检测生物体内糖类,脂肪,蛋白质

检测生物体内糖类,脂肪,蛋白质 所有实验步骤和注意事项,~

具体实验操作，注意事项

检测糖类的实质是斐林试剂与还原性糖生成砖红色沉淀.检测脂肪，是用苏丹三或苏丹四将脂肪染色，检测蛋白质是利用双缩尿试剂与蛋白质发生紫色的显色反应，检测淀粉是利用碘单质和淀粉发生蓝色的显色反应。

一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。

3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。）

4. 淀粉遇碘变蓝色。

三．实验材料

1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）

2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3-4小时（也可用蓖麻种子）。

3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

四、实验试剂

斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。

五、方法步骤：

（一） 可溶性糖的鉴定

操 作 方 法
注 意 问 题
解 释

1. 制备组织样液。

（≠组织液、≠细胞液）
苹果或梨组织液必须临时制备
因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，

将产生的颜色掩盖。

2.注入2mL组织样液。

3.注入1mL新制的斐林试剂，振荡。

（现配现用、先混后加）
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、

乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无

Cu ( OH ) 2生成。

4. 水浴加热：试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀）
最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。

也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；

缩短实验时间。

（二）脂肪的鉴定

操 作 方 法
注 意 问 题
解 释

取材、切片、制片：花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3-4小时，新花生的浸泡时间可缩短。
浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。

染色：在子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ（染色3分钟）或苏丹Ⅳ染液（染色1分钟）。
染色时间不宜过长。

漂洗：用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。

酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。

用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片。

滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。

镜检：先低后高（高倍镜用法：移物换器时针反），低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长，油滴会溶解在乙醇中。

三、蛋白质的鉴定

操 作 方 法
注 意 问 题
解 释

制备组织样液。

（浸泡、去皮研磨、过滤。）

黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，

也可购新鲜豆浆以节约实验时间。

加样液约2ml于试管中，

加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3-4滴，摇匀，溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。

CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提

供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。

否则CuSO4蓝色会遮盖反应的真实颜色。

可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内

壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。

附：淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察

高中生物：实验检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质-实验演示视频

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和平区17022096854： 如何检测生物组织中的糖类,脂肪,和蛋白质的原理 - ？
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融朗杞菊：[答案] 糖类是斐林试剂 脂肪是苏丹三或者苏丹四染液 蛋白质是双缩脲试剂

和平区17022096854： 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的实验中,可能用到显微镜的是() - ？
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