常规he染色流程

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整个染色过程包括五个内容：脱蜡、染色、脱水、透明和封固。

(一)脱蜡:

1.从温箱中取出烤干的切片，立即投入二甲苯中脱蜡5～10min(可在二瓶中进行)，脱蜡时间长短取决于蜡是不彻底溶解。气温低可延长时间，气温高可适当缩短时间或在温箱中加速脱蜡。

2.移入无水酒精(100%)(二瓶)中，2min。

3.移入90%酒精中(二瓶)，约2min。

4.移入80%酒精中(二瓶)，约2min。

5.移入70%酒精中，约2min

6.移入水中，洗去酒精，约2～3min

7.移入蒸馏水中，约2min。

(二)染色:

1.移入苏木素中，浸染8～15min，一般以稍深染为宜。

2.移入水中，洗去苏木素和浮色，约1～2min。

3.移入分化液(1%盐酸酒精)中，分化几秒至30秒钟，使切片褪色至淡兰红色即可。分化的作用，可使细胞浆兰色脱去，而细胞核更加清晰，鲜丽，分化不足时，胞浆带兰，胞核过染，分化过度时，胞核太淡，难以辩认，可再退回苏木素染液，延长一定时间。

4.移入流水中，洗涤30～60min，使组织呈鲜兰色或天兰色(兰化)。

5.移入伊红液中，浸染2～5min，如着染缓慢 , 可在伊红液中加入冰醋酸 (100ml伊红液加1～2滴冰醋酸)以助染。

6.移入水中，洗去伊红浮液，并用纱布擦净玻片上的多余染料。

(三)脱水:

1.吸去玻片上的水分后多入80%酒精中，(二瓶)脱水，约1～2min，如在酒精中褪色很快时，可迅速移入90%酒精或返回伊红液中复染。

2.移入90%酒精中(二瓶)脱水，约2～4min。

3.移入无水酒精(100%酒精)(二瓶)彻底脱水，约4～8min。

(四)透明

1.移入二甲苯Ⅰ中透明3～5min。

2.移入二甲苯Ⅱ中透明5～10min。

(五)封固:

用树胶封固，先从二甲苯Ⅱ中取出切片，将组织外围的二甲苯迅速擦去，在滴上一滴树胶于组织片上，然后取干净的盖玻片，仔细加在封固剂上，慢慢压平， 使盖片位置适中。切片封固后，放在温箱中烤干,或平置凉干后装盒。

注意事项

<1>.用含升汞的固定液固定的组织块,在切片染色前，应进行脱汞，具体方法：切片脱蜡，逐次进入70%酒精后，入稀碘液(碘1克,碘化钾2克，蒸馏水3000ml)内5～10min。蒸馏水稍洗,入5%硫代硫酸钠溶液内5min。蒸馏水充分洗后进入染色。

<2>.组织块在4～5倍稀释的福尔马林液中固定过久，经常产生一种褐色素，叫福尔马林色素。这种色素不溶于水和酒精，但影响组织观察。以在脾、肝、肺发生充血、出血和渗血的组织中最常见。因此，切片在染色前经脱福尔马林色素的步骤。其方法：切片脱蜡，浸水后，投入伟勒卡依氏溶液(1%氢氧化钾液1ml，75％酒精200ml)20分～2h，充分水洗后染色。

<3>.如组织片含有大量黑色素时，影响染色和检查，可在脱蜡后，浸水后用0.25%高锰酸钾胶2～4h ，然后，常水充分洗涤，或经1%草酸液脱去切片上的黄褐色后，再充分水洗，后进入染色。

<4>.在切片染色后,进行脱水时，当通过90%酒精后，应对切片进行仔细擦试，此时，把切片中组织片周围的污染涂色或水分用纱布(清洁)擦干净。当切片从 100%酒精出来时，也要认真仔细擦去污物及组织片附近的水分。这样即可使组织脱水彻底,还可使酒精浓度不至明显降低尽量保持酒精原浓度。

<5>.封固时，可使灵活操作，一种方法是先在盖玻片上滴半滴树胶，再将载玻片从二甲苯Ⅱ中取出。擦去切片外围的二甲苯，翻转载玻片，使有组织的一面朝下，正好与盖玻片对准组织片，当盖玻片被粘附在载玻片下面时，翻转载玻片， 压平盖玻片，并置于位置适中。

