合到特定载体中,利用强启动子和抗性筛选标记,实现基因在宿主植物内的高效转录和蛋白表达。这种技术适用于研究基因功能,尤其在基因功能冗余或敲除后可能致死的情况。载体的选择和构建至关重要,主要包括:1. 过表达载体通常包含目的基因的编码区(CDS),连接到质粒或病毒载...
基因过表达是什么意思?
基因过表达是指在细胞内某些基因的表达水平超过正常范围,从而导致细胞功能的紊乱。这种现象在一些疾病的发生过程中起到了重要作用,如癌症、糖尿病、肝脏病等,因为这些疾病通常与基因异常的表达有关。基因过表达的特征表现为基因的过度转录和过度翻译。过度转录指某一基因的DNA在细胞中被复制的次数过多,...
什么是基因的过量表达
基因的过量表达即基因过表达,指通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。基因过表达可用于研究基因功能、药物靶点筛选、细胞信号传导通路分析、疾病临床诊断、基因治疗等方面。
什么是基因表达的过表达?
过表达,即表达过度,当基因表达(转录)的严格控制被打乱时,基因可能不恰当被“关闭”,或以高速度进行转录。高速转录导致大量mRNA产生,大量蛋白质(protein)产物出现。在RNA聚合酶的催化下,以DNA为模板合成mRNA的过程称为转录。在双链DNA中,作为转录模板的链称为模板链或反义链;而不作为转录模板...
“基因过表达”的原理步骤和应用是什么
基因表达(gene expression)是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码基因如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)基因的表达产物是功能性RNA。基因过表达(gene overexpression)是将目的基因编码区序列(CDS)克隆到相应的质粒或病毒载体上,利用载体骨架...
基因的过表达的详细原理
基因表达的原理:基因的选择性表达 通过在细胞核中对DNA进行转录得到mRNA 然后mRNA通过细胞核的核孔离开细胞核进入细胞质 接着核糖体附着在mRNA开始翻译 tRNA携带着氨基酸按照遗传信息将氨基酸连接成肽链 在经过内质网和高尔基体的处理最终形成成品的蛋白质 RNA的作用相当与信息传递者 因为蛋白质的合成不能直接...
什么是基因过表达?基因过表达会出现什么情形?
简明扼要的说就是,本来基因表达是受到各种内外信号的精确调控的,一旦这种调控机制的任何一个环节出现问题就会失控。基因的表达过程就可能进入失控状态,就有可能表现为表达过度,即该基因被过度的转录、翻译,最终基因表达产物超过正常水平。
东野会彼优:[答案] 顾名思义,基因过表达是将某个基因大量表达的过程.这个过程可以是在基因原本所在的细胞中,也可以是在其它表达系统中进行.其基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实...
上林县14776822459: 基因的过量表达是怎么回事?概念,过程,结果. - ?
东野会彼优: 概念:用强启动子驱动目的基因的表达; 过程:1>够建表达载体,将目的基因接入强启动子下;2>将此载体转化入宿主;3>挑选出目的产物过量积累的转化子;4>分析基因功能 结果:将莫基因表达提高看看它在哪个方面有异常,进而推测该基因在生物体内所起到的功能
上林县14776822459: 什么是基因的“过表达”? - ?
东野会彼优: “过表达”:本来基因表达是受到各种内外信号的精确调控的,一旦这种调控机制的任何一个环节出现问题就会失控.基因的表达过程就可能进入失控状态,就有可能表现为表达过度,即该基因被过度的转录、翻译,最终基因表达产物超过正常水平.
上林县14776822459: 谁知道基因表达的原理和转录是RNA的作用分别是什么? - ?
东野会彼优: 基因表达的原理:基因的选择性表达 通过在细胞核中对DNA进行转录得到mRNA 然后mRNA通过细胞核的核孔离开细胞核进入细胞质 接着核糖体附着在mRNA开始翻译 tRNA携带着氨基酸按照遗传信息将氨基酸连接成肽链 在经过内质网和高尔基体的处理最终形成成品的蛋白质 RNA的作用相当与信息传递者 因为蛋白质的合成不能直接以DNA为模板 但是可以以mRNA作为模板翻译出肽链最终形成蛋白质
上林县14776822459: 基因过表达的实现是利用什么途径实现的?最好有个例子,谢谢?
东野会彼优: 用过表达的启动子来转录表达基因就可以,比如常用的35S promoter. 另外也可以用增强表达来实现,比如有XVE系统.或者生物体自身高表达的一些promoter,比如植物里的Rub等 ..
上林县14776822459: 怎么样可以把两个基因一起在植物中过表达 - ?
东野会彼优: 怎么样可以把两个基因一起在植物中过表达 线粒体蛋白质分为两部分,这是由线粒体的半自主性所引起的. 大约有很少的一部分是由线粒体自身的DNA进行编码,并翻译,因为它含有RNA、DNA聚合酶、RNA聚合酶、tRNA、核糖体、氨基酸活化酶等进行DNA复制、转录和蛋白质翻译的全套装备,说明线粒体具有独立的遗传体系.其过程大体与核基因相同. 大部分线粒体蛋白是由核基因所控制合成的,翻译在细胞质或内质网上的核糖体中进行.
上林县14776822459: 有什么专业的网站可以查询生物方面的专业知识,就像课本上那样解释.如基因过表达的步骤和应用 - ?
东野会彼优: 如果你们单位买的有一些专业数据库就可以,比如维普、万方和中国知网.有些不懂的问题你还可以在小木虫、丁香园或者生物秀上面提问.
上林县14776822459: 如何构建一个基因的过表达载体 - ?
东野会彼优: 当拿到一个基因的DNA片段后,就需要把它导入一个载体,一方面长期保存.另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中.基因表达载体的构建是基因工程的核心. 常用的载体有细菌质粒,噬菌体和动植物病毒.其中质粒载体最常用...
上林县14776822459: 一个已知的基因为什么要做RNAi以及过表达,有什么意义? - ?
东野会彼优: RNAi是把这个基因沉默掉,其主要目的还是验证这个基因的功能 过表达,如果是在野生型中表达这个基因,其目的还是验证基因功能的,可以和RNAi同步做 但是如果是在其他突变体中过量表达该基因,则是研究这两个基因的依赖关系~~
上林县14776822459: 基因的表达是通过什么实现的,分为什么和什么两个阶段 - ?
东野会彼优: 基因调控,分为转录和翻译