另一种方法，将载玻片从二个苯Ⅱ中取出擦去外围的二甲苯后，立即在组织片上滴上半滴树胶。用小镊子挟取一盖玻片，翻转盖片并轻轻从酒精灯火焰上通过二次，再翻转过来，从载玻片上组织片一端轻轻放下，当盖片接触树胶时，可将盖片放下，树胶可自然扩散整个盖片， 此时注意调整适当位置。如有气泡可轻轻压盖片从一侧挤出。

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孝南区13499358140： he染色时,分化用哪种试剂?如何操作? - ？
富送白癜： 常规he染色步骤 (1)二甲苯(Ⅰ) 15min (2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min (3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min (4)100%乙醇(Ⅰ) 5min (5)100%乙醇(Ⅱ) 5 min (6)80%乙醇 5min (7)蒸馏水 5 min (8)苏木精液染色 5 min (9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s (10) 1%盐...

孝南区13499358140： 有关HE染色 - ？
富送白癜： 苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 .苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分...

孝南区13499358140： 都说HE染色法最常用的,谁能给我具体讲讲... - ？
富送白癜： HE 染色法为苏木精-伊红染色法,是石蜡切片技术里常用的染色法之一,也是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基础、最广泛的技术方法.属性为碱性的苏木素染色液可以使细胞着蓝色,为酸性的伊红使细胞着红色,其结果胞核呈蓝色,胞浆呈红色.两种不同的染色液使细胞通过颜色来改变折光率,在光镜下呈现出细胞图像.HE染色法之所以成为细胞染色最常用的方法是因为HE染色法过程中除化学反应外,还有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核浆对比染色效果.

孝南区13499358140： 求教:硬组织切片HE染色流程 - ？
富送白癜： 很明显应该先脱去树脂再染.但没做过树脂的,不清楚该用哪个有机溶剂溶解洗脱. 我们实验室是用中性树胶封的片,觉得封的不好就会用二甲苯浸泡,将树胶溶掉(二甲苯是树胶溶剂),再用酒精洗去二甲苯.其实HE染色是可以在镜下观察的,每次染完后片子再显微镜下观察颜色是否满意(片子沾上水),浅了就继续染,颜色深了就多分化下,达到理想结果了再封片

孝南区13499358140： 用HE染色法测小鼠脾细胞凋亡.急!!!!!!! - ？
富送白癜： 石蜡组织切片的HE染色1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片. 2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗...

孝南区13499358140： 如何做好细胞爬片的HE染色,有图 - ？
富送白癜： HE染色还是非常好染的,怀疑你的染料有问题,苏木素一般染5分钟就可以了,流水冲洗,温水反兰,伊红我用的不是什么AB,只染一分钟,然后流水洗10分钟,酒精脱水,中性树胶封片.如果放在载玻片上是不会有水渍的,可以用酒精擦下, 五六十度温水即可,30秒到一分钟就差不多了,太蓝了也不好看

孝南区13499358140： 求助:海马切片的制作方法 - ？
富送白癜： 制备离体海马脑片的步骤如下: 1.将大鼠急性断头 2.打开头颅骨,常规切取出海马及其周围脑组织 3.将组织置于充氧的冰冷盐水中(前面三步,所用时间必须<1分钟) 4.组织冷却至少10分钟 5.修整组织 6.用琼脂将修整后的组织粘贴到切片台上...

孝南区13499358140： 谁有组织切片的制作过程 - ？
富送白癜： 一、制备显微标本的切片62616964757a686964616fe4b893e5b19e31333330323262法 一石蜡包埋切片制作法 这是最常用的切片法.以石蜡作为组织的填充支持介质,将整块组织加以包埋,最后凝固成均匀一致的固态结构.用切片机制取极薄...

孝南区13499358140： HE染色是什么染色方法? - ？
富送白癜： 苏木精(Hematoxylin、He),亦名苏木紫或苏木素,用于细胞核的染色.HE染色法是组织学与病理学常用的切片染色方法,HE染色切片标本是学生观察最多的一种切片标本.HE 10X 是说:你的组织切片是用HE染色法做的,是在10倍的光学显微镜下观察所见的结果

孝南区13499358140： he染色是什么(HE染色能检测出什么) - ？
富送白癜： he染色是什么HE染色是一种组织病理的染色方法,通过这个染色可能明确的区分出组织以及细胞的结构,才可能在显微镜下观察组织以及细胞的形态.这在病理诊断中是最常用的染色方法,通过染色可以让人体的组织在显微镜下显示得更清楚